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文档简介

1、精选文档精选文档PAGEPAGE11精选文档PAGE血型判定和交错配血中常有问题剖析和办理一、血型相容性检测二、ABO血型正反定型型不一致的原由剖析及办理三、交错配血中常有问题剖析及办理四、不测抗体挑选的意义和检测方法五、弱D检测的的意义和检测方法一、血型相容性检测1、受血者和供血者AB0血型能否相容。2、受血者和供血者RhD血型能否相容。3、主次侧交错配血能否相容。4、受血者血清中能否有临床存心义的不测抗体。二、ABO正反定型不符的原由剖析和办理(一)原由1实验者操作技术的错误:致使假阴性的有:未加入抗体或血清。未辨别溶血。血清与红细胞比率不妥离心速度或时间不够。使用无效或错误试剂。实验结果

2、记录或解说错误致使假阳性的有:离心速度过大或时间过长、使用了遇到细菌污染的试剂、试验器皿不洁净、实验结果记录或解说错误2、红细胞标本问题:患者近期接受了大批ABO血型相容但不一样型的红细胞,如骨髓移植患者,或非O型人接受O型红细胞某些ABO基因变异的个体或ABO亚型红细胞,一些白血病或其余恶性疾病患者的红细胞ABO抗原太弱,应用抗A、抗B试剂未能出现预期的凝集反响红细胞获取性或遗传性的异样,如获取性B抗原红细胞或Tn/T多凝集红细胞,人血清抗A、抗B试剂可能与这些异样的红细胞反响使用未清洗的红细胞标本,其表面黏附的血浆或血清中含针抗衡A、抗B试剂中染色剂或其余成分的抗体,出现假阳性反响患者血清

3、中高活性、高浓度冷自己抗体严重致敏(包被)自己红细胞,以致自觉地发生凝集,而不是抗体试剂的特异性免疫反响所致红细胞表面包被IgG类抗体3、血清标本的问题:小的纤维蛋白凝集的红细胞凝块被误以为是血液凝集,如使用血浆标本或未完好去除纤维蛋白的血清标本时。免疫克制疾病患者血清中ABO抗体减少或消逝。老年人ABO抗体减弱4-6月龄内婴儿血清中ABO抗体阴性或很弱,一般只测正定型血清中不正常浓度和比率的蛋白质成分或高分子蛋白增加可惹起非特异凝集,如缗钱状红细胞的非特异凝集血清中含抗A、抗B之外的其余红细胞抗体,如抗M、抗I等。患者接受了ABO血型不一样的骨髓移植患者血清中含有针对红细胞保护剂的抗体大批C

4、1分子因为异样高效价的补体联合抗体抗A、抗B作用,联合到红细胞膜上,遮盖了A、B抗原位点,不发生凝集(二)、剖析和办理基本程序:1.从头收集标本,以防止收集、标志、污染等错误查问患者既往病史、输血史、用药史、骨髓移植史完全清洗标本或试剂红细胞应用抗AB、抗A1、或抗H检测红细胞剖析抗筛结果,确立结果能否受同种异型或自己冷抗体扰乱室温孵育30min后,离心察看结果,以检测弱的抗原抗体反响做自己红细胞做比较,以确立自己抗体的扰乱ABO正反定型型不符的分类:抗原表达减弱所致的ABO正反定型型不符抗-A、抗-B血清的不测反响所致的ABO正反定型型不符不测的血清学反响所致的ABO正反定型型不符抗原表达减

5、弱所致的ABO正反定型型不符:血型抗原表达减弱的常有原由:ABO亚型红细胞白血病或其余恶性疾病患者的红细胞ABO抗原太弱,应用抗A、抗B试剂未能出现预期的凝集反响重生儿抗原表达减弱所致ABO正反定型型不符的办理:将抗A、抗B和抗A,B试剂与清洗过的红细胞在室温或4孵育30min,以加强抗原、抗体的联合用木瓜酶、无花果酶和菠萝蛋白酶办理红细胞,以加强抗原、抗体的联合应用抗AB、抗A1、或抗H检测红细胞用人血清抗A、抗B进行汲取放散试验,检测弱A、B抗原,但不是全部单克隆抗体试剂都适合做汲取放散试验,单克隆抗A、抗B一定经过系统考证,且同时要做O型血汲取放散试验作比较检测唾液中A、B和H血型抗原物

