高效液相色谱仪校验方案

1、高效液相色谱仪校验方案登记号：PQP-QC072版本：02生效日期：2017.09.01JSALPHARM仪器编号：QC-0072Page1of12题目Title咼效液相色谱仪校验方案方案号Document#PQP-QC072-02设备编号Equipment#QC-0072安装地点Location咼效液相色谱室生产厂家Manufacturer日本岛津（Shimadzu）公司方案审批：ApprovedBy姓名Name职位Position签名Signature日期Date陈凯QC分析人员于勇QC主管莫远略质量部长江苏阿尔法药业有限公司JiangsuAlphaPharmaceuticalCo.,Lt

2、d.高效液相色谱仪校验方案登记号：PQP-QC072版本：02生效日期：2017.09.01JSALPHARM仪器编号：QC-0072Page2of12目的确认人员及职责确认前确认确认依据及判定标准确认内容再确认要求确认结果汇总结果评价高效液相色谱仪校验方案登记号：PQP-QC072版本：02生效日期：2017.09.01JSALPHARM仪器编号：QC-0072Page3of121.目的明确稳定性试验箱的校验项目、校验条件、校验方法、接受标准、校验周期等，便于检验人员按规程进行稳定性试验箱的校验操作。保证实验室使用的称量点称量的准确性。2确认人员及职责QC分析人员：负责起草确认方案和报告、组

3、织协调开展确认;QC主管：审核确认报告和报告；质量部长：批准确认报告和报告。确认前确认3.1人员确认姓名职务职责签名日期陈凯QC分析人员起草确认方案和报告，执行确认、组织培训赵家宽QC分析人员协助执行确认于勇QC主管监督确认的进行3.2文件培训序号培训内容是否培训1LC-2040C型高效液相色谱仪标准操作规程（QC-3079）是口否口2LC-2040C型高效液相色谱仪维护保养标准操作规程（QC-3080）是口否口3液相色谱仪的校验操作规程（QC-4002）是口否口4高效液相色谱仪校验方案（PQP-QC072）是口否口5检验室安全管理规程（QC-1018）是口否口高效液相色谱仪校验方案登记号：P

4、QP-QC072版本：02生效日期：2017.09.01JSALPHARM仪器编号：QC-0072Page4of123.3校验设备确认序号设备及要求是否符合1秒表：分度值不大于0.1s是口否口2分析天平：最大称量200g,最小分度值0.1mg是口否口3容量瓶：10.0mlA级不少于10支是口否口4温度计：分度值不大于0.1C是口否口5以上设备应在校验有效期内是口否口3.4标准物质和试剂确认序号标准物质、试剂及要求是否符合1甲醇：HPLC级是口否口2纯水：HPLC级是口否口3丙酮：分析级是口否口4奈：是口否口检测人：日期：年月日复核人：日期：年月日确认依据及判断标准4.1确认依据4.1.1LC-

5、2040C型高效液相色谱仪安装使用说明4.1.2液相色谱仪校验规程JJG705-20144.1.3中国药典2010年版二部附录4.1.4药品GMP指南2010年版高效液相色谱仪校验方案登记号：PQP-QC072版本：02生效日期：2017.09.01JSALPHARM仪器编号：QC-0072Page5of124.2评判标准4.2.1性能确认（PQ）系统校验项目标准输液系统1、泵耐压2、泵流量设定值误差Ss3、泵流量稳定性Sr4、梯度误差Gj符合规定2%2%3%柱温箱系统1、温度设定最大误差2、温度稳定性2工W1C/h检测器系统1、基线噪音2、基线漂移3、最小检测限5x10-4AU5x10-3A

6、U/30min5x10-6g/ml（萘/甲醇溶液）整机性能1、定性重复性2、定量重复性3、线性测定1.0%0.999确认内容5.1性能确认（PQ）5.1.1输液系统确认5.1.1.1泵耐压：仪器连接完好后，以100%甲醇为流动相，流速0.2ml/min.启动仪器，待压力平稳后，观察10分钟，应无漏液现象。卸下色谱柱，堵住泵出口（压力传感器以下），使压力达到最大允许值的90%，保存5分钟，应无漏液现象。5.1.1.2泵流量设定值误差SS、稳定性误差Sr：启动仪器，按上表的要求设定流量，压力稳定后，用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集上表规定时间流出的流动相，在分析天平上称重，

7、按式（1）、（2）计算Ss、Sr高效液相色谱仪校验方案登记号：PQP-QC072版本：02生效日期：2017.09.01jsalpharm仪器编号：QC-0072Page6of12流量（ml/min）次数W1W2W2-W1SsSr0.51231.01232.0123注:Fm=（W2-WJ/（pt）Ss=（f-Fs）/Fsx100%式（1）SR=（Fmax-Fmin）/Fmx100%式（2）式中：Fm实测流速；W2容量瓶+流动相的质量，g；W1容量瓶的质量，g；p试验温度下流动相的密度，g/mL；_收集流动相的时间，min；需同一组测量的算术平均值，mL/min；FS流量设定值，mL/min；F

8、max同一组测量中流量最大值，mL/min；Fmin同一组测量中流量最小值，mL/min。5.1.1.3梯度误差Gi：色谱条件：色谱柱：限流阻尼管流速：2.0ml/min检测波长：265nm流动相A：纯化水流动相B：0.1%丙酮水溶液以流动相A平衡系统，按表2梯度程序测试2次，记录色谱图。画出B溶剂经5段阶梯从0%到100%B梯度变化曲线（如图1），求出由B溶剂变化所产生的每一段阶梯对应的响应信号的变化值匚；按下列公式（1）计算每一段阶梯对应的响应信号值的变化平均值匚；按下列公式（2）计算五段阶梯对应的响应信号值的总平均值7；按下列公式（3）ii高效液相色谱仪校验方案登记号：PQP-QC072

