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文档简介
1、动物生物安全试验室及其试验活动技术原理、设置要求和安全管理 动物生物安全实验室第1页一、试验动物及试验动物设施介绍二、动物试验室产生生物危害起源 三、动物生物安全试验室设施与防护要求 (一)试验动物设施普通生物安全管理要 求 (二)动物试验过程(活动)行为规范 四、各级动物生物安全防护试验室技术原 理、设置要求和安全管理 五、无脊椎动物使用安全标准 六、相关法律、法规和部门规范动物生物安全实验室第2页一、试验动物及试验动物设施介绍:以科学研究为目标而进行科学喂养、繁殖动物称之为试验动物。有些人称之为“活试剂”。它包含严格意义上试验动物即在一定环境条件控制下,经过科学育种、繁殖生产,遗传背景清楚
2、,携带微生物情况明确,并对其生态学、生物学、生物化学、形态结构了解特殊动物如大鼠、小鼠、金黄地鼠、豚鼠、家兔、犬和小型猪等。也包含一部分家畜、家禽和一些未经过人工驯化野生动物,如猫、羊、非人灵长类、鸡、鸭、鸽、蛇、蛙类等等。动物生物安全实验室第3页试验动物设施是进行试验动物喂养、保种维持、生产、试验研究、试验等设施总称。医疗卫生机构试验动物设施普通包含更衣室、淋浴室、洗涤消毒室、监控室、洁净区外库房、样品室、样品配置、手术室、行为试验室、动物尸体及废物存放室、洁净区内库房、动物检疫室、大、小鼠喂养室、家兔喂养室、豚鼠喂养室等等。 动物生物安全实验室第4页(一)试验动物设施1、屏障系统试验动物环
3、境设施基本要求2、试验动物设施分类动物生物安全实验室第5页 1、屏障系统试验动物环境设施基本要求最适宜温度:20-25,温差:3或4适宜相对湿度:40-70%换气次数:10-20次/小时,洁净程度越高,要求换气次数越多。气流速度:0.1-0.2m/s。压强梯度:洁净区高于污染区,每级压差20-50Pa。合理组织气流和风速可调整室内温度和湿度,又可降低室内粉尘和有害气体污染,控制传染病流行。光照:工作照度150-300lx,动物照度18-30 lx,明暗交替时间12/12或10/14。噪声:60lb以下,防止高频率噪声和超声波干扰。氨浓度:小于14/m3。动物环境设施指标应符合GB14925-要
4、求:见下表1、2 动物生物安全实验室第6页表1 试验动物繁育、生产设施环境指标(静态)项目指标小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠犬、猴、猫、小型猪鸡普通环境屏障环境隔离环境普通环境屏障环境隔离环境屏障环境温度,18292026162820261628日温差, -4-44相对湿度,%4070换气次数,次/h8101020120502810102012050210202气流速度,m/s0.10.2压强梯度,Pa-20502100150-2050210015020502空气洁净度,级-10000100-1000010010000落下菌数,个/皿 303无检出303无检出3氨浓度,mg/m314噪声,dB 60工
5、作照度150300动物照度1520100200510昼夜明暗交替时间,h12/12或10/14注:表中氨浓度指标为动态指标。普通采取全新风,确保动物室有足够新鲜空气。假如先期去除了粉尘颗粒物和有毒有害气体,不排除使用循环空气可能,但再循环空气仅限于同一单元,新鲜空气不得少于50%。并确保供风温、湿度参数。单走廊设施必须确保饲育室、试验室压强最高。动物生物安全实验室第7页表2 动物试验设施(设备3)环境指标(静态) 项目指标小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠犬、猴、猫、小型猪鸡普通环境屏障环境隔离环境普通环境屏障环境隔离环境屏障环境温度,19262025162618221626日温差, 43433相对湿度,
