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1、宫颈脱落细胞学液基薄层检测技术1提纲 为什么要开展宫颈/阴道细胞学检查 宫颈/阴道细胞学检查基本知识 液基薄层检测技术 TBS报告系统 如何选择检查对象 标本采集 常见细胞/病变图片2为什么要开展宫颈/阴道细胞学检查关于宫颈癌宫颈癌的发病率,在女性恶性肿瘤中居第二位全世界每年约50万新发病例,其中80发生在发展中国家。中国每年约20万新发病例,占40%发病年龄呈现年轻化趋势。中国人发病通常在35岁以后,高峰在4549岁之间,但近年大量早期病变在35岁以下,甚至30岁以前著名女演员李媛媛、梅艳芳相继因宫颈癌而去世,使宫颈癌成为中青年女性关注的焦点,部分女性朋友在关注之余,还对自身健康状况产生了莫
2、名的担忧3宫颈/阴道细胞学检查基本知识一、正常细胞形态特征(一)正常鳞状上皮细胞形态 女性生殖道的阴道及宫颈阴道部表面为复层鳞状上皮细胞。在正常卵巢功能影响下,复层鳞状上皮一般由十多层细胞组成,由最底层到表面可分为三类,即底层细胞、中层细胞和表皮细胞。 1 底层细胞 相当于组织学上的深棘层。细胞圆形,核居中,又可分为两种:(1)内底层细胞(2)外底层细胞4宫颈/阴道细胞学检查基本知识 2 中层细胞形态特征:相当于组织学的浅棘层。细胞多角形,胞浆嗜硷性,核疏松。细胞大小不一,取决于细胞成熟的程度。未成熟的细胞胞浆致密而均匀,细胞越趋向成熟,其体积越大,胞浆越趋向透明。中层细胞的胞浆被阴道杆菌破坏
3、后出现裸核。 3 表层细胞形态特征:细胞呈多角大方块形,核固缩,胞浆 嗜酸,也可嗜硷。5宫颈/阴道细胞学检查基本知识(二)正常柱状细胞形态 1宫颈柱状上皮细胞(1)分泌细胞:高柱状或立方形,核位于底部 纤毛细胞,圆形或卵圆形,核染色质细致,分布均匀,形状一 致,但大小不匀。胞浆内可有空泡。细胞多成群出现,可排列成栅栏状或蜂窝状。(2)纤毛细胞:立方形或矮柱状,有纤毛,核圆形或卵圆形,位于底部。栅栏状柱状上皮 蜂窝状柱状上皮 纤毛细胞6宫颈/阴道细胞学检查基本知识2子宫内膜细胞(1)形态特征:与宫颈内膜细胞相似,但较宫颈内膜细胞小,约为中性多核白细胞的13倍,核呈圆形,胞浆少,边界不清。(2)生
4、育期子宫内膜细胞随月经周期变化而变化。(3)绝经后子宫内膜细胞形态特征:细胞呈萎缩型,细胞量较少,呈小片状排列,细胞很少重叠,大小一致,矮小,核呈梭形、椭圆或固缩成小圆形,胞浆少,淡兰色,边界较清。 (4)在阴道涂片中的意义月经期或月经期前后或排卵期出现子宫内膜细胞属正常,若在绝经后或月经期的其他时间出现则属异常。此外,带宫内节育器的妇女涂片内有时可以见到子宫内膜细胞。 7宫颈/阴道细胞学检查基本知识(三)阴道涂片中的其他成分 在涂片背景中最常见的非上皮细胞是各种血液成分和组织来源的细胞1 中性多核白细胞:往往是感染的标志,也是测量其他细胞大小的标尺。2 红细胞3 组织细胞:大小形状有很大差异
5、。在阴道及宫颈炎症、宫颈癌、流产及放疗后较多见。4 淋巴细胞:少见,常见于滤泡性子宫颈炎及罕见病例如子宫颈结核或恶性淋巴瘤等。浆细胞:常与淋巴细胞同时出现。 小组织细胞 大组织细胞 8(四)卵巢功能细胞学诊断1 卵巢功能影响:涂片内基本无底层细胞,以致密核表层细胞计数划分: 轻度影响:致密核表层细胞在20%以下。 中度影响:致密核表层细胞在20%60%。 高度影响:致密核表层细胞在60%以上。 正常育龄妇女月经前后多属轻度影响或略高,排卵期往往为中-高度影响。在功能性闭经时常无周期性变化,且常处于低落状态2 卵巢功能低落:用底层细胞计数划分: 轻度低落:底层细胞在20%以下。 中度低落:底层细
