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1、第三章遗传与基因工程第三节 基因工程简介基因拼接技术或DNA重组技术DNA分子水平(直径2nm)剪切 拼接 导入 表达实质(原理)基因重组目的定向改造生物的遗传性状基因工程的别名操作水平基本过程生殖类型无性生殖(一)基因工程的概念在生物体外,通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”,对生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞内进行无性繁殖,使重组基因在受体细胞内表达,产生出人类所需要的基因产物。1、用什么工具从DNA分子上“剪切”下所需的基因?(二)基因操作的工具基因的剪刀限制性内切酶限制酶基因的剪刀限制性内切酶限制酶黏性末端基因的剪刀限制性内切酶的特点:限制酶黏性末端特异性基因的剪刀

2、限制性内切酶的特点:限制酶黏性末端特异性,即识别特定核苷酸序列,切割特定切点基因的剪刀限制性内切酶的特点:中轴线中轴线黏性末端平末端例:(05年天津)限制性内切酶的识别序列和切点是GGATCC,限制性内切酶的识别序列和切点是GATC。在质粒上有酶的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶的切点。请画出质粒被限制酶切割后所形成的黏性末端。例:(05年天津)限制性内切酶的识别序列和切点是GGATCC,限制性内切酶的识别序列和切点是GATC。在质粒上有酶的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶的切点。请画出质粒被限制酶切割后所形成的黏性末端。例:(05年天津)限制性内切酶的识别序列和切点是GGATCC,限

3、制性内切酶的识别序列和切点是GATC。在质粒上有酶的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶的切点。请画出质粒被限制酶切割后所形成的黏性末端。请画出目的基因两侧被限制酶切割后形成的黏性末端例:(05年天津)限制性内切酶的识别序列和切点是GGATCC,限制性内切酶的识别序列和切点是GATC。在质粒上有酶的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶的切点。请画出质粒被限制酶切割后所形成的黏性末端。请画出目的基因两侧被限制酶切割后形成的黏性末端例:(05年天津)限制性内切酶的识别序列和切点是GGATCC,限制性内切酶的识别序列和切点是GATC。在质粒上有酶的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶的切点。请画出质

4、粒被限制酶切割后所形成的黏性末端。在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来?为什么?请画出目的基因两侧被限制酶切割后形成的黏性末端D基因的剪刀限制性内切酶(简称限制酶)1、用什么工具从DNA分子上“剪切”下所需的基因?(二)基因操作的工具2、这种工具有什么特点?特异性,即识别特定核苷酸序列,切割特定切点。基因的剪刀限制性内切酶(简称限制酶)1、用什么工具从DNA分子上“剪切”下所需的基因?(二)基因操作的工具2、这种工具有什么特点?特异性,即识别特定核苷酸序列,切割特定切点。基因的剪刀限制性内切酶(简称限制酶)1、用什么工具从DNA分子上“剪切”下所需的基因?

5、(二)基因操作的工具3、限制酶主要存在什么生物中?它的存在有何意义?2、这种工具有什么特点?特异性,即识别特定核苷酸序列,切割特定切点。基因的剪刀限制性内切酶(简称限制酶)主要存在于微生物中;限制酶可切断外来的DNA分子,对微生物有保护作用。1、用什么工具从DNA分子上“剪切”下所需的基因?(二)基因操作的工具3、限制酶主要存在什么生物中?它的存在有何意义?2、这种工具有什么特点?4、如何让不同来源的两个DNA分子重新组合?4、如何让不同来源的两个DNA分子重新组合?4、如何让不同来源的两个DNA分子重新组合?4、如何让不同来源的两个DNA分子重新组合?基因的针线DNA连接酶基因的针线DNA连

6、接酶 DNA连接酶可将相同黏性末端之间的缝隙“缝合”起来,即把梯子两边扶手的断口连接起来,这样一个重组DNA分子就形成了基因的针线DNA连接酶 DNA连接酶可将相同黏性末端之间的缝隙“缝合”起来,即把梯子两边扶手的断口连接起来,这样一个重组DNA分子就形成了用同一种限制酶切割两个DNA,然后让两者的黏性末端结合起来。再用DNA连接酶将两DNA末端的缝隙“缝合”。4、如何让不同来源的两个DNA分子重新组合?5、如要获得某个特定性状的基因,必须要用限制酶切几个切口?可产生几个黏性末端?4、如何让不同来源的两个DNA分子重新组合?用同一种限制酶切割两个DNA,然后让两者的黏性末端结合起来。再用DNA