6、%4070换气次数,次/h8101020120502810102012050210202气流速度,m/s0.10.2压强梯度,Pa-20502100150-205021001501001502空气洁净度,级-10000100-10000100100落下菌数,个/皿 303无检出303无检出无检出氨浓度,mg/m314噪声,dB 60工作照度150300动物照度1520100200510昼夜明暗交替时间,h12/12或10/14注:表中氨浓度指标为动态指标。普通采取全新风,确保动物房有足够新鲜空气。假如先期去除了粉尘颗粒物和有毒有害气体,不排除使用循环空气可能,但再循环空气应取自于无污染区域或同
7、一单元,新鲜空气不得少于50%。并确保供风温、湿度参数。单走廊设施必须确保饲育室、试验室压强最高。此处动物试验设备系指动物喂养和试验时,保障动物所处局部环境应抵达本环境指标设备。动物生物安全实验室第8页2、试验动物设施分类试验动物设施依据对喂养动物空气净化程度分为三类。开放系统(open system);屏障系统(barrier system);隔离系统(isolation system)。动物生物安全实验室第9页不一样试验动物设施环境级别对应于不一样动物级别,二者对应关系见下表动物级别和洁净度对应关系 动物级别环境级别(洁净度,落下菌)普通动物开放系统(,30个/皿)SPF动物屏障系统(万级
8、,3个/皿)无菌动物或悉生动物隔离系统(百级,0个/皿)动物生物安全实验室第10页(二)试验动物级别一级动物(普通动物)不携带主要人畜共患病和动物烈性传染病病原。二级动物(清洁动物,国际上无此等级)除不能携带主要人畜共患病和动物烈性传染病病原外,不能携带对动物危害大和对科研干扰大病原。三级动物(SPF级,无特定病原体动物)除一、二级动物应排除病原外,不携带主要潜在感染或条件致病和对科研干扰大病原。四级动物(无菌动物)不携带可检出一切病原体。悉生动物则是在无菌动物物体内移入一个或几个已知微生物后动物。 动物生物安全实验室第11页二、动物试验室产生生物危害起源:动物生物安全试验室是一个特殊经过人工
9、或自然感染进行动物感染试验试验室。 第一、动物性气溶胶(Animal Aerosol)产生:感染动物在观察喂养期间,它们在呼吸、排泄、抓咬、挣扎、逃逸、跳跃时,在更换垫料、饲料,进行感染接种(尤其是鼻腔内接种)时,在尸体剖检、病理组织、排泄物处理等过程中会大量产生传输危害性极大动物性气溶胶。所以对气溶胶生物安全防护,应该是动物试验室建设中关键。动物生物安全实验室第12页第二、试验动物,尤其是试验用动物(Experjmental animals)本身可能患有能感染人人畜共患病(zoonotic Disease)。病比如下:动物生物安全实验室第13页动物试验室出现这两大危害有力说明:动物试验室不论
10、在操作技术规范制订,个人安全防护设备设置,以及试验室设施设计和建设上,都有很大特点和特殊要求。第一个危害要用试验室设施(二级隔离)来防范,经过静态隔离(负压梯度)动态隔离和排风处理(HEPA过滤)等办法,把产生动物性气溶胶牢牢地控制在污染区内,确保不向外环境扩散。第二种危害,则要用安全防护设备(一级隔离)和其它个人防护设备(personnel protective Equipment PPES)来预防病原微生物对试验人员感染。 动物生物安全实验室第14页三、动物生物安全试验室设施与防护要求:生物安全动物试验室设计标准就是要做到三保护:保护人、保护环境和保护试验动物。保护人员免受相关危害。如感染
11、、过敏、中毒或被动物抓挠撕咬等; 保护动物即确保试验动物质量和确保人道主义使用试验动物;保护环境即确保室内空气、污水及废弃物(垫料、粪便、动物组织、动物尸体)等不污染室外环境。为到达三保护标准,生物安全动物试验室主要经过设施(Facilities)、设备(Equipment)、 人员及素质(Practices)有效结合加以实现。 动物生物安全实验室第15页(一)试验动物设施普通生物安全管理要求:防护设施(secondary barrier,二级屏障):试验室设施结构和通风设计组成二级物理防护。二级防护能力取决于试验室分区和室内气压,要依据试验室安全要求进行设计。普通把试验室分为洁净、半污染和污
