项目名称：基于“肝藏血主疏泄”的脏象理论研究首席科学家

1、项目名称称：基于“肝肝藏血主主疏泄”的脏象象理论研研究首席科学学家：王庆国 北京中中医药大大学起止年限限：20111.1至至20115.88依托部门门：国家中医医药管理理局二、预期期目标本项目的的总体目目标： 1、系系统梳理理肝藏血血主疏泄泄的脏象象理论，澄清其其历史源源流，明明确理论论的含义义、内容容及相互互关系，发展与与创新肝肝脏象理理论，探探索脏象象学说及及中医理理论发展展与创新新的新模模式。 2、确立立肝藏血血主疏泄泄功能异异常的主主要宏观观表现及及微观指指标，建建立肝藏藏血主疏疏泄功能能异常状状态的判判别模式式。 3、阐释释肝藏血血主疏泄泄功能的的生理调调控机制制，分析析肝藏血血与主

2、疏疏泄间的的关联网网络。 4、揭示示从肝论论治临床床疗效产产生的机机制和规规律。 5、阐释释肝藏血血主疏泄泄在神经经内分泌泌免疫网网络中特特异的功功能区域域、传导导通路以以及特异异的反应应状态，揭示肝肝藏血主主疏泄的的基本科科学内涵涵。 五年预期期目标: 1.阐明明肝藏血血主疏泄泄的基本本含义、学说内内容及两两者间的的关系。阐明肝肝藏血主主疏泄的的应用范范围与原原则。 2.澄清清肝藏血血主疏泄泄理论的的演变史史，探索索适合脏脏象学说说及中医医理论发发展与创创新的新新模式。 3、编制制健康人人群调查查量表，完成3300例例正常健健康人四四时八节节的动态态追踪调调查研究究；1220例健健康志愿愿者

3、两种种应激状状态前后后的比较较研究。建立肝肝藏血主主疏泄调调控机体体的状态态判别模模式，探探讨肝藏藏血与主主疏泄的的内在调调控机制制及内在在相关性性。 4、完成成1000只大鼠鼠、200只树鼩鼩四时八八节的动动态研究究。5、完成成1000例月经经规律的的健康志志愿者月月经周期期观测及及应激反反应测试试。6、完成成1200例健康康志愿者者两种应应激状态态前后的的比较研研究。建建立肝藏藏血主疏疏泄调控控机体的的状态判判别模式式，探讨讨肝藏血血与主疏疏泄的内内在调控控机制及及内在相相关性。7、编制制四种疾疾病的临临床调查查量表，完成每每种疾病病各8000例以以上的临临床横断断面调查查；建立立肝藏血血

4、主疏泄泄功能异异常状态态的判别别模式。8、完成成临床观观测与干干预，五五种疾病病各3000例；揭示五五种疾病病从肝论论证的机机制和证证治规律律。9、建立立4-88种可反反映肝藏藏血主疏疏泄功能能异常状状态的抑抑郁症等等5种疾疾病的病病证结合合动物模模型及其其判别方方法。10、完完成动物物模型功功能区神神经元活活性、血血管反应应性、肠肠敏感性性、内分分泌腺体体反应性性等功能能测定、化学物物质的含含量变化化、化学学物质的的反馈作作用等相相关指标标的检测测，完成成关键组组织部位位的基于于测序技技术的转转录组（数字基基因表达达谱）、小RNNA分析析；完成成不少于于20个个关键分分子的mmRNAA及蛋白

5、白质水平平的验证证；完成成关键分分子相关关调控网网络的分分析，揭揭示出与与肝藏血血主疏泄泄功能密密切相关关的共性性分子网网络。 11、完完成养血血调肝方方对抑郁郁症等55种疾病病的反证证及该方方对肝藏藏血主疏疏泄功能能密切相相关的共共性分子子网络的的作用机机制研究究；完成成实质性性肝损伤伤对肝藏藏血主疏疏泄功能能密切相相关的共共性分子子网络影影响的研研究。 12、完完成相关关各项数数据分析析及挖掘掘；完成成信息管管理系统统的平台台建设；建立基基于熵理理论分析析方法与与隐结构构分析方方法的应应用规范范。 13、发发表相关关学术论论文3000篇左左右，其其中SCCI 220篇左左右，出出版相关关学

6、术著著作2部部。 14、培培养博士士研究生生50名名，硕士士研究生生80名名，博士士后6名名；形成成多学科科交叉、中青年年为主的的创新性性研究梯梯队。三、研究究方案1、以肝肝藏血主主疏泄为为核心的的肝脏象象理论研研究本项目应应用历史史分析的的方法进进行中医医理论研研究。即即采用知知识考古古学等思思想史研研究思路路与中医医传统文文献方法法结合，系统梳梳理从先先秦时期期到新中中国成立立前历代代中医及及相关文文献，以以肝主疏疏泄为切切入点，分析肝肝主疏泄泄及相关关专题的的对象形形成、陈陈述方式式、概念念的扩散散、主题题策略的的选择等等内容，对文献献中肝藏藏血主疏疏泄应含含义及其其诊治体体系生成成变化

