生物制药工艺学习题

1、(完整版生制药工艺学习题生制工学名解1 药 Medicine（remedy用于预防、疗或诊断病或调节体生理功能、促进机体康复保健的质，有 4 类：预药、治疗药诊断药和复保 健药。2 生药 （biopharmaceutics以生物体、物组织或成份为原 (包括组织细胞、细器、细胞成分、代谢、 排泄物）综应用生物、物理化与现代药学的原理与方法加工制成药物3 基药 （gene medicine是以基因物（ 或 DNA 及衍生物）作治疗的物基础,括基因治疗的重组目的 DNA 片、重组疫、反义药和核酶等。4 反药 : 是以工合成十至几十反义寡核苷酸序列，它能与模板 或 mRNA 互形成稳的双链结构抑制靶

2、基因的转录 mRNA 翻译，从而达到抗瘤和抗病作用。5 生制 (biologics)： 是用普通的以基因工、细胞工、蛋白质工程、发酵工程等生物技术获得的微物、细 胞及各种动和人源的织和液体生物材料制备的 ,用于人类病预防、治疗和诊断的药品。6 RNA 干 (RNAi,RNA interference 是指在生物细胞内，dsRNA 引起源 mRNA 的特异性降 ,因而抑制相应因表达的程。7 siRNA interfering : 是一种小 RNA 子（21-25 核酸,由 Dicer（RNAase 家族对双链 RNA 具有特异性的 加工而成 siRNA siRISC （RNA-induced s

3、ilencing complex 由核酸内酶、核酸切酶、解旋酶等 构成，作用对靶 mRNA 进行识别切割)的主要成员激发与之补的目标 mRNA 的沉默1、酶程（enzyme engineering是从应用目出发，研酶和应用的特异催化功能，并通过工程化过将相应原转化成所产物的技。2、固化 （immobilized enzyme 是指助于物理和化学的方法把酶束缚在定空间内具有催化性的酶制剂，酶 经固定化以稳定性有提高，而可以反复使用，并能实现反应连续、自动化简化产品纯化工艺3、原质融 :用脱壁酶处将微生物胞壁去除制成原生质，再用聚乙二醇（ PEG）促进原生质体发生融合，从而得融合子技 术。4、杂育

4、 ：杂交育种一指将两个因型不同菌株通过接合使遗传物质重新组合 再从中离和筛选具有新性的菌株 杂交后杂种不仅能服原有菌活力衰退趋势，而且，杂交育种使得遗传物重新组合 ,大了异范围，改了产品的量和 产量。5、诱育 ：诱变育种是有意识地生物体暴于物理的、化学的或生物的一种或种诱变因下，促使物体发生变，进而从 突变体中筛具有优良状的突变的过程。1S(完整版生制药工艺学习题S6、感态胞在分子克隆程中，宿细胞需经人工处理成能吸收重组 分子的感细胞才用于转化此的细胞称为感受态 细胞.7、原细 ： 是直接自动物组织器官，经过散、消化得的细胞液。8、二体胞 ：原代细胞经传代、筛、克隆 ,从而由种细胞成分的组织中

5、挑选强化具有定特性的胞株 ,其特点是：1染色体组 仍然是 2n 的模型；）具有显贴壁依赖和接触抑制特性；3具有有限增殖能力 4）无致性。1。 析 ：是利用种生物分在浓盐溶液中溶解度的差异通过向溶中引入一数量的中盐使目的或杂蛋白以 沉淀析出，到纯化目的方法。2。 Ks 盐 ：在一定 pH 和温度下改变离子强度(盐浓度）进盐析，称 盐析法Ks 盐析法多于提取的前期分离 工作。3析在一定离强度下仅变 pH 和度进行析，称作盐析法。分离的后期阶段，为了求得较好的辨率，或者为了达到晶的目的,时应用盐法。盐法由于溶溶解度变缓慢且变化幅度小，沉淀分辨率比 K 析法好。4亲沉 : 用亲和应原理将配基与溶性的载

6、偶联后形载体配基复合物（亲和沉淀剂该复物可选择 地与蛋白质合,在一定件下沉淀来。1、附法 (adsorption 指利用附作用，将样品中的生活性物质杂质吸附适当的吸附剂上，利用吸附剂对 活性物质和质间吸附力的差异使目的物和其它物质分离，达到浓和提纯目的方法。2大格聚吸剂(macroreticular adsorbent 合成脂时，加一种惰性组分，它不参与聚合反应，但能和单体互溶，称致孔剂。网络骨架化和链结构单元形成后，用溶剂萃或水洗蒸的方法将孔剂去掉就留下了不受外界条件影响永久孔隙,孔径远大于 24nm,可达到 100nm 甚至 1000nm 以上，故称“孔” .与孔网状子交换树脂相比，它不含