12、染三个区。试验室墙壁保持密闭,空调通风气流方向永远保持:外界HEPA洁净区半污染区污染区HEPA外界。 动物生物安全实验室第16页防护设备(primary barrier,一级屏障 ):包含各级生物安全柜和个人防护器材。 人员及素质:良好专业训练和技术能力对确保试验室生物安全含有主要作用 。动物生物安全实验室第17页动物房和生物安全试验室一样,主要依据所研究病源微生物危害评定结果和危害程度分类划分为一级、二级、三级和四级动物安全水平。在生物因子方面,包含常规传输路径、所用体积和浓度、接种路径和是否能以何种方式排毒及生物因子总体危险程度。在动物方面,包含动物性质,比如它们侵犯性和咬、抓倾向,它们
13、天然体外寄生虫,易感动物病及可能释放过敏原和动物接种病原微生物后可能产生结果等等。 动物生物安全实验室第18页动物生物安全实验室第19页 因为试验动物常采取群体喂养,极易造成动物疾病暴发和流行。造成动物传染病流行病原各种多样,有病原宿主广泛,属人畜共患病,可同时引发人和动物疾病,就更具危险性。严格试验动物房管理制度,预防在先,是杜绝人和动物间疾病传输根本确保。 包含:1、保障试验动物房生物安全基本办法2、试验动物检疫和疾病控制及处理3、试验动物房消毒办法动物生物安全实验室第20页1、保障试验动物房生物安全基本办法 (1) 试验动物设施为单独区域,与办公和其它试验场所分开。 (2)工作人员应经过
14、适当培训。(3)含有一定规模试验动物室建筑,周围最少应有20m卫生间隔区。不一样种属、不一样品系、不一样起源动物必须分室喂养,不一样对象、不一样内容试验分室进行。各室之间定向气流不能交叉循环。 (4)定时检测,更换高、中、低效滤膜,保持系统处于良好状态。 动物生物安全实验室第21页(5)选取具备有效动物繁育合格证书动物, (6)动物、工作人员、物品分别进入屏障及隔离系统,并只能由洁净度高区域向洁净度低区域定向移动。房间随时关门。 工作人员更换工作服,戴帽、手套、口罩、鞋套,风淋后方可进入。 动物由动物传递窗,外包装经紫外线照射或喷洒消毒液后传入,入室后检疫3-7天。 全部样品、饲料(r辐射灭菌
15、)由物品传递窗经紫外线照射或喷洒消毒液后传入。 非试验用具(如食物、饮水、香烟等)一律不得带入动物试验室。 动物生物安全实验室第22页(7)器具、饮水瓶、垫料等须经高压灭菌后方可使用。动物饮用、屏障系统内使用灭菌水。(8)每七天更换笼具、饮用水两次。用过器具及时清洗并高压消毒。试验结束后及时清洗并消毒。 (9)按操作规程抓持、固定动物,试验操作。 (10)设置安全出口、出口指示、灭火器械。配置应急洗眼器。 (11)废弃物由污物走廊传出。专门放在指定位置统一处理动物生物安全实验室第23页2、试验动物检疫和疾病控制及处理 (1)凡外来试验动物最少经过3天以上隔离检疫。(2)试验和研究开始前,要确保
16、动物无任何疾病,并确保动物防止可影响研究目标及实施原因。 (3)动物发生疾病死亡应及时进行病理尸检或其它试验室检验,作出诊疗,提出处理意见。当动物发生传染病时,标准上全部销毁。房屋、用具、笼架、垫料、衣帽等必须进行彻底消毒。动物室封锁一段时间才能使用。必要时汇报试验责任人及主管部门。 动物生物安全实验室第24页(4)试验动物发生烈性传染病流行时,应马上上报试验动物检定机构,同时采取严格隔离消毒办法,以免传染病蔓延。 (5)尸体处理:尸体处理普通要求焚烧,深埋,大型动物可消毒加工后利用。动物生物安全实验室第25页3、试验动物房消毒办法SPF级动物试验室普通日常清洁消毒制度可结合各试验室不一样硬件