7、连接酶将两DNA末端的缝隙“缝合”。5、如要获得某个特定性状的基因,必须要用限制酶切几个切口?可产生几个黏性末端?4、如何让不同来源的两个DNA分子重新组合?两个切口,四个黏性末端。用同一种限制酶切割两个DNA,然后让两者的黏性末端结合起来。再用DNA连接酶将两DNA末端的缝隙“缝合”。6、用什么工具将外源基因导入受体细胞?为什么要用这种工具?(二)基因操作的工具6、用什么工具将外源基因导入受体细胞?为什么要用这种工具?运载体。(二)基因操作的工具6、用什么工具将外源基因导入受体细胞?为什么要用这种工具?运载体。外源基因难以进入受体细胞,即使进入了受体细胞,也可能被受体细胞内的酶分解。(二)基

8、因操作的工具6、用什么工具将外源基因导入受体细胞?为什么要用这种工具?运载体。外源基因难以进入受体细胞,即使进入了受体细胞,也可能被受体细胞内的酶分解。7、基因的运输工具运载体必须具备什么条件?(二)基因操作的工具6、用什么工具将外源基因导入受体细胞?为什么要用这种工具?运载体。外源基因难以进入受体细胞,即使进入了受体细胞,也可能被受体细胞内的酶分解。7、基因的运输工具运载体必须具备什么条件?常见的运载体有哪些?运载体与外源基因的结合要用到哪些酶?(二)基因操作的工具6、用什么工具将外源基因导入受体细胞?为什么要用这种工具?8、质粒的化学本质是什么?它存在于什么生物中?质粒有什么特点?运载体。

9、外源基因难以进入受体细胞,即使进入了受体细胞,也可能被受体细胞内的酶分解。7、基因的运输工具运载体必须具备什么条件?常见的运载体有哪些?运载体与外源基因的结合要用到哪些酶?(二)基因操作的工具6、用什么工具将外源基因导入受体细胞?为什么要用这种工具?8、质粒的化学本质是什么?它存在于什么生物中?质粒有什么特点?运载体。外源基因难以进入受体细胞,即使进入了受体细胞,也可能被受体细胞内的酶分解。7、基因的运输工具运载体必须具备什么条件?常见的运载体有哪些?运载体与外源基因的结合要用到哪些酶?环形DNA分子;存在于多种细菌和酵母菌中。(二)基因操作的工具大肠杆菌的质粒大肠杆菌的质粒大肠杆菌的质粒 最

10、常用的质粒是大肠杆菌的质粒,其中常含有抗药基因,如四环素的标记基因。质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性作用,但复制只能在宿主细胞内成。6、用什么工具将外源基因导入受体细胞?为什么要用这种工具?8、质粒的化学本质是什么?它存在于什么生物中?质粒有什么特点?答:运载体。外源基因难以进入受体细胞,即使进入了受体细胞,也可能被受体细胞内的酶分解。7、基因的运输工具运载体必须具备什么条件?常见的运载体有哪些?运载体与外源基因的结合要用到哪些酶?答:环形DNA分子;存在于多种细菌和酵母菌中。(二)基因操作的工具基因的剪刀限制性内切酶基因的针线DNA连接酶基因的运输工具运载体基因操作的基本工具(二)基因

11、操作的基本工具基因的剪刀限制性内切酶限制酶限制性内切酶的作用:限制酶限制性内切酶的作用:识别特异的碱基序列,并从特定的切点对DNA进行切割。基因的针线DNA连接酶 DNA连接酶的作用:基因的针线DNA连接酶 DNA连接酶的作用:将相同黏性末端之间的缝隙“缝合”起来,即把梯子两边扶手的断口连接起来,从而形成重组DNA分子。基因的剪刀限制性内切酶基因的针线DNA连接酶基因的运输工具运载体(二)基因操作的基本工具如何运用这些工具进行基因操作呢?如何运用这些工具进行基因操作呢?(三)基因操作的基本步骤步骤一:提取目的基因步骤一:提取目的基因鸟枪法反转录法根据已知氨基酸序列合成鸟枪法的过程供体细胞中DN