7、子交换树的功能团仅保留了多孔的骨架，其性质与活炭、硅胶吸附剂相，称为大网状聚合物吸附 剂。1、亲反团取Affinity-based resersed micellar extraction 是指在反胶相中除通的表面活剂 (如 AOT以外，加另一种水头部为目标分子的亲和配基的助面活性剂通过亲和配与目标分的亲和结作用促进目标产物在反胶团相的分配提目标产物分配系数反胶团萃取分离的 选择性。2、亲膜：利用亲和配修饰微滤为亲和吸介质亲和纯化目标蛋白质固定床和层析的型张微滤比喻为一个固定床，则膜厚即为层高度 .优点是传质阻力小，达吸附平衡时间短，基利用率高 ;压降小，流速 ,设备体小，配基用量2(完整版生

8、制药工艺学习题低。3、二作亲沉 （secondaryeffect affinity precipitation) ：利用在物理（如 pH、离子强度、温度和加金属离等）改变溶解度下降、发生可逆性沉淀的水溶性聚合物载体固定亲和基，制备和沉淀介 .和介质结目标分子，通过改物理场使介质与目标分子共同沉淀方法成为 次作用亲和淀。4、亲萃 ：用聚乙二醇PEG）/聚糖(Dx）或聚乙二醇无机盐双水相系统取分离蛋质等大生分子 ,特是胞 内酶的双水萃取法利用偶联和配基的 PEG 成相聚物进行目标物的双水萃取可在亲配基的亲和结合作 用下促进目产物在 PEG 相上相）的分，提高目产物的分系数和选择性。5、亲吸剂由载体

9、及配偶联构成 , 在亲和层析起可逆结合的特异性物质称为配基 Ligand 与配基结合的析介质称载体 (Matrix ）.6、负脱：双底物反中，与配互补的酶的亲和吸附 如果附取决于 A 物的在与否则洗脱液除去 A 物时，附 在配基上的补分子也洗脱下来,这种洗脱方法也称负洗脱 生制工学 答第一章生药概1 基重组药物基因药物什么区别？答：基因重药物是指用重组 DNA 技术包括基因程技术和白质工程技术）制造的重组多肽、蛋白质类药和疫苗、单克隆体与细胞子等，药的化学成分属于多肽或蛋白质；基药物是以因物质（ 或 DNA 及其衍生）作为治疗的质基础 ,包括基因疗用的重组目的 DNA 片段、重疫苗、反义药物和

10、核酶等,药物的化学成分为核或其 衍生物。2 生药物有那作用特点答1）药理学特性：药理活高；治疗针对性强；毒副作用较少，营养价值；生理副用常有发等2理化特性有：生物料中的有物质含量，杂质种类多且含量相对较高；生活性物质成结构复，稳定性；生物材料 易染菌，腐；生物药制剂有特要求 .3、基因工程药主要有哪类 ?举例说 .答：基因工药物是指用基因工或蛋白质工程技术制造的重组活性肽、蛋白及其修饰，包括 :1)组细因子类：如干素（IFN介（IL)和肿瘤死因子 TNF)；2）重组生因子类：如表皮生长因子（ EGF)、经生长因子（NGF及促进造血系统的生长子：如促细胞生成（落刺激子等（CSF）;3)重多肽与白

11、质类激素如重组人胰素（rhInsulin组人长激素等rhGH）;4)心管病疗剂及酶制剂：如水蛭、tPA(组纤溶酶原激物冬酰胺、超氧化物歧化酶等5）重组疫苗单抗制:如重组乙肝表抗原疫苗（酵、 肿瘤疫苗等3(完整版生制药工艺学习题第二章生物制药工技术基础1、生物药物分制备的基特点有哪？答：）生物材料组成非常复杂； 2)些化合物生物材料含量极微 3生物活性成分离开生物体后 易变性破，因而须注意保护生理活性生物药中的分离方法常带有很大的经验分5生制药中的离方法多用温和多 阶式方进行；6）生物产最后均一性的证明与化学上纯度的概念不完全同。2 简单克隆抗 (monoclonal antibody）的备原理

12、。答B 细胞群抗原刺激能产生针抗原决定簇的特异性抗体 ,一个集体可生多达 100 种特异性不的抗体但一 细胞却只能泌一种特性抗体 B 细胞小鼠骨髓瘤细胞融合后有限稀释把产生不抗体的杂瘤细胞分开，挑选出单个交瘤细胞每个杂交瘤细胞只分泌一种特异性抗体养单个杂交细胞使无性繁殖成细胞集落 (称 之为克隆，同一个隆的杂交基因相同，合成并分泌的特异性抗体质地均一这种抗体为单克隆体。3 简生物大分物质分离化的主要原理。答： 生物分子分离化的主要理是 :）根据分子状和大小同进行分离，如差速离心与超离心、膜分离、胶过滤等2）根据分子离性质（电性）差异进行分离如离交换法、电法、等电焦法；3）根分子极性大及溶解度不