6、胞在20%40%之间。 高度低落:底层细胞在40%以下。 正常情况下,见于产后、哺乳期闭经、绝经后之卵巢功能衰退过程。 可见于双侧卵巢切除术后,盆腔放疗后或原发、继发卵巢功能低下。宫颈/阴道细胞学检查基本知识9宫颈/阴道细胞学检查基本知识二、感染、炎症及反应性改变 (略)10宫颈/阴道细胞学检查基本知识 三、修复与化生(一)组织的修复 1概述:组织的修复是一种再生过程,其目的是恢复组织受损部位的结构和功能。 2修复细胞的特征以核仁明显为特点,一般细胞片状排列并以单层为主,很少出现单个细胞的改变,胞核极向一致,可见到非病理性核分裂像。修复细胞核稍大,核仁也增大,但核形规则,染色质分布均匀而细致,
7、颗粒状,常伴有染色质集结。胞浆丰富。11宫颈/阴道细胞学检查基本知识(二)化生1概述:化生是指由一种类型的上皮转 化为另一种类型上皮的过程。阴道细胞学中提 到的化生是指宫颈的柱状上皮通过储备细胞增生转化为鳞状上皮的过程。2化生细胞的特点:(1)未成熟化生细胞;大小与底层细胞相似,但形状不一致,胞浆嗜硷性,有细小的空泡。胞浆边界清楚,核大而疏松。常可见到细胞突。(2)成熟型化生细胞:大小界于底层细胞和中层细胞之间。细胞边界清楚锐利。常常散在分布。未成熟化生 成熟化生12宫颈/阴道细胞学检查基本知识四、异常上皮细胞(一)鳞状上皮细胞异常 包括未明确诊断意义的不典型鳞状上皮细胞(ASCUS )、低度
8、鳞状上皮细胞内病变(LSIL )、高度鳞状上皮细胞内病变(HSIL )及鳞状上皮细胞癌(SC )。 13宫颈/阴道细胞学检查基本知识1未明确诊断意义的不典型鳞状上皮细胞(ASCUS)(1)细胞特点 1)细胞核增大,面积比正常中层细胞核大2.53倍。 2)核浆比轻度增加。3)核和细胞形状有些不一致。4)可见双核。5)核轻度深染,染色质分布均匀。6)核轮廓光滑,规则,少见不规则的核轮廓。7)角化不良细胞、不典型化生细胞、不典型修复细胞、与萎缩有关的不典型鳞状上皮细胞均包含在ASCUS内。(2)ASCUS的临床意义:与炎症有关;与刺激有关;与IUD有关;与抹片固定不好有关;可能与癌前病变有关。14宫
9、颈/阴道细胞学检查基本知识2低度鳞状上皮细胞内病变(LSIL)(1)概述:低度鳞状上皮细胞内病变(LSIL)对应的组织学改变是轻度不典型增生,CIN(cervicalintraepithelialneoplasm宫颈上皮细胞内瘤样病变)。HPV感染也包括在LSIL中(2)细胞特点:1)细胞单个或片状排列。2)胞浆成熟或表层型胞浆。3)细胞核增大于正常中层细胞核面积至少3倍。4)核大小及形状中度不一致。5)双核或多核常见。6)核深染,但染色质分布均匀。7)核仁少见,如出现也不明显。8)核膜清楚(可能轻度不规则)或边界完全不清。9)细胞边界清楚可见。15宫颈/阴道细胞学检查基本知识3高度鳞状上皮细
10、胞内病变(HSIL)(1)概述:高度鳞状上皮细胞内病变(HSIL)对应的组织学改变是中、重度不典型增生,CIN 、CIN 及原位癌。(2)细胞改变: 1)细胞常常单个或成片或象合胞体样排列。2)细胞核异常,其大多数鳞状上皮具有不成熟胞浆:花边状淡染或致密化生型胞浆,偶尔胞浆呈成熟状或致密角化型。3)核增大在LSIL范围内,但胞浆面积减少因而核浆比明显增大,核增大实际上可能比LSIL要小。4)细胞大小比LSIL小。5)核明显深染,染色质可能细颗粒状或块状,但分布均匀。6)核仁常不明显7)核轮廓可能不规则。 CIN 16宫颈/阴道细胞学检查基本知识4鳞状上皮细胞癌:一般可分为角化型、非角化型和小细
11、胞型。(1)角化型鳞癌:细胞多为散在或松散排列。1)癌细胞大小和形状相差悬殊,畸形怪状多见。2)胞浆常嗜橘红或嗜红。3)核形状和大小亦多样,深染。4)核染色质分布不均,块状,颗粒状或固缩状。5)核仁有时可出现,但比非角化型少的多。6)癌性背景可能见到。17宫颈/阴道细胞学检查基本知识(2)非角化型鳞癌 1)细胞散在或合胞体样排列。2)细胞大,多数核浆比失常。3)胞浆多蓝染。4)核明显增大,核形不规则,染色质增多,粗颗粒状并分布不均,出现块状。5)核仁明显也常见。6)涂片背景伴炎性细胞、坏死物、细胞碎片,陈旧性红细胞和颗粒状蛋白退变物,即癌性背景明显。18宫颈/阴道细胞学检查基本知识(3)小细胞
