北五味子多糖的提取和含量测定

1、北五味子多糖的提取和含量测定【摘要】目的建立提取和测定北五味子中多糖含量的方法。方法采用比色法测定北五味子中多糖含量。结果测得北五味子中多糖含量为6.57%，平均回收率为99.78%，RSD=1.54%。结论该方法简便、精细度及重现性均较好，结果令人满意。【关键词】北五味子多糖提取含量测定ExtratinandDeterinatinfPlysaharidefrShisandrahinensis(Turz)BaillFruitAbstrat：bjetiveTestablishaethdfrtheextratinanddeteinatinfplysaharidefrShisandrahinensi

2、s(Turz)BaillFruit.ethdsPlysaharideinShisandrahinensis(Turz)BaillFruitasdeterinedbytheethdfSpetrphtetry.ResultsTheplysaharidesinShisandrahinenisis(Turz)BaillFruitas6.57%,theaveragereveryas99.78%,RSDas1.54%.nlusinThisethdissiple，theresultisstable，reprduible,andsatisfatry.Keyrds：Shisandrahinensis(Turz)

3、Baill；Plysaharide;Extratin;Deterinatin北五味子Shisandrahinensis(TurzBaillFruit是木兰科植物五味子的枯燥成熟果实，是著名的滋补性中药，因其果实甘、酸、辛、苦、咸五味俱全，故名五味子，具有敛肺、滋肾、生津、收汗、涩精之成效。现代药理研究证实五味子对中枢神经系统、呼吸系统均有兴奋作用，亦能促进肝糖原异生，加快肝糖原分解，在治疗神经衰弱、肝炎等的药物中应用非常广泛。五味子有南北之分，据?本草纲目?记载“五味子南产者红，北产者黑，入滋补药，必用北者为良，北五味子的化学成分主要为五味子木脂素、挥发油、五味子醇、多糖等1。近年来对多糖提取

4、工艺的研究方法很多，如热水浸提法、稀碱液浸提法、稀酸液浸提法。但多糖是由单糖基通过糖苷键连接而成的化合物，在稀酸、稀碱条件下，易使多糖发生糖苷键的断裂，部分多糖发生水解而使多糖的提取率减少，因此本文采用热水浸提法，用苯酚-硫酸法测定北五味子多糖的含量，得到满意的结果。1仪器与药品2方法与结果2.1葡萄糖储藏液的配制精细称取105枯燥至恒重的葡萄糖100g，用蒸馏水溶解并定容到100l。2.3测定条件选择2.6多糖的提取流程北五味子粉碎后，称取500g，用清水洗净，加水4500l，微沸煎煮1h。过滤，滤渣加水2000l，煎煮1h，过滤，合并提取液，加热浓缩至300l。参加乙醇使乙醇含量为80%放

5、置12h，抽滤，沉淀依次用无水乙醇、丙酮反复洗涤，得到棕色粗多糖。将粗多糖溶于水，用seveg法除去蛋白，参加1%活性碳脱色，抽滤，滤液参加乙醇，使溶液含醇达80%，静置过夜，抽滤，残渣用无水乙醇、丙酮反复洗涤，真空枯燥，即得精制北五味子多糖。2.7换算因子测定准确称取60枯燥恒重的五味子多糖20g，加水溶解后定容到100l容量瓶中，摇匀，作为多糖储藏液准确量取多糖储藏液0.2l，加水至1.0l按测量标准曲线同样的方法测其吸光度值，根据标准曲线计算浓度。按下式计算换算因子：f=/D式中：为多糖重量g，为测试液中据标准曲线方程计算得到的单糖浓度gl-1D为多糖的稀释因子，测得f=1.748，n=

6、6。2.8样品含量的测定准确称取枯燥五味子粉末100g，3份，分别置于索氏提取器中，用80%乙醇回流提取1h，改用水微沸煎煮，3份分别煎煮1，2，3次，各定容至100l，为样品液。分别精细汲取上述样品液10l，分别定容至100l，各取1.0l，按2.4项下操作，平行做6次，并按下式计算多糖含量以粗多糖计。结果见表1。说明提取两次即可。多糖含量%=Df/100。式中：为样品溶液的葡萄糖的浓度gl-1，D为样品溶液的稀释因子，f为换算因子，为样品的重量g。表1样品中多糖的含量略3讨论硫酸比色法是测定多糖含量较经典有效的方法之一，但各自的报道中，对反响温度的控制、试剂中苯酚及硫酸用量不尽一样。常见的

7、反响温度有煮沸、40恒温和室温3种，鉴于冬天和夏天室温相差较大，本实验仅比拟于前两种条件，证实本法以40恒温30in较好。参加苯酚量0.6l以上时，反响能完成。对于硫酸的用量，经实验比照认为硫酸占总体积62.5%以上时，在重现性、稳定性及回收率方面都有明显的优越性，并且与文献报道一致2。3.2实验结果说明，北五味子多糖提取两次即可，平均含量为6.57%，比文献报道的稍低3，这可能与北五味子的产地、采收季节等因素有关。3.3五味子粗多糖的初步药理研究说明4，五味子粗多糖能明显进步小鼠的耐缺氧才能，具有抗疲劳作用，亦能使正常小鼠胸腺和脾脏的重量的增加。说明五味子粗多糖可以进步机体对环境的适应才能和防御才能。而北五味子多糖含量较高，这可能是北方五味子药效较优的原因之一，但是北五味