6、质抗-A、抗-B血清的不测反响所致的ABO正反定型型不符惹起抗-A、抗-B血清不测反响的要素:获取性B红细胞:获取性B红细胞(特色)常出此刻有肠道细菌进入血循环的疾病,也可发生在正常人往常只有A型人能出现获取性B抗原常伴有T和Tn多凝集红细胞出现(细菌感染时)自己抗B不与自己获取性B抗原反响(无自凝现象)获取性B红细胞(判定)调整人血清抗B试剂pH至6.0时,即不与获取性B细胞反响分泌型者唾液中无B血型物质乙酸酐办理能显然减弱其反响,但正常B细胞不受影响获取性类A抗原造血干细胞的体细胞突变可造成部分成细胞连续性Tn抗原激活,类同A抗原Tn和T同样属隐蔽行院抗原,激活裸露后与全部血型的血清和人血

7、清血型抗体出现凝集反响(全凝后多凝)蛋白酶能降解Tn分子,除去与抗A凝集反响性,而正常A抗原不受影响,也可经过AB血清证明混淆视线凝集非O型人近期输用O型血骨髓移植后A3细胞与抗A呈典型的混淆视线凝集现象单合子的镶嵌红细胞后双合子的交移体红细胞抗体包被红细胞患HDN婴儿,存在自己免疫或同种异体免疫的成人,其红细胞严重包被IgG抗体分子与含必定蛋白质浓度的试剂(抗D、抗A、抗B)产生凝集45放散后,抗体解离,即可正确立型不测的血清学反响所致的ABO正反定型型不符惹起不测血清学反响的要素抗体太弱或消逝非正常高浓度的抗A、抗B可惹起前带现象A2、A2B或其余ABO亚型人血清中可能有抗A1患者血浆蛋白

8、浓度过高或静脉输用了大批大分子药物等原由,可发生近似凝集现象,如缗钱状凝集冷自己抗体,如抗I、抗IH、抗IA等自己免疫性温型抗体同种抗体/不测抗体不测的血清学反响所致的ABO正反定型型不符及其办理抗体太弱或消逝,如重生儿、老年人、免疫克制患者,应注意患者的年纪和诊疗非正常高浓度的抗A、抗B可惹起前带现象,致使假阴性,将血清稀释或用EDTA(2.5)办理可除去A2、A2B或其余ABO亚型人血清中可能有抗A1,抗A1只凝集A1型红细胞而不凝集A2、O型红细胞患者血浆蛋白浓度过高或静脉输用了大批大分子药物等原由,可发生近似凝集现象,如缗钱状凝集,将血清用生理盐水稀释3倍或用盐水替代技术可除去冷自己抗

9、体,如抗I、抗IH、抗IA等(自凝),a.全部试剂及细胞37孵育,37下判读结果将冷自己抗体汲取将血清用0.01mol/LDTT办理和再定型自己免疫性温型抗体自己免疫性溶血性贫血病人血清中可有温型自己抗体37反响比室温强血清能凝集自己和其余各型红细胞若红细胞上吸附有这类自己抗体,在自己或别人血清中均可出现凝集自己免疫性温型抗体正定型被误以为AB型,反定型被误以为O型:用递加温度(22,37,45)清洗红细胞后再做血型判定同种抗体/不测抗体:室温下抗-P、抗-M、抗E等,可能出现不测反响,扰乱ABO血型判定,抗体特异性抗体判定,选择抗原阴性的红细胞做反定型应用举例多发性骨髓瘤致ABO血型判定困难