12、A鸟枪法的过程供体细胞中DNA鸟枪法的过程限制酶供体细胞中DNA许多DNA片段鸟枪法的过程限制酶用限制酶切成许多片段供体细胞中DNA许多DNA片段鸟枪法的过程限制酶用限制酶切成许多片段供体细胞中DNA许多DNA片段鸟枪法的过程限制酶载入用限制酶切成许多片段供体细胞中DNA许多DNA片段运载体鸟枪法的过程限制酶载入用限制酶切成许多片段供体细胞中DNA许多DNA片段运载体鸟枪法的过程限制酶载入导入用限制酶切成许多片段供体细胞中DNA许多DNA片段运载体受体细胞鸟枪法的过程限制酶载入导入用限制酶切成许多片段供体细胞中DNA许多DNA片段运载体受体细胞鸟枪法的过程限制酶载入扩增导入用限制酶切成许多片段

13、供体细胞中DNA许多DNA片段运载体受体细胞特定性状鸟枪法的过程限制酶载入扩增导入用限制酶切成许多片段供体细胞中DNA许多DNA片段运载体受体细胞特定性状鸟枪法的过程限制酶载入扩增分离导入用限制酶切成许多片段供体细胞中DNA许多DNA片段运载体受体细胞特定性状鸟枪法的过程限制酶载入扩增分离导入目的基因供体细胞中DNA许多DNA片段运载体受体细胞特定性状限制酶载入扩增分离导入目的基因鸟枪法的过程1.“鸟枪法”中,是切割供体细胞中所有的DNA分子吗?为什么?供体细胞中DNA许多DNA片段运载体受体细胞特定性状限制酶载入扩增分离导入目的基因鸟枪法的过程1.“鸟枪法”中,是切割供体细胞中所有的DNA分

14、子吗?为什么?供体细胞中DNA许多DNA片段运载体受体细胞特定性状限制酶载入扩增分离导入目的基因鸟枪法的过程1.“鸟枪法”中,是切割供体细胞中所有的DNA分子吗?为什么?2.第和步骤中,是将得到的所有 DNA片段分别转入不同的受体细胞吗?为什么?供体细胞中DNA许多DNA片段运载体受体细胞特定性状限制酶载入扩增分离导入目的基因鸟枪法的过程1.“鸟枪法”中,是切割供体细胞中所有的DNA分子吗?为什么?2.第和步骤中,是将得到的所有 DNA片段分别转入不同的受体细胞吗?为什么?供体细胞中DNA许多DNA片段运载体受体细胞特定性状限制酶载入扩增分离导入目的基因鸟枪法的过程最常用的方法:鸟枪法(散弹射

15、击法)供体细胞中的DNA许多DNA片段运载体限制酶载入受体细胞产生特定性状导入外源DNA扩增目的基因分离1.“鸟枪法”中,是切割供体细胞中所有的DNA分子吗?为什么?2.第和步骤中,是将得到的所有 DNA片段分别转入不同的受体细胞吗?为什么?3.运载体要用什么酶处理?供体细胞中DNA许多DNA片段运载体受体细胞特定性状限制酶载入扩增分离导入目的基因鸟枪法的过程1.“鸟枪法”中,是切割供体细胞中所有的DNA分子吗?为什么?2.第和步骤中,是将得到的所有 DNA片段分别转入不同的受体细胞吗?为什么?3.运载体要用什么酶处理?与为同一种限制酶。供体细胞中DNA许多DNA片段运载体受体细胞特定性状限制

16、酶载入扩增分离导入目的基因鸟枪法的过程1.“鸟枪法”中,是切割供体细胞中所有的DNA分子吗?为什么?2.第和步骤中,是将得到的所有 DNA片段分别转入不同的受体细胞吗?为什么?3.运载体要用什么酶处理?与为同一种限制酶。4.鸟枪法有哪些优点?有哪些缺点?供体细胞中DNA许多DNA片段运载体受体细胞特定性状限制酶载入扩增分离导入目的基因鸟枪法的过程1.“鸟枪法”中,是切割供体细胞中所有的DNA分子吗?为什么?2.第和步骤中,是将得到的所有 DNA片段分别转入不同的受体细胞吗?为什么?3.运载体要用什么酶处理?与为同一种限制酶。4.鸟枪法有哪些优点?有哪些缺点?操作简便;工作量大,具有一定的盲目性