12、型鳞癌:1)细胞多松散成群或单个散在,涂片中常大量出现小细胞,多圆形或卵圆形,也见多形性。2)核大,核浆比重度失常。3)核染色质分布不均,核轮廓不规则。4)胞浆一般蓝染,多数胞浆少。5)部分细胞可见核仁。6)癌性背景明显。19宫颈/阴道细胞学检查基本知识(二)腺上皮细胞异常 1未明确诊断意义的不典型腺上皮细胞(AGUS atypicalglandularcells of undeterminedsignificance) (1)宫颈管细胞AGUS:细胞片状排列;核增大,比正常颈管核面积大35倍;核大小轻度不一致;核轻度深染;常可见核仁。 (2)子宫内膜细胞AGUS:310个细胞成群排列;细胞核
13、轻度增大;轻度深染;可见到小核仁;细胞边界不清;与宫颈内膜细胞比较 ,细胞胞浆缺乏,偶尔形成空泡。20宫颈/阴道细胞学检查基本知识2颈管柱状上皮细胞轻度不典型增生细胞特点:细胞多成群或排列成片状;核增大,为正常细胞核直径的12倍;核间距增宽,核大小差异明显,但形状与极向比较一致;核圆形或卵圆形,核膜清晰,核染色质增多,但分布均匀,核仁轻度增大;胞浆界限不清,很难找到典型正常蜂窝状外观。3颈管柱状上皮细胞重度不典型增生细胞特点:细胞多成群出现,可见单个散在细胞,一群细胞中排列疏密不一致;胞核增大,核直径为正常细胞核2倍以上;核大小不一致,核间距变窄,可见细胞拥挤重叠;核膜规则性增厚,染色质粗颗粒
14、状,但分布均匀,核仁明显增大。 21宫颈/阴道细胞学检查基本知识4腺癌细胞特点:多成群出现,细胞排列紊乱,边界不清;细胞和细胞核大小、形状不一致;核仁大小数目不一;可能见到特殊排列:如玫瑰花状、腺状、梅花状、球状、乳头状、致密的细胞球,不规则形等。有时胞浆中有囊状大空泡,核被推向一边,有时胞浆溶合成片。核呈圆形或卵圆形,胞浆染蓝灰色或染红色。核膜清楚,染色质增多,分布不匀。 腺癌细胞作玫瑰花样排列 22什么是巴氏细胞学检测技术传统的宫颈细胞学检测方法,取发明者姓名 巴巴尼克而命名取材方法:用木/竹质小脚板刮取宫颈脱落细 胞,涂在普通载玻片上送检,故称宫颈刮片染色方法:标本在95%酒精溶液中固定
15、后, 用巴氏染色法(由方法学命名)染色阅片方法:光学显微镜,人工阅片液基薄层检测技术23临床价值 20世纪80年代中后期,美国学者报道巴氏涂片假阴性率达到40%以上,引起了人们的震惊。今天,美国宫颈癌每年新发病人由原来的妇科癌症前两位降至第七位,死亡人数降至五千人左右,这个巨大的进步要归功于先进的液基薄层细胞学检测技术和TBS报告系统液基薄层检测技术24什么是LCT 、TCTLCT:Liquid-Based Cytology Test 液基细胞学检测技术TCT:Thin-Layer Cytology Test 薄层细胞学技术 LCT 、TCT是标本处理、制片技术液基薄层检测技术25液基薄层检测
16、技术技术创新标本采集标本处理报告方式26TBS报告系统何谓TBS报告系统1988年世界著名的病理学家在美国Bethasda (伯塞斯达)举行会议。大会作出重要决定,推出了新的细胞学病理诊断系统TBS报告系统TBS:The Bethasda Systemy27TBS报告系统TBS报告系统的优点更有利于病理医生和临床医生的交流具有更高的稳定性,可靠性国际化28TBS报告系统TBS报告系统更详尽对标本质量有评价( 满意/不满意)良性细胞报告详细,范围广癌前病变采用新的描述性术语有病理医生的建议及意见多数报告单附有真实的细胞图像,方便会诊29宫颈细胞学检查 (TBS分类) 涂片不满意 (-) 复查 (