13、同进行离，如溶提取法、流分配法、分配层析法、盐析法、电点沉淀有机溶剂级沉淀等 4）根据物 质吸附性质不同进行离，如选性吸附与吸附层析等； 5）根据配体特性进行分，如亲和析法等。第五章 沉淀法答）1.什么盐析作用盐析的原是什么?答：盐析作：向蛋白溶液中逐加入中性盐，在高盐浓度时，蛋白溶解度随减小，发了盐析作。产生盐析作用的一个原因由于盐离与蛋白质面具相反电性的离子基团结合形成离子因此离子部分和了蛋白质的电性使蛋白质分子间电排斥用减弱而相互靠拢 ,聚集起来盐析作用的另个原因是于中性盐亲水性比白质大 ,离子 在水中发生化而使蛋质脱去了化膜，暴露出疏水区域 ,由于疏水区的相互作 ,使其沉。2.如何择盐

14、析所中性盐？(1）盐作用要强一般来说价阴离子的盐析作用强，有时多价阳离子反而盐析作用低。（2)盐析用盐要有够大的溶度且溶解受温度响应尽可能小 .样便于获得高浓度盐溶液利于操作,尤是在较 低温度下的作，不致成盐结晶出，影响盐析效果。（3）盐析用盐生物学上惰性的，致影响蛋白质等生物分子的活性 ,最好不入给分离测定带来烦的杂质。（4）来源丰富经济。3。有机溶剂沉的原理是么？答：亲水性机溶剂加溶液后降了介质的介电常数 ,使溶质子之间的静电引力增加，聚集形成沉淀；水溶有机溶剂本身的水合用降低了由水的浓，压缩了亲水溶质分子表面原有水层的厚度降低了它亲水性，致脱水凝集。 4.有机剂沉淀影沉淀效果因素有那些？

15、4答 （1）有机溶剂类及用量(）pH 的影响(3）度无盐的含量(完整版生制药工艺学习题（4)某些金属子的助沉淀作用5)样品浓度第章 吸分离 (案四问题1、简述吸附法定义和特 .吸附(adsorption ） 指利吸附作用 ,将样品中的生物活性物质或杂质吸于适当的附剂上利用附剂对活性 物质和杂质吸附能力差异,目的物和其物质分离达到浓缩提纯目的的方法。吸附法具有下列点：(1）设简单、操简便、价、安全。（2）少用或用有机溶，吸附与脱过程中 pH 变小，较少引起生物活性质的变性活。(3)天吸附剂特别无机吸附剂的吸性能和吸条件较难制，吸附选择性差,收率高，难以连操作.2、影响吸附的素有哪些吸附剂的特：吸

16、附现在界面发，因此吸附剂比表面积愈大，吸附愈多。通活化的方也可增加吸附剂的吸附容 量。另外还求吸附剂机械强度，吸附速度快吸附物的性：能使表张力降低物质 ,易为表面吸附；一极性吸附剂易吸附极性物质，非极性吸附剂易附非极 性物质溶质从较易解的溶剂被吸附时，吸附量较少；对于同系列物质，吸量的变化有规则的;吸物若能溶剂形 成氢键，则附物极易于溶剂之 .吸附条件：温度：吸附越大,温度吸附的影响大; 值溶液的 pH 值溶液 pH 值可控吸附剂或附物解离况，进而影响吸附 量,对蛋白质或类等两性质，一般等电点附近吸附量最大；盐浓度 ;溶剂的响。吸附物浓度吸附剂用：一般情下吸附物浓度大时，吸附量也大。第九章亲和

17、纯化技（答案）1、亲和层析的理是什么?要特点是什 ?答:亲和层析的计和过程致分为以三步：）配基固定化：选择合适配基与不性的支撑体偶链，或共价结合成具有特异亲和的分离介 ;2附样品和层介质选择吸附酶或他生物活性物质质与析介质间没亲和作用故不能被吸而被洗涤除；3样品解析：择适宜的件使被吸的亲和介质上的酶或其他生物活性质解析下。亲和层析技的最大优在于利它从提取液中经过一次简单的处理可得到所的高纯度性物质此外亲和层还有对设备求不高、作简便、用范围广、特异性强、分离速度快分离效果、分离条温和等优：其主要缺点是亲和吸附剂用性较差要分一种物质差不多都得重新制备专用的吸附剂 .外由于洗条件较苛 ,须很好地控制

18、洗脱 条件，以避生物活性质的变性活 .2、对亲和层析公式 L V K0 L进行说明。 K =10求 (6 分L 0Ve 为洗脱体 (1 分 V 固定相（床）体积（1 ) L 固定化配基度（1 分 K 为亲对解离常数亲0 0 L和势 分)； 只有当留值10 时亲层析才是效（分离)的.1+L / K 10，将 K =10 代入得 /109，所，L 910（2 分0 L L 0 05(完整版生制药工艺学习题3、何谓“手臂？其长短亲和层析果有何联系？为什么？答：有时候小分子物（如酶的因子）作为配基直接偶联至琼脂糖胶珠粒上备亲和层介质时，管配基和酶间的亲和力在合的范围内但其吸附容往往是低的这是由酶的活性中常是埋藏其结构的部它们与介质的空间障碍影响其与和配基的合作用 为了改这种情况在载体和基间插入一个物质称为“手臂 ，消除空间障碍。手臂的长度有限的 ,不