10、1例多发性骨髓瘤(MM):一种恶性浆细胞疾病,大批分泌异样的单克隆免疫球蛋白(M蛋白),影响红细胞表面负电荷状态,血清蛋白浓度和比率异样,A/G比率失调,红细胞呈缗钱状非特异性齐集,给血型判定带来必定的困难。病情简介:患者,女,38岁,因骨痛、贫血2个月住院;Hb65g/L,WBC6.4109/L,PLT90109/L,尿本周蛋白阳性,BUN、Cr均异样;骨髓象示:浆细胞37%。诊疗:多发性骨髓瘤。有既往输血史。血型血清学检查:正定型:A型,RhD(),反定型:O型,直抗:(),抗筛:()办理:1.汲取试验:6次清洗后的患者RBC等量的抗-A、抗-血清(1:128),4孵育1h离心,取上清,测

11、汲取液的抗A、抗B效价抗A降低显然,抗B1:128放散试验:汲取后的患者RBC用NS清洗6次(完全清洗)等量的NS56孵育1015min放散液与5标准A、B型RBC反响Ac:+,Bc:-汲取放散试考证明:患者RBC上有A抗原,无B抗原,为A型将患者血清用O型标准RBC汲取:等份血清等份O细胞,室温振荡1530min离心,取上清,转移到另一等份O细胞中汲取后的血清与标准A、B红细胞反响Ac:-,Bc:+(患者血清中有抗-B,无抗-A)患者血型最后确立为A型RhD(),输注2U经过挑选的A型悬浮RBC后,未见任何不良反响三、交错配血试验中常有问题剖析和办理交错配血原则:除非极为紧迫状况,输血前患者

12、与献血者一定进行交错配血R受血者血清中无马上或迟发性地凝集和(或)溶解所输入的红细胞的抗体R献血者血清中无马上或迟发性地凝集和(或)溶解受血者红细胞的抗体交错配血方法:盐水介质交错配血:只好检出IgM类抗体(主为ABO血型系统抗体),没法检出IgG,拥有很大的危险性,只好在受血者血清中不含临床存心义抗体的状况下进行。检测不完好抗体的交错配血:临床最常有的迟发型输血反响ABO系统之外的其余血型(如Rh)的IgG类抗体致使的血型不相容有输血史、妊娠史或血清中存心外抗体的患者一定进行不完好抗体的交错配血试验包含抗人球蛋白法、蛋白酶法、促凝剂法等抗人球蛋白法:判定不完好抗体最靠谱的方法,传统的抗人球法

13、不可以成为临床输血的惯例查验。1986年,Lapierre发明的微柱凝胶抗球蛋白试验正确、靠谱、不需清洗,可方便的应用于抗体筛检和交错配血试验交错配血不相容的原由及解决方法血型判定错误:出现问题最多的是受血者、献血者红细胞ABO血型不相容,其次才是技术错误。复查血型(责任错误)患者存在冷反响自己抗体:采纳自己比较和37水浴以及递加盐水温度清洗患者红细胞等方法清除非特异性凝集的扰乱患者存在温反响自己抗体:采纳汲取放散试验后取患者的红细胞与血清和同型的清洗红细胞进行交错配血。血清蛋白杂乱及白球蛋白比率倒置惹起的假凝集:如多发性骨髓瘤、肺癌、肝癌患者等。多表现为主侧凝集E:ABO之外的其余血型系统惹

14、起的交错配血不合:常发生于有输血史、妊娠史的患者,产生主侧凝集。如抗D、抗E、抗C、抗c、抗I、抗e和抗Fyb等,用经挑选的不含相应抗原的血液进行交错配血即可除去。献血者红细胞DAT阳性:大概万分之一健康人包被了IgG或补体的红细胞,不该输用此类细胞。献血者红细胞是多凝集红细胞:正常人血清中可含有非红细胞刺激而产生的自然发生的抗体,如抗T、抗Tn等。应挑选低水平抗T、抗Tn的血液四、不测抗体挑选的意义和方法不测抗体:是指除ABO血型系统抗体之外的其余抗体,如抗D、抗E等。主要经输血或妊娠等免疫刺激产生,人群检出率为0.32.0,是惹起迟发性免疫反响的主要原由。临床存心义抗体:惹起重生儿溶血病、