17、。供体细胞中DNA许多DNA片段运载体受体细胞特定性状限制酶载入扩增分离导入目的基因鸟枪法的过程1.“鸟枪法”中,是切割供体细胞中所有的DNA分子吗?为什么?2.第和步骤中,是将得到的所有 DNA片段分别转入不同的受体细胞吗?为什么?3.运载体要用什么酶处理?与为同一种限制酶。4.鸟枪法有哪些优点?有哪些缺点?操作简便;工作量大,具有一定的盲目性。5.此方法主要用于何种生物体基因的获取? 供体细胞中DNA许多DNA片段运载体受体细胞特定性状限制酶载入扩增分离导入目的基因鸟枪法的过程1.“鸟枪法”中,是切割供体细胞中所有的DNA分子吗?为什么?2.第和步骤中,是将得到的所有 DNA片段分别转入不

18、同的受体细胞吗?为什么?3.运载体要用什么酶处理?与为同一种限制酶。4.鸟枪法有哪些优点?有哪些缺点?操作简便;工作量大,具有一定的盲目性。5.此方法主要用于何种生物体基因的获取? 原核生物。供体细胞中DNA许多DNA片段运载体受体细胞特定性状限制酶载入扩增分离导入目的基因鸟枪法的过程供体细胞中DNA许多DNA片段运载体受体细胞特定性状目的基因限制酶载入导入扩增分离步骤一:提取目的基因鸟枪法反转录法根据已知氨基酸序列合成反转录法的过程目的基因的mRNA反转录法的过程目的基因的mRNA反转录法的过程目的基因的mRNA单链DNA反转录法的过程目的基因的mRNA单链DNA反转录法的过程合成目的基因的

19、mRNA单链DNA反转录法的过程合成双链DNA (目的基因)目的基因的mRNA单链DNA反转录法的过程合成双链DNA (目的基因)目的基因的mRNA单链DNA双链DNA (目的基因)反转录法的过程合成1. 是什么过程?要用到什么酶?目的基因的mRNA单链DNA反转录法的过程合成1. 是什么过程?要用到什么酶?反转录反转录;反转录酶双链DNA (目的基因)目的基因的mRNA单链DNA反转录法的过程合成1. 是什么过程?要用到什么酶?反转录反转录;反转录酶2. 这种方法合成的目的基因与原始基因是一样的吗?双链DNA (目的基因)目的基因的mRNA单链DNA反转录法的过程合成1. 是什么过程?要用到

20、什么酶?反转录反转录;反转录酶2. 这种方法合成的目的基因与原始基因是一样的吗?双链DNA (目的基因)不一样,合成的目的基因只含有原始基因的外显子(或者原核生物基因的编码区)。目的基因的mRNA单链DNA反转录法的过程合成1. 是什么过程?要用到什么酶?反转录反转录;反转录酶2. 这种方法合成的目的基因与原始基因是一样的吗?不一样,合成的目的基因只含有原始基因的外显子(或者原核生物基因的编码区)。3. 这种方法获得的目的基因控制合成的蛋白质与原始基因控制合成的蛋白质一样吗?双链DNA (目的基因)目的基因的mRNA单链DNA反转录法的过程合成1. 是什么过程?要用到什么酶?反转录反转录;反转

21、录酶2. 这种方法合成的目的基因与原始基因是一样的吗?3. 这种方法获得的目的基因控制合成的蛋白质与原始基因控制合成的蛋白质一样吗?一样。双链DNA (目的基因)不一样,合成的目的基因只含有原始基因的外显子(或者原核生物基因的编码区)。供体细胞中DNA许多DNA片段运载体受体细胞特定性状目的基因限制酶载入导入扩增分离目的基因的mRNA单链DNA双链DNA(目的基因)反转录合成步骤一:提取目的基因鸟枪法反转录法根据已知氨基酸序列合成根据已知氨基酸序列合成 根据已知氨基酸序列合成 蛋白质的氨基酸序列根据已知氨基酸序列合成 蛋白质的氨基酸序列推测根据已知氨基酸序列合成 蛋白质的氨基酸序列mRNA的核