17、,但都应满足动物级别和洁净度基本要求。动物生物安全实验室第26页(二)动物试验过程(活动)行为规范: 1、试验动物喂养和使用应恪守国家相关法律和法规。2、应明确使用试验动物理由和目标。使用试验动物最终目标实应提升人类和动物健康、加速科学发展、促进社会进步。3、明确试验所使用动物种类和数量,动物数量应满足统计学要求。动物生物安全实验室第27页(二)动物试验过程(活动)行为规范: 4、完善标准操作规程,防止或减轻因试验对动物造成不适和痛苦。包含使用适当镇静、镇痛或麻醉方法;禁止在非麻醉状态下进行手术。 5、严格按标准操作程序实施试验后动物处理,包含麻醉、试验后护理或用麻醉方法处死。6、试验过程中要
18、求确保试验动物良好生活条件,包含喂养环境、符合需求饲料及细心护理等。确保其生活习性,确保其健康和舒适。7、研究人员和试验动物操作人员应接收试验动物基本知识和操作技能等方面培训。8、使用过程中要求确保周围环境和试验人员安全。 动物生物安全实验室第28页1、试验动物基本使用程序和要求(1)试验室如需要使用试验动物,应首先向生物安全和伦理委员会提出申请,填写申请表(见附件,试验动物使用申请表)。(2)使用试验室得到认可后,依据申请中申请动物种属和数量,安排试验动物喂养和使用。(3)试验动物必须在指定区域内喂养和使用,禁止在试验室喂养动物。试验操作结束时,动物须返回指定喂养区域内,不能在试验内过夜。(
19、4)动物试验应在试验室内指定区域进行。动物生物安全实验室第29页2、含有感染性材料动物试验要求 (1)包括感染性材料操作要在生物安全柜中进行,并预防泄露在安全柜底面。操作包含感染动物剖检、组织取材、采血及动物病原接种。(2)动物笼具在清洗前先做去除污染处理。(3)污物、一次性物品需放入医疗废物专用垃圾袋中,经高压灭菌后方可拿出试验室。(4)动物尸体用双层医疗废物专用垃圾袋包裹后,放入标有动物尸体专用容器中,用消毒液喷雾容器表面后,运至解剖区域剖检。(5)生物安全柜使用后应用消毒液擦拭、揩干。(6)废液需按百分比倒入有消毒液桶中,倒入时需沿容器壁轻倒共戴眼罩,预防溅入眼中。动物生物安全实验室第3
20、0页2、含有感染性材料动物试验要求 (7)假如有感染性物质溅到生物安全柜上、地上以及其它地方,应按“菌(毒)外溢在台面、地面和其它表面”处理,详细方法参见第十四章。(8)天天工作结束时,应用消毒液擦拭门把手和地面等表面区域。(9)废物放入高压灭菌器内时需同时粘贴指示条,物品移出前观察指示条是否到达灭菌要求。颜色不符时需重复高压灭菌。(10)高压灭菌器需每个月做灭菌测试一次,并作统计。 动物生物安全实验室第31页3、小动物喂养 小动物主要指小鼠、大鼠、豚鼠等啮齿类动物,其喂养应遵照以下标准:(1)使用动物必须按国家标准或试验特殊要求检验合格,充分准备后进入系统,喂养人员应按试验设施要求程序要求进
21、入系统。(2)及时观察动物饮食、精神情况,有没有异常表现,患病或死亡。(3)动物应可自由进食、饮水。定时检验水、料是否充分并及时补给。同时确保其它喂养条件完备。 动物生物安全实验室第32页4、大动物喂养 大动物主要指狗、猪及非人类灵长类动物等,其喂养应遵照以下标准:(1)使用动物必须按国家标准或试验特殊要求,检验合格,按检疫要求充分准备后方可进入动物试验室。(2)应将每只动物日摄取总量分批次喂给,以确保动物进食量和降低浪费。(3)应经常检验饮水装置,及时补充不足。(4)动物喂养区域应天天清扫,保持清洁,每七天将地面消毒3次。(5)喂给瓜果、蔬菜等须洗净消毒。禁止喂给腐烂发霉不洁食物,饮水要清洁
22、。(6)对饲喂动物所用小推车、食物容器、水容器等用具每七天进行两次消毒。(7)室内光照,要求明暗各12h自动交替(开灯12h,关灯12h)。动物生物安全实验室第33页5、动物检疫 (1)试验动物进入检疫室:在检疫室缓冲间内,用75%酒精喷洒动物外包装进行消毒,打开紫外灯照射1015min。(2)将经上述处理动物移入检疫室,依据要求进行检疫。(3)各动物检疫期不一样,大动物为2周,小动物为1周。(4)在检疫期内观察动物精神状态、食欲、营养情况、排泄物等,如有任何异常,动物不得用于试验,应退出动物检疫室。(5)检疫合格动物经适当处理后由缓冲间或物流通道进入动物试验室。 动物生物安全实验室第34页6
