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文档简介
1、如果我们想知道1g土壤中有多少分解尿素的细菌,该如何去做?第1章 发酵工程1.2 微生物的培养技术及应用第2课时 微生物的选择培养和计数如何从土壤中筛选出分解尿素的细菌?1资料一水生栖热菌能在70-80的高温条件下生存,而绝大多数微生物则不能。1973年,科学家利用水生栖热菌的这种特性,从美国黄石国家公园的热泉中将其筛选出来,从中提取出耐高温的DNA聚合酶现广泛应用于PCR技术。选择培养微生物的生长需要哪些条件?1选择培养基允许特定种类微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。如何从土壤中筛选出分解尿素的细菌?1选择培养资料二尿素的含氮量很高,化学性质相对稳定,是农业生产中一种重要
2、的氮肥。土壤中某些可以合成脲酶的细菌能够将尿素分解为NH3并作为氮源加以利用;而不能合成脲酶的菌,则无法将尿素作为生长的氮源。微生物的生长需要哪些条件?1如何从土壤中筛选出分解尿素的细菌?1选择培养标准培养基类型配制特点主要应用物理性质固体培养基加入凝固剂(琼脂)较多菌种分离,鉴定,计数半固体培养基加入凝固剂较少微生物的运动、分类鉴定液体培养基不加凝固剂工业生产,连续培养化学组成合成培养基由已知成分配制而成,培养基成分明确菌种分类、鉴定天然培养基由天然成分配制而成,培养基成分不明确工业生产,降低成本目的用途鉴别培养基添加某种指示剂或化学药剂菌种的鉴别选择培养基添加(或缺少)某种化学成分菌种的筛
3、选微生物的生长需要哪些条件?1如何从土壤中筛选出分解尿素的细菌?1培养菌种类型原理配制特点结果尿素分解菌选择培养基合成脲酶以尿素作为唯一氮源仅允许特定微生物生长鉴别培养基酚红遇碱变红添加酚红菌落周围出现红圈培养菌种类型原理配制特点结果纤维素分解菌选择培养基合成纤维素酶以纤维素作为唯一碳源仅允许特定微生物生长鉴别培养基刚果红与纤维素形成红色复合物添加刚果红菌落周围出现透明圈如何对微生物进行计数?2NO.1稀释涂布平板法1.选择多大稀释范围进行计数?2.为减小误差,同一浓度样品液在涂板计数时应如何去做?3.选择菌落数为多少的平板进行计数较为适宜?4.此法计数结果与土壤中的实际数目一致吗?思 考如何
4、对微生物进行计数?2NO.1稀释涂布平板法计算1.将1g土壤溶解于9ml无菌水中,充分摇匀。取0.1ml接种到培养基上,均匀涂布,培养后进行计数,若平板上菌落数的平均值为200,则1g土壤中的活菌数约为多少?2.若菌液的稀释倍数为103呢?如何对微生物进行计数?2NO.2显微镜计数法血细胞计数板如何对微生物进行计数?2NO.2显微镜计数法血细胞计数板两种计数方法有何不同?思 考如何对微生物进行计数?2显微镜计数法稀释涂布平板法计数工具血细胞计数板平板计数对象显微镜下菌体本身培养基上的菌落数计数结果实际值实际值原因活菌和死菌的总和多个细胞连在一起时仅呈现出一个菌落优点计数方便,操作简单活菌计数缺点死菌也计算在内操作复杂,误差较大直接计数间接计数12345制备选择培养基以尿素作为唯一氮源配置选择培养基样品稀释对土壤样品进行梯度稀释预实验了解大致范围培养待培养液吸收倒置平板将空白平板和对照平板一同放入恒温培养箱土壤取样取地表下3-8cm
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