DB12-T952-2020猪粪中抗生素残留量检测方法-液相色谱-质谱-质谱法

1、ICS65.202.30B 45DB12天津市地方标准DB12/T9522020猪粪中抗生素残留量检测方法液相色谱-质谱/质谱法The determination method of antibiotic residues in pig manure by liquid chromatography-mass spectrometry2020-08-18发布2020-10-01实施天津市市场监督管理委员会发布DB12/T 952DB12/T 9522020II前言本标准按照GB/T 1.12009给出的规则起草。本标准由天津市农业农村委员会提出并归口。本标准起草单位：农业农村部环境保护科研监测

2、所、天津农学院。本标准主要起草人：支苏丽、张克强、周婧、刘海学、吴惠惠、杜连柱、阮蓉。 PAGE PAGE 7猪粪中抗生素残留量检测方法 液相色谱-质谱/质谱法范围GB/T 6682NY/T 1896-2010原理/ 水：GB/T 6682EDTA-McIlvaine12.9 g5.45 g37.2 g， 1 L。0.1（4.4）0.5 mL500 mL（0.00001100 mg/L-206（4.7）（v/v=50:50）（。OasisHLB6 mL，500 mg。滤膜：0.22 m（ESI。5.20.00001g0.01 。5000 r/min。取适量样品，将充分的样品进行冷冻干燥并粉碎，

3、粉碎后装入洁净容器，并于-18 避光干燥保存。提取称取1.000.0150mL10mLEDTA-McIlvaine 1.0Hz15min4（10000min， 10%。净化6mL6mL1mL/minHLB66mL（速1mL/min401.0mL甲醇:水（1:1，v/v0.1% 甲酸0.22 m=1:1溶510501002005001000 g/L测定C18100mm2.1mm1.8 m7.4.1.2柱温：40A（0.1）；B1。流速：0.3mL/min。5 L。表1梯度脱序步骤时间/min流速/（mL/min）组分 A/%组分 B/%11.50.39010280.3307038.10.3901

4、04120.39010（ESI）。（MRM）。：150500（MRM）A。2.5% 的表2定性认相离丰的最允偏差相对离子丰度50%20%50%10%20%10%允许的相对偏差20%25%30%50%除不加试样外，均按上述操作步骤进行。按公式（1）进行计算目标抗生素的残留量，计算结果需扣除空白值：(1)式中：X试样中抗生素的残留量， g/kg；c从标准曲线上得到的抗生素残留溶液的浓度，ng/mL； v样液最终定容体积，mL；m最终样液代表的试样质量，g； 1000用于单位换算的常数。精密度15NY/T 1896-20102530%。附录A（资料性附录）目标抗生素特征离子参考质谱条件表A.1标生特

5、子参质条件名称母离子子离子锥孔电压（V）碰撞电压（V）保留时间（min）定量限( g/kg)磺胺类磺胺嘧啶sulfadiazine251.2192.04/156.02*3026/163.163.40磺胺噻唑sulfathiazole256.11156.00*/92.022814/263.952.87磺胺甲基嘧啶sulfamerazine265.1091.96*/155.953430/164.231.25磺胺多辛sulfadoxin311.2392.02/156.0*3636/185.893.60磺胺噁唑sulfamethoxazole254.1592.04*/155.963228/186.13

6、5.13喹诺酮类氧氟沙星ofloxacin362.3057.95/261.14*4242/304.590.47恩诺沙星Enrofloxacin360.3316.3*/245.231194.921.13二氟沙星Difloxacin400.3299.21*/58.024030/445.271.67氟罗沙星Fleroxacin370.23269.15/58.02*6228/324.570.25洛美沙星Lomefloxacin352.30265.19*/44.03620/304.810.66依诺沙星Enoxacin321.22205.79*/234.063832/204.440.65氟甲喹Flumeq

7、uine262202*/2443632/167.390.17西诺沙星Cinoxacin263.2189*/245.1426/145.970.19奥比沙星Orbifloxacin396.4295.2/352.1*5333.4/24.85.020.37四环素类土霉素Oxytetracycline461.24426.20*/89.083020/244.581.48强力霉素Doxycycline445.3197.96*/154.053244/345.740.15去甲基金霉素Demeclocycline465.32154.05*/97.963630/525.220.29四环素Tetracycline445.25410.18*/153.993220/284.830.20注：* 表示定量离子附录B（资料性附录）目标抗生素标准溶液离子色谱图西诺沙星（5.97）二氟沙星（5.27）恩诺沙星（4.92）氟罗沙星（4.57）氟甲喹（7.39）洛美沙星（4.81）氧氟沙星（4.59）沙星（4.44）奥比沙星（5.02）多辛（5.89）