23、、动物试验相关操作(1)投药:依据试验要求,按不一样动物,不一样路径给药。主要包含灌胃和静脉注射。对接种了高致病性病原微生物动物,尤其是大动物,将动物麻醉后方可进行灌胃或静脉注射。小动物灌胃或静脉可依据情况选择是否麻醉,静脉注射时需使用保定器。(2)采样:标准上活检时应对动物进行麻醉。对接种了病原体大动物进行采血或体检时,要求将动物麻醉。对小动物进行采血时,可不麻醉动物,但要预防动物咬抓。(3)标本运输:要求用防渗漏容器装标本。放入标本容器应确保密封。将大、小动物标本从试验室传出应严格按照相关要求程序执行。(4)送检单填写:送检单应包含送检目标,送检物品,送检单位,送检人,送检日期,联络方式等
24、内容。 动物生物安全实验室第35页7、其它行为规范要求(1)物理限制 物理限制是指在试验过程中(包含检验、搜集标本、给药、治疗或试验操作等),用手或工具限制动物活动过程。主要标准和要求包含:限制工具不能作为常规喂养工具。工具设计应合理,不要仅考虑试验便利,主要考虑尽可能降低动物不适,防止伤害。尽可能降低限制时间,以到达试验目标为基准。在限制过程中,假如发生损伤或严重行为改变,应暂停或禁止限制,并给与处理或治疗。确保试验人员和周围人员安全。动物生物安全实验室第36页(2)手术操作 操作一定要使用适当镇静、镇痛或麻醉方法。禁止无须要重复操作。不提倡利用一个动物进行多个手术试验,不过,为充分利用动物
25、资源,经动物伦理委员会许可,在可能条件下能够实施。严格试验操作规程,预防发生血液/体液外溅和刺伤,防止生物污染。手术后动物、标本以及所用器具材料等必须要求程序妥善处置。 动物生物安全实验室第37页(3)饮食限制 试验动物标准上要求随时饮食,假如一些试验需要动物限制食物或水摄入量,应确保动物存活所需要最低需求量。依据研究目标,食物限量应经过科学论证,其限量标准应轻易操作,如正常摄入量百分比。对于水分限量摄入,一定要预防动物发生脱水现象,并保持动物膳食平衡。 动物生物安全实验室第38页(4)废弃物和尸体处理)血液和体液标本处理:用于抗体、抗原、病原微生物、生化指标等检验血液和体液,按照要求进行处理
26、并检测,检测后标本经121,30min高压灭菌处理。动物组织脏器处理:动物器官组织,尤其是用于病原微生物分离组织按照标准程序进行处理;用于病理切片组织,均需经过甲醛固定后再进行切片。剩下组织经121,30min高压灭菌处理。 动物生物安全实验室第39页动物尸体处理:安乐死后动物尸体,取材完成,经121,30min高压灭菌处理后,集中送环境保护部门处理。朊病毒感染动物处理标准参见第八章。动物生物安全三级(animal biosafety level 3,ABSL-3)试验室及以上级试验室感染动物尸体需经室内和双扉两道高压灭菌,才能移出试验室。动物咽拭子处理:用于病原分离和PCR检测咽拭子,按照各
27、自要求处理后,进行病毒分离和PCR检测,剩下标本经121,30min高压消毒处理。病原分离培养物处理:病原分离培养物,不论是阳性还是阴性结果,均需经121,30min高压消毒处理。动物生物安全实验室第40页四、各级动物生物安全防护试验室技术原理、设置要求和安全管理: (一)一级动物生物安全防护(ABSL1)试验室:(二)二级动物生物安全(ABSL-2)试验室 (三)三级动物生物安全(ABSL-3)试验室(四)四级动物生物安全(ABSL-4)试验室 动物生物安全实验室第41页(一)一级动物生物安全防护(ABSL1)试验室: 适合用于检疫后大多数种属动物(灵长类除外),以及专门接种了危害程度第四类