15、溶血性输血反响,或许使输入的红细胞存活期减少的、在37反响的同种异型抗体。(IAT阳性!)临床无心义抗体:室温或低温反响的抗体,但抗-Vel,抗-P等,在体内惹起显然的红细胞损坏。挑选方法要求:1.选择敏感的技术检测出受血者血清中特别低水平的临床存心义抗体。高度注意!即便受血者血清中抗体对输入的不相容红细胞抗原呈弱反响,但也可以发生迅速的强的回想反响,增添抗体产生,损坏红细胞每一试剂瓶中只好有一人份的试剂红细胞,不行将多人份红细胞混淆,以防止红细胞混淆后对弱抗原红细胞的稀释。FDA对试剂红细胞抗原表达的要求:D,C,E,c,e,M,N,S,s,PI,Le,Lea,Leb,K,k,Fya,Fyb

16、,Jka,Jkb.挑选方法实验方法:1.盐水直接凝集试验:是最简单的血型血清学方法,紧迫状况下可在室温下立刻离心。可检出室温或低于室温反响的临床意义不大的抗体如抗M、抗N、抗P、抗Lea等球蛋白试验:可检出绝大多数临床存心义的不完好抗体,抗球蛋白试剂要有多特异性抗球蛋白抗体,此中含有抗IgG和抗C3d。含抗补体的球蛋白也能够检出联合补体的无临床意义的冷抗体,如抗I、抗HI等其余试验:蛋白酶试验、聚乙二醇试验、LISS和微柱凝胶试验等各样试验都有其自己的特色,合用不一样范围,实验室应依据自己的条件,成立实验室惯例试验程序和规程抗体特异性判定:血清标本,EDTA抗凝(防止补体体外致敏红细胞)血浆标

17、本病史:输血、妊娠、用药试剂:谱细胞、加强介质,抗人球蛋白试剂自己比较对谱细胞的要求A:许多于8人份的O型红细胞B:血型系统包含:Rh,Kell,Duffy,Kidd,P,Lewis,MNS自己比较的意义:阴性:血清只与试剂红细胞反响,只有同种抗体存在阳性:有自己抗体存在,或与同种抗体并存自己汲取后判定同种抗体!抗体挑选的意义发现临床存心义的抗体减少溶血性输血反响的发生有益于免疫溶血性疾病的诊疗有益于提早选择和准备相合的血液保证临床输血安全、实时、有效1抗体挑选阴性,盐水介质交错配血不相容供受血者ABO血型不相容受血者A2或A2B亚型,血清中抗A1与供血者A1或AB型红细胞凝集存在室温反响的同

18、种抗体,如抗-M等献血者是多凝红细胞,隐蔽抗原T、Tn等裸露2抗体挑选阴性,检测不完好抗体的交错配血不相容献血者是红细胞DAT阳性万分之一健康人红细胞表面包被IgG或补体,不该当输此类红细胞抗体与低频抗原反响人群1%血清中含有针对低频抗原的抗体挑选细胞一般缺乏低频抗原3抗体挑选阳性,交错配血相容自己抗-H,O型红细胞含有大批H抗原,而A1、A1B含量很低。室温反响,37无反响,无临床意义献血者红细胞正好不含对应的抗原抗-Lebh只与O型Le(a-b+)反响,不与A1、A1BLe(a-b+)反响,室温反响,37无反响,临床意义不大4抗体挑选阳性,交错配血不相容、同种抗体存在,自己比较阴性选择对应抗原阴性的血做交错。如抗体是抗-M、抗N、抗-P1、抗-Lea等就不必确认对应抗原缺失,但需37交错配合、同种抗体存在,自己比较阳性近期(2-3月)接受过输血的患者体内的同种抗体可惹起自己比较阳性循环中的自己抗体可惹起自己比较阳性差别二者很重要(很难),因选择红细胞程序不一样可用对应抗原阳性的细胞做汲取放散实验来证明同种抗体存在患者血清中的同种抗体可与输入的红细胞起反响如是存心义的抗体,应选择抗原阴性红细胞输血37度抗人球交错配血相合是一定的、冷反响自己抗体强反响冷抗体(疾病)惹起血型判定和交错配血困难,临床

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