22、苷酸序列推测根据已知氨基酸序列合成 蛋白质的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列推测推测根据已知氨基酸序列合成 蛋白质的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列结构基因的核苷酸序列推测推测根据已知氨基酸序列合成 蛋白质的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列结构基因的核苷酸序列推测推测化学合成根据已知氨基酸序列合成 蛋白质的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列结构基因的核苷酸序列推测推测目的基因化学合成DNA根据已知氨基酸序列合成 蛋白质的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列结构基因的核苷酸序列推测推测目的基因化学合成这种方法合成的目的基因的核苷酸 序列是唯一的吗?为什么?根据已知氨基酸序列合成 蛋白质的氨基酸序列mRNA的核苷

23、酸序列结构基因的核苷酸序列推测推测目的基因化学合成DNA根据已知氨基酸序列合成 蛋白质的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列结构基因的核苷酸序列推测推测目的基因化学合成这种方法合成的目的基因的核苷酸 序列是唯一的吗?为什么?不是,有可能有多种序列,因为一种氨基酸可能对应多种密码子。根据已知氨基酸序列合成 蛋白质的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列结构基因的核苷酸序列推测推测目的基因化学合成这种方法合成的目的基因的核苷酸 序列是唯一的吗?为什么?不是,有可能有多种序列,因为一种氨基酸可能对应多种密码子。2. 这种方法获得的目的基因控制合成的蛋白质与原始基因一样吗?根据已知氨基酸序列合成 蛋白质的氨基酸序列

24、mRNA的核苷酸序列结构基因的核苷酸序列推测推测目的基因化学合成DNA根据已知氨基酸序列合成 蛋白质的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列结构基因的核苷酸序列推测推测目的基因化学合成这种方法合成的目的基因的核苷酸 序列是唯一的吗?为什么?不是,有可能有多种序列,因为一种氨基酸可能对应多种密码子。2. 这种方法获得的目的基因控制合成的蛋白质与原始基因一样吗?一样。供体细胞中DNA许多DNA片段运载体受体细胞特定性状目的基因限制酶载入导入扩增分离目的基因的mRNA单链DNA双链DNA(目的基因)反转录合成步骤一:提取目的基因鸟枪法反转录法根据已知氨基酸序列合成供体细胞中DNA许多DNA片段运载体受体细胞

25、特定性状目的基因限制酶载入导入扩增分离目的基因的mRNA单链DNA双链DNA(目的基因)反转录合成蛋白质氨基酸序列mRNA的碱基序列基因的碱基序列目的基因推测推测化学合成步骤一:提取目的基因鸟枪法反转录法根据已知氨基酸序列合成质粒DNA分子质粒DNA分子质粒DNA分子一个切口两个黏性末端质粒DNA分子一个切口两个黏性末端两个切口获得目的基因质粒DNA分子一个切口两个黏性末端两个切口获得目的基因质粒DNA分子一个切口两个黏性末端两个切口获得目的基因重组DNA分子(重组质粒)质粒DNA分子一个切口两个黏性末端两个切口获得目的基因重组DNA分子(重组质粒)图中、过程分别需要什么条件?质粒DNA分子一

26、个切口两个黏性末端两个切口获得目的基因重组DNA分子(重组质粒)图中、过程分别需要什么条件?:同一种限制性内切酶:DNA连接酶步骤二:目的基因与运载体结合DNA连接酶质粒DNA分子同一种限制酶处理一个切口两个黏性末端两个切口获得目的基因重组DNA分子(重组质粒)供体细胞中DNA许多DNA片段运载体受体细胞特定性状目的基因限制酶载入导入扩增分离步骤一:提取目的基因鸟枪法供体细胞中DNA许多DNA片段运载体受体细胞特定性状目的基因限制酶载入导入扩增分离目的基因的mRNA单链DNA双链DNA(目的基因)反转录合成步骤一:提取目的基因鸟枪法反转录法供体细胞中DNA许多DNA片段运载体受体细胞特定性状目

27、的基因限制酶载入导入扩增分离目的基因的mRNA单链DNA双链DNA(目的基因)反转录合成蛋白质氨基酸序列mRNA的碱基序列基因的碱基序列目的基因推测推测化学合成步骤一:提取目的基因鸟枪法反转录法根据已知氨基酸序列合成法质粒DNA分子质粒DNA分子一个切口两个黏性末端质粒DNA分子一个切口两个黏性末端两个切口获得目的基因质粒DNA分子一个切口两个黏性末端两个切口获得目的基因质粒DNA分子一个切口两个黏性末端两个切口获得目的基因重组DNA分子(重组质粒)质粒DNA分子一个切口两个黏性末端两个切口获得目的基因重组DNA分子(重组质粒)图中、过程分别需要什么条件?质粒DNA分子一个切口两个黏性末端两个