17、+) ASC-US AGUS (-) 定期复查 复查 (-) (3-6月) LSIL HSIL 二年内 (+) 阴道镜检、 组织活检 或 颈管诊刮、HPV检测30如何选择检查对象发病诱因早年性生活多性伴侣环境性病流行感染HPV吸烟、过量饮酒31如何选择检查对象适应症所有一年内未做宫颈抹片检查者普通巴氏涂片二级及以上者接触性出血者宫颈轻、中、重度靡烂者性生活不规范者(多指性工作者)32如何选择检查对象改变您的观点宫颈细胞上皮内病变的出现常常较早,20多岁女性即可出现不少患者不表现明显症状,或仅有一般宫颈炎的症状如白带增多。妇科检查可见宫颈光滑,无明显炎症,或有宫颈充血或糜烂,糜烂程度不等,范围也
18、不同,触之有时易出血,与一般慢性宫颈炎无明显差别。有时可见白斑。因此其临床表现并无特异性。单凭其症状及体征是无法诊断的33如何选择检查对象改变您的观点注意年轻病人宫颈光滑者不可忽视有无症状不是选择病人的标准病人的经济状态不是选择的标准34标本采集病人于膀胱截石位,医生打开窥器,暴露宫颈将专用带长柄的取样刷伸入阴道,抵住宫口,尖端插入宫颈管内,用力适中,同一方向旋转(禁忌来回旋转) 五圈左右。若有过多血液及白带,取样前先用无菌干棉球轻轻拭去。取样时注意细胞量要足够,且应取到鳞柱交界处的细胞及宫颈管的柱状上皮细胞35标本采集打开装有细胞保存液的小瓶,将带有标本的取样刷头浸泡在瓶里。拧紧瓶盖,轻摇几
19、次。在小瓶上写清病人的姓名、年龄及取样日期。36标本采集注意事项取材应尽可能避开经期,取材前24小时不上药、不冲洗、不过性生活取样过程中宫颈出血明显时,应立即停止在一般情况下尽量避免短期内(小于三个月)重复取材,以免出现假阴性结果收集标本后,将扫帚状采样器推入保存液小瓶底,迫使刷毛全部散开来,共10次,然后在溶液中快速地转动扫帚状采样器,以进一步将细胞样本漂洗下来37常见细胞/病变图片正常细胞常见的病原体良性反应性细胞改变上皮内病变癌38正常鳞状细胞不同类型的鳞状细胞 A:表层细胞(箭头);B:中层细胞;C:副基底层细胞;D:化生细胞39正常宫颈管腺细胞 正常中表层鳞状细胞和一团颈管柱状细胞4
20、0成熟鳞状化生 移行区:一片化生细胞。在视野B有胞浆内包涵体,没有特殊含意41 细菌性阴道炎 阴道加德纳菌:细菌主要覆盖在鳞状细胞,产生线索细胞42霉菌病:白色念珠菌 念珠菌病:菌丝和孢子的细节。比较孢子与鳞状细胞核的大小43滴虫性阴道炎子宫颈阴道部炎症:背景污秽,滴虫感染(箭头:许多寄生虫中的一个)44放线菌 放线菌:典型的假丝状物聚集45疱疹 疱疹病毒感染:多核细胞,核结构模糊似毛玻璃46炎症和修复 修复细胞(染色质透亮和核仁)?不成熟或移细胞化生(一些核沟)47与宫内避孕器有关的改变 IUD:反应性宫内膜细胞48萎缩绝经期重度炎性萎缩性涂片:一群外底层鳞状细胞和散在的有核非典型(轻度增大
21、,染色质增多)和胞浆改变(嗜酸性、空泡、吞噬)的细胞49放疗反应 巴氏涂片来自一位经放疗的肛门癌患者:巨细胞和巨核,胞浆空泡和分叶核白细胞的吞噬作用。(物镜,20 x)50其他(40岁以后的宫颈涂片中出现宫内膜细胞) 回到目录 48岁妇女,出现宫内膜细胞。Bethesda建议:宫内膜活检51 淋巴滤泡性宫颈炎 淋巴滤泡性宫颈炎(53岁妇女):含有吞噬体的巨噬细胞和大淋巴样细胞52重要性未确定的非典型鳞细胞;似为反应性变化鳞状中层细胞,胞浆与核呈明显的红色环核收缩区,在胞质中呈现“良性光圈”核没有明显增大。一个细胞内可能有双核。背景中有细菌群一些鳞细胞上覆盖有生长旺盛的球菌,有少量分散的中性粒细胞似非典型良性炎症。有些医生将此归类为炎症反应重要性未确定的非典型鳞细胞;似为反应性变化中层鳞状上皮细表和少量表皮细胞细菌覆盖细胞,中部细胞,胞浆失去红色核稍大,有超染。核边界平滑,染色质分布均匀一些环核。在右上角有超嗜曙红细胞鳞细胞结合紧密,有伸长超染的核53非典型鳞状细胞,不能除外上皮内高度病变,或上皮内高度病
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