9、版本：02生效日期：2017.09.01JSALPHARM仪器编号：QC-0072Page7of12计算每一段阶梯的误差Gj,取Gj的最大值作为仪器梯度误差报告。表2梯度程序时间（分）流动相A%流动相B%1.00100.00.01.0180.020.04.0080.020.04.0160.040.07.0060.040.07.0140.060.010.0040.060.010.0120.080.013.0020.080.013.010.0100.016.000.0100.021.00100.00.026.00100.00.0图1梯度组成准确度示意图输出信号输出信号时冋高效液相色谱仪校验方案登记

10、号：PQP-QC072版本：02生效日期：2017.09.01JSALPHARM仪器编号：QC-0072Page8of12公式（1）(L-L)+(L-L)公式（1）L=1i4)2i2(i-1)i2_mLiL=4公式（2）inL-LGix100%公式（3）i=Li式中：匚第i段阶梯响应信号值的平均值；iL1i第i段阶梯第1组响应信号值；L1i-1第（i-1）段阶梯第1组响应信号值；L2i第i段阶梯第2组响应信号值；L2i-第（i-1）段阶梯第2组响应信号值；L5段阶梯响应信号值的总平均值；iGi第i段阶梯的梯度误差iL1iL1iL1iL1(i-1)L2iL2(i-1)L.Gi1i2345柱温箱系

11、统确5.1.依次设定柱温箱温度为25C,35C,45C值进行校验，这些温度应覆盖实验室使用的柱温范围，当使用柱温超出该范围时，需要增加该温度点校验。设定待校验温度，待测温仪显示的温度稳定后，记录温度显示值，每隔10分钟记录一次,每个温度点记录7次。求出平均值，设定值与平均值之差为设定值误差T，7次测量值中最大值与最小值之差为控温稳定性误差Tc。高效液相色谱仪校验方案登记号：PQP-QC072版本：02生效日期：2017.09.01JSALPHARM仪器编号：QC-0072Page9of12设定温度次数测定温度平均温度ATTc25工123456735工123456745C12345675.1.3

12、检测器系统确认5.131基线漂移和基线噪声：色谱条件：色谱柱：C18柱流速：1.0ml/min检测波长：254nm流动相：甲醇在分析界面中点击基线检查，设置参数后，点击运行，工作站会自动记录30分钟，运行完毕后，机器自动计算出结果，给出是否通过的结论。将运行界面复制到Word文档中，打印出来即可。其他型号站基线漂移和基线噪声的测试方法：按不同的仪器配置，设定检测器的灵敏度高效液相色谱仪校验方案登记号：PQP-QC072版本：02生效日期：2017.09.01jsalpharm仪器编号：QC-0072Page10of12为最强灵敏度。待系统平衡后，调整基线在图谱的中部位置，记录基线30分钟。以图

13、谱显示的刻度值，计算基线噪音和基线漂移值。基线漂移：5x10-4AU基线噪声：5x10-3AU/30min5.1.3.2最小检测限：按上述色谱条件，平衡系统。取20川的1x10-7g/ml萘/甲醇溶液进样，记录色谱图。按下列公式计算最小检测限：2NcV=dL20H注：Nd与H的单位应一致；分母中的20为进样体积，单位为山。式中：CL最小检测浓度,g/ml；Nd基线噪音高度；c标准溶液浓度,g/ml；V进样体积，pl；H标准溶液的峰高。最小检测限（最小检测限（CL）=2NcVd20H5.1.4整机性能确认5.141定性与定量重复性：色谱条件：色谱柱：C18柱流速：1.0ml/min检测波长：25

14、4nm流动相：甲醇取1x10-4g/ml萘/甲醇标准溶液连续进样6次，记录色谱图，以萘峰的保留时间和峰面积，计算相对标准偏差RSD，即为整机性能的定性与定量重复性。表5进样次数123456平均值RSDRT（min）峰面积5.142进样针性能线性：取1x10-4g/ml萘/甲醇标准溶液，分别以5$、101、151、201、30pl的体积进样，记高效液相色谱仪校验方案登记号：PQP-QC072版本：02生效日期：2017.09.01JSALPHARM仪器编号：QC-0072Page11of12录色谱图。重复测定3次。以进样体积Vi为横坐标，以3次萘峰平均面积Ai为纵坐标作线性回归，得其线性方程及相

15、关系数R。表6进样体积（卩1）510152030平均峰面积线性方程，相关系数R5.1.4.3线性：配置萘/甲醇标准溶液，使浓度分别为0.2x10-4g/ml、0.4x10-4g/ml、0.6x10-4g/ml、0.8x10-4g/ml、1.0 x10-4g/ml、1.2x10-4g/ml以20pl的体积进样，重复测定3次，记录色谱图。以进样体积Vi为横坐标，以3次萘峰平均面积Ai为纵坐标作线性回归，得其线性方程及相关系数R。样品浓度x10-4g/ml0.20.40.60.81.01.2平均峰面积线性方程，相关系数R6再确认要求6.1再验证周期6.1.1设备大修后需再校验。6.1.2由于检修、调整、迁移或其它原因，可能对设备的安装情况、主要技术参数和功能有影响时，应进行再验证。6.1.3高效液相色谱仪的验证周期为12个月，更换部件或对仪器性能有怀疑时，应随时验证。6.2再验证内容进行设备的再校验，可针对设备性能中部分必须的项目进行再验证，而不一定要进行全面的验证。高效液相色谱仪校验方案登记号：PQP-QC072版本：02生效日期：2017.09.