28、切口获得目的基因重组DNA分子(重组质粒)图中、过程分别需要什么条件?:同一种限制性内切酶:DNA连接酶步骤三:将目的基因导入受体细胞导入方法:步骤三:将目的基因导入受体细胞导入方法:导入过程:借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径步骤三:将目的基因导入受体细胞导入方法:导入过程:借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径(质粒为运载体,细菌为受体细胞)步骤三:将目的基因导入受体细胞导入方法:导入过程:借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径(质粒为运载体,细菌为受体细胞)受体细胞:细菌步骤三:将目的基因导入受体细胞导入方法:导入过程:借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径(质粒为运载体,细菌为受体细胞)受体细胞:细菌氯化钙步骤三:将目的

29、基因导入受体细胞导入方法:导入过程:借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径(质粒为运载体,细菌为受体细胞)受体细胞:细菌细胞壁的通透性增大氯化钙步骤三:将目的基因导入受体细胞导入方法:导入过程:借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径(质粒为运载体,细菌为受体细胞)受体细胞:细菌细胞壁的通透性增大重组质粒进入受体细胞氯化钙步骤三:将目的基因导入受体细胞导入方法:导入过程:借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径(质粒为运载体,细菌为受体细胞)受体细胞:细菌细胞壁的通透性增大重组质粒进入受体细胞目的基因随受体细胞的繁殖而复制氯化钙步骤三:将目的基因导入受体细胞重组DNA导入受体细胞的方法以质粒为运载体重组DNA导入受体细胞的方法

30、以质粒为运载体以去外壳的噬菌体DNA为运载体重组DNA导入受体细胞的方法以质粒为运载体以去外壳的噬菌体DNA为运载体显微注射法:将重组DNA直接注入受体细胞步骤四:目的基因的检测和表达步骤四:目的基因的检测和表达1. 为什么要检测? (2) 动植物细胞 除去内含子 (2) 动植物细胞 除去内含子步骤四:目的基因的检测和表达2. 怎样检测?1. 为什么要检测?步骤四:目的基因的检测和表达2. 怎样检测?1. 为什么要检测?3. 通过检测后,发现受体细胞中含有目的基因, 基因操作就完成了吗?步骤四:目的基因的检测和表达2. 怎样检测?1. 为什么要检测?3. 通过检测后,发现受体细胞中含有目的基因

31、, 基因操作就完成了吗?不,还要检测目的基因是否能表达出特定的性状。步骤一:提取目的基因基因操作的基本步骤步骤二:目的基因与运载体结合 步骤一:提取目的基因基因操作的基本步骤步骤二:目的基因与运载体结合 步骤三:将目的基因导入受体细胞步骤一:提取目的基因基因操作的基本步骤步骤四:目的基因的检测和表达步骤二:目的基因与运载体结合 步骤三:将目的基因导入受体细胞步骤一:提取目的基因基因操作的基本步骤主讲教师:甘伟丰第三章遗传与基因工程基因工程的成果和发展前景第三节(一)基因工程与医药卫生(一)基因工程与医药卫生1.生产基因工程药品:(一)基因工程与医药卫生1.生产基因工程药品:(一)基因工程与医药

32、卫生1.生产基因工程药品:重组人生长激素重组人白细胞介素 重组人干扰素 重组人胰岛素通过基因工程如何获取大量的干扰素呢?通过基因工程如何获取大量的干扰素呢?(1)根据干扰素的氨基酸序列合成目的基因;(2)将目的基因与运载体(如质粒)结合;(3)将目的基因(或重组DNA)导入细菌,让细菌繁殖;(4)目的基因的检测与表达(产生大量的干扰素)2、用于基因诊断与基因治疗:2、用于基因诊断与基因治疗:(1)基因诊断2、用于基因诊断与基因治疗:(1)基因诊断利用原理:DNA分子杂交DNA分子杂交1、DNA分子的变性和复性:DNA分子杂交1、DNA分子的变性和复性:DNA分子杂交2、DNA分子探针:1、DN