28、微生物如大、小鼠及金黄地鼠白血病病毒、小鼠乳腺瘤病毒等动物喂养和操作。设置要求:试验室与建筑物中普通通道不须隔开,普通在试验台上操作。防护设备:普通不要求专用防护设备。 动物生物安全实验室第42页试验室设施要求: 1、试验室设计与建筑应便于清洁。2、试验台表面不透水,耐酸、碱、有机溶剂、并耐热。3、试验室设备坚固。试验台、柜及设备之间空间应有适当距离便于清洁。 4、试验室区及动物喂养区应设洗手池。5、如试验室有可开关窗子应装上纱窗。6、试验室空气直接外排,不得再循环或回流至其它动物喂养区。 动物生物安全实验室第43页普通微生物学试验要求: 1、试验人员从事试验工作,需由试验室责任人同意,并决定
29、限制或禁止其它人员进入试验室。2、工作面天天消毒一次,并及时对溅落活微生物材料进行消毒。3、采取机械吸液装置,禁止用嘴吸液。4、在试验区内禁止饮食、吸烟、处理隐性眼镜及化装,食物应存放在专用储备柜或冰箱内,保留食物柜子或冰箱应放置在试验区以外。动物生物安全实验室第44页普通微生物学试验要求: 5、试验人员在操作活微生物材料及动物后,离开试验室之前均应洗手。6、全部污染液体或固体废弃物在处理前应去除污染。感染动物尸体需用防漏、有盖容器运出并焚化。7、全部操作均应按规程仔细小心进行,使气溶胶产生减至最底程度。8、动物喂养区门需能自动关闭,向内开启,平时保持关闭状态。9、试验室应有防昆虫及鼠类办法。
30、 动物生物安全实验室第45页特殊要求: 1、需通知进入试验室人员潜在危害,符合特定要求人员方能由责任人同意进入。 2、试验室要制订生物安全手册,供需要进入工作人员阅读并按程序执行。 3、提议穿长工作服,以预防污染。动物房工作服不能穿到其它试验区域。 4、需运至试验室外进行消毒处理污染材料,应装入坚固、密闭容器。 5、动物用笼架具可用手洗及机洗。 动物生物安全实验室第46页(二)二级动物生物安全(ABSL-2)试验室 与动物试验一级生物安全水平相同,适合用于那些对人及环境有中度潜在危险微生物和动物试验工作,其不一样点在于:人员经过操作病原性物质专门训练,并由能胜任科学人员监督管理;正在工作时限制
31、外人进入试验室;一些产生传染性气溶胶工作在生物安全柜或其它物理封闭设备内进行。设置要求:用生物安全柜或其它个人防护用具,或物理阻隔装置动物生物安全实验室第47页防护设备: 1、产生气溶胶可能性大操作,包含离心、研磨、匀浆、强烈震荡或混合、超声波破碎、开启内压与环境压力不一样传染材料容器、动物接种、由动物或鸡胚收获感染组织。2、使用高浓度或大容量传染性物质时,如采取密封转头或离心机安全罩可在试验室内离心上述材料。3、进入非人灵长类动物试验室人员需配戴保护面部、眼镜装备。4、在试验室内应穿专用工作服、帽子、口罩、鞋,离开试验室到非试验室区时,应脱下工作服。 动物生物安全实验室第48页试验室设施要求
32、: 除满足ABSL-1设施要求外,还应有高压蒸汽灭菌器,供传染性试验室废弃物去污染用。 动物生物安全实验室第49页普通微生物学试验要求: ABSL-2标准微生物学规范同ABSL-1。 动物生物安全实验室第50页特殊要求: ABSL-2试验室特殊规范,除满足ABSL-1要求外,还应注意:试验室责任人应确定进入试验室人员资质。在普通情况下,应禁止高度易感人群,如孕妇或免疫受损人员进入。操作传染性物质试验室,要有进入试验室特殊要求(如进行预防接种)。在进入动物试验室试验区门上标明“生物危险”警告标志,包含通用生物危险性标志,标明传染性物质种类、试验室责任人或其它人姓名、电话、以及进入试验室特殊要求。
33、工作人员需进行意外事故发生后紧急处理方法培训,并确保培训统计。因为泄漏或事故造成传染性材料显著暴露时,应马上向试验室责任人汇报。应按要求进行医学评定、检验及处理,并保留书面统计。注射及吸收传染性液体应使用针头固定注射器。动物生物安全实验室第51页特殊要求: 要尤其注意预防经皮肤感染,尤其是要防止被动物抓、咬伤。废弃物在处理前应去除污染。笼具需经高压灭菌或去污后方可洗涤。与试验无关动物不允许放在试验室内。依据传染因子情况,开展工作前采集并保留全部试验人员及有被感染危险其它人员本底血清样品。采集第二份血清样品间隔时间可随所用传染因子及试验室情况不一样而异。 制订生物安全手册,对工作人员说明特殊危险