33、A分子的变性和复性:DNA分子杂交2、DNA分子探针:1、DNA分子的变性和复性:3、如何运用DNA分子为“探针”检测乙肝病毒呢?3、如何运用DNA分子为“探针”检测乙肝病毒呢?(1)做法:3、如何运用DNA分子为“探针”检测乙肝病毒呢?(1)做法:变性变性探针样品14N14N15N15N(1)做法:变性变性探针样品14N14N15N15N(2)检测标准:3、如何运用DNA分子为“探针”检测乙肝病毒呢?(1)做法:变性变性探针样品14N14N15N15N(2)检测标准:3、如何运用DNA分子为“探针”检测乙肝病毒呢?4、利用DNA分子杂交的原理,我们还可以干什么?DNA分子杂交4、利用DNA分

34、子杂交的原理,我们还可以干什么?DNA分子杂交2、用于基因诊断与基因治疗:(1)基因诊断利用原理:DNA分子杂交利用工具:DNA分子探针(DNA分子被32P 或荧光分子标记)2、用于基因诊断与基因治疗:(1)基因诊断利用原理:DNA分子杂交利用工具:DNA分子探针(DNA分子被32P 或荧光分子标记)成功实例:快速检测乙肝病毒-珠蛋白的DNA探针检测镰刀型细胞贫血症-珠蛋白的DNA探针检测镰刀型细胞贫血症-珠蛋白的DNA探针检测镰刀型细胞贫血症-珠蛋白的DNA探针检测镰刀型细胞贫血症-珠蛋白的DNA探针检测镰刀型细胞贫血症-珠蛋白的DNA探针检测镰刀型细胞贫血症阴性阳性2、用于基因诊断与基因治

35、疗:(1)基因诊断利用原理:DNA分子杂交利用工具:DNA分子探针(DNA分子被32P 或荧光分子标记)成功实例:快速检测乙肝病毒(2)基因治疗2、用于基因诊断与基因治疗:(1)基因诊断利用原理:DNA分子杂交利用工具:DNA分子探针(DNA分子被32P 或荧光分子标记)成功实例:快速检测乙肝病毒做法:把健康的外源基因导入有基因缺陷的 细胞中。(2)基因治疗2、用于基因诊断与基因治疗:(1)基因诊断利用原理:DNA分子杂交利用工具:DNA分子探针(DNA分子被32P 或荧光分子标记)成功实例:快速检测乙肝病毒做法:把健康的外源基因导入有基因缺陷的 细胞中。(2)基因治疗实例:治疗半乳糖血症半乳

36、糖血症半乳糖血症乳糖(C12H22O11) 葡萄糖 (C6H12O6) + 半乳糖 (C6H12O6) 半乳糖血症半乳糖 (C6H12O6) 葡萄糖 (C6H12O6) 乳糖(C12H22O11) 葡萄糖 (C6H12O6) + 半乳糖 (C6H12O6) 半乳糖血症 葡萄糖 (C6H12O6) CO2 + H2O + 能量 半乳糖 (C6H12O6) 葡萄糖 (C6H12O6) 乳糖(C12H22O11) 葡萄糖 (C6H12O6) + 半乳糖 (C6H12O6) 1、半乳糖血症病因是缺少什么酶?不能完成哪反应?1、半乳糖血症病因是缺少什么酶?不能完成哪反应?缺少半乳糖苷转移酶,不能正常完成反应。1、半乳糖血症病因是缺少什么酶?不能完成哪反应?2、现代科学是如何治疗半乳糖血症的?缺少半乳糖苷转移酶,不能正常完成反应。1、半乳糖血症病因是缺少什么酶?不能完成哪反应?2、现代科学是如何治疗半乳糖血症的?缺少半乳糖苷转移酶,不能正常完成反应。 用带有半乳糖苷酶基因的噬菌体侵染患者离体的组织细胞。1、半乳糖血症病因是缺少什么酶?不能完成哪反应?2、现代科学是如何治疗半乳糖血症的?3、这种病有什么危害?缺少半乳糖苷转移酶,不能正常完成反应。 用带有半乳糖苷酶基因的噬菌体侵染患者离体的组织细胞。1、半乳糖血症病因是缺少什么酶?不能完成哪反应?2

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