34、性,并要求他们严格恪守。 动物生物安全实验室第52页(三)三级动物生物安全(ABSL-3)试验室 设置要求:用生物安全柜或其它个人防护用具,或物理阻隔装置 动物生物安全实验室第53页防护设备: 1、在试验室内穿上保护便服用试验服(如后开口服、全身覆盖服、两件套服、连衣裤)。2、在有传染性动物室内应戴模压面罩或防毒面具。3、动物试验需加戴防撕咬手套,无菌方式摘除后与动物房废弃物一同处理。4、专用靴子等防护性鞋罩,脱除之前要消毒。5、动物喂养笼可戴滤过帽或在负压式IVC或隔离器喂养。动物生物安全实验室第54页 试验室设施要求: 1、动物试验室须在整体建筑自成一区。可经过隔离门与公共走廊相连。2、动
35、物试验室通道门需互锁。3、墙、地面、天棚内表面应耐水,方便于清洁。这些表面贯通处应已密封或能密封,方便于该区域去除污染。4、每个试验室设置洗手池。洗手池要有支架、肘推开关或自动开关;并设在试验室出口处。动物生物安全实验室第55页 试验室设施要求: 5、试验室内窗户关闭,并密封。6、试验室进出门、或封闭组件能自动关闭。7、动物试验室通风设备开启时,按先开排风机后开送风机次序进行,关闭时先关送风机后关排风机。8、由生物安全柜排出气体经HEPA滤器过滤后可直接排放,或经过建筑物中排气系统排放;生物安全柜应每12个月检验一次,其排出空气能够在试验室内再循环。如由生物安全柜排出经HEPA滤器过滤空气要经
36、过建筑物排气系统排放,其连接方法(如套管部件连接)应能防止干扰生物安全柜或建筑物排气系统空气平衡。9、应有通讯设备和闭路电视监控系统。 动物生物安全实验室第56页普通微生物学试验要求:ABSL-3标准微生物学规范同ABSL-1动物生物安全实验室第57页特殊要求: ABSL-3试验室特殊规范,满足ABSL-2要求外,还应注意:1、当试验室或封闭单元内有传染性材料或感染动物时,在进入试验室或动物室门上应标明“生物危险”警告标志,包含通用生物危险性标志,标明传染因子名称,试验室责任人或其它责任人姓名,电话号码,以及进入试验室一些特殊要求,如必须免疫,戴防毒面具或采取其它个人防护办法。2、全部包括传染
37、性材料活动都应在封闭单元中生物安全柜或其它物理封闭设备内进行。不得在敞开试验台进行敞口容器操作。3、在传染性材料操作结束时,生物安全柜及其它封闭设备工作面应去除污染。4、真空管线用高效空气过滤器及液体消毒剂消毒装置。动物生物安全实验室第58页(四)四级动物生物安全(ABSL-4)试验室 设置要求:用生物安全柜或其它个人防护用具,或物理阻隔装置。动物生物安全实验室第59页防护设备: 1、全部动物必须喂养在隔离器内。2、全部感染性材料操作都必须在三级生物安全柜中进行。有生命维持系统试验室,相关操作可在二级生物安全柜内进行。3、进入试验室时,工作人员必须脱下包含内衣裤全部日常服装,并换上专用防护服。
38、工作结束后,必须脱下防护服进行消毒,淋浴后再离去。4、设施必须安装带有HEPA过滤器排风系统进行通风,以确保室内负压(向内气流)。动物生物安全实验室第60页防护设备: 5、通风系统必须能预防气体逆流及出现正压。6、必须配置双门高压灭菌器来传递物品,洁净端在防护室外房间内。7、必须配置传递气锁舱以供不能高压灭菌物品,其洁净端在防护室外房间内。8、在进行感染危害程度第一类病原微生物动物操作时,均必须在四级生物安全水平最高防护试验室中进行。 动物生物安全实验室第61页试验室设施要求: 1、有安全柜式试验室和正压服式试验室。前者进行微生物操作时均在三级生物安全柜中进行。后者工作穿戴携带有生物维持系统特殊防护服装,在二级生物安全柜操作。 2、设有化学消毒淋浴室。 动物生物安全实验室第62页普通微生物试验要求: 必须符合一级、二级及三级生物安全水平动物设施全部要求。严格限制进入,只有试验室责任人指定工作人员方有权进入。禁止单独工作,必须恪守
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