7、进进行具体体分析，以发现现构成某某一时期期医学思思想整体体的深层层结构“知知识型”或“基本信信码”，也就就是话语语，根据据话语的的转变来来分析肝肝藏血主主疏泄应应含义及及其诊治治体系的的演变及及背后的的原因，以分析析其形成成和转变变的历史史；在肝肝藏血主主疏泄及及其相关关理论学学术发展展史的基基础上，确立其其理论内内涵、应应用范围围与原则则，论证证其在脏脏象学说说、脏腑腑辨证以以及临床床各科疾疾病诊治治中的地地位与作作用，解解决学术术分歧与与争议。1.1 肝藏血血主疏泄泄及其相相关理论论的知识识考古学学研究话语构构成分析析：应用用知识考考古学，对文献献中肝藏藏血主疏疏泄及其其相关研研究单元元进

8、行话话语构成成分析，分别对对肝藏血血主疏泄泄及其相相关研究究单元在在辨证论论治体系系中进行行对象形形成、陈陈述方式式、概念念扩散、主题从从属等话话语构成成的四要要素分析析。即：历代医医学文献献中肝藏藏血主疏疏泄对象象的形成成，也就就是在诊诊治过程程中应用用肝藏血血主疏泄泄疾病范范围的确确定、肝肝藏血主主疏泄病病症之间间的划分分方法；肝藏血血主疏泄泄在诊治治体系中中陈述方方式，即即肝藏血血主疏泄泄以什么么方式、与哪些些概念、以什么么次序关关系出现现在诊治治体系中中；肝藏藏血主疏疏泄的界界定，即即在诊治治体系中中，在肝肝藏血主主疏泄与与肝藏血血主疏泄泄等其它它概念、学说的的相互关关系中，肝藏血血主

9、疏泄泄是怎样样被界定定的；肝肝藏血主主疏泄的的从属的的主题，即肝藏藏血主疏疏泄是在在论述什什么问题题时才出出现。话语转转型分析析：分析析肝藏血血主疏泄泄及其相相关研究究单元知知识型的的断裂点点，确定定其话语语形成系系统的成成分转换换、话语语形成体体系特征征性的关关系转换换、各种种不同话话语形成成规则之之间的转转换、各各种实证证性之间间的关系系的转换换。1.2 肝藏血血主疏泄泄及其相相关理论论学术发发展史的的确立在肝藏血血主疏泄泄及其相相关理论论等的关关系中确确定肝藏藏血主疏疏泄的含含义与应应用范围围、应用用原则，并在肝肝藏血主主疏泄临临床适用用范围改改变的基基础上确确立其学学术的演演变史；阐明

10、其其所在诊诊治体系系的构成成要素、诊断和和治疗原原则、处处方原则则及其从从一个时时期到另另一个是是其转换换的历史史。1.3 肝藏血血主疏泄泄理论内内涵的确确定在肝藏血血主疏泄泄及其相相关理论论学术发发展史的的基础上上，确立立其理论论内涵、应用范范围与原原则，论论证其在在脏象学学说、脏脏腑辨证证以及临临床各科科疾病诊诊治中的的地位与与作用，解决学学术分歧歧与争议议。2、生理理状态下下肝藏血血主疏泄泄功能的的调控机机制研究究2.1 依据现现代文献献提取的的信息，编制半半开放式式健康人人群调查查他评量量表。遵遵循临床床流行病病学抽样样调查的的相关各各项要求求，依据据20005年全全国1%人口抽抽样调

11、查查资料数数据，在在全国多多家医院院的体检检中心、学校及及社区，开展体体检无器器质性病病变中青青年人群群3000例（男男：女=1：11）动态态追踪调调查，分分别在一一年四时时八节（立冬、冬至、立春、春分、立夏、夏至、立秋、秋分），分时时间段从从躯体症症状、情情绪、生生活质量量、生活活事件、相关指指标（生生命特征征、体质质体能、血常规规、一滴滴血、虹虹膜仪、脉象仪仪、舌象象仪、面面色分析析仪、神神经递质质、退黑黑素等）及一般般情况等等信息，建立数数据库。 2.2采采用方差差分析、秩和检检验等统统计方法法，分析析宏观表表现及微微观指标标的关联联性；在在不同季季节的差差异性；以及随随季节变变化的动动

12、态规律律。 2.3 应用隐隐结构模模型对调调查数据据库进行行多维样样本聚类类分析，由计算算机自动动搜索对对调查人人群进行行分类，分析其其中与肝肝藏血主主疏泄状状态相关关的人群群，而后后提取该该人群的的特征性性症状与与指标，建立肝肝藏血主主疏泄功功能状态态的判别别模型。 2.4动动物四时时八节的的动态观观测选取W大大鼠1000只，树鼩220只，根据北北京市气气象局气气象科学学研究所所提供。20111年11月-220166年1月月5年的的四时八八节的气气候参数数：包括括日照百百分数、平均温温度、日日温差、平均气气压、日日降水量量、平均均风力、平均相相对湿度度、平均均湿度/平均温温度共88项。分分别

13、选取取四时八八节（立立冬、冬冬至、立立春、春春分、立立夏、夏夏至、立立秋、秋秋分）八八个时间间点，动动态观察察动物的的表征，进行褪褪黑素、神经递递质等多多项指标标的检测测，建立立数据库库，描述述动物四四时八节节各项指指标的动动态变化化曲线，提取动动物状态态的核心心指标，建立动动态变化化判别模模式，分分析肝藏藏血主疏疏泄功能能与时间间节律的的相关性性。3、健康康志愿者者应激状状态下肝肝藏血主主疏泄功功能的调调控机制制研究3.1妇妇女月经经周期应应激研究究：选取取月经规规律的健健康志愿愿者1000人，连续观观测其三三个月经经周期的的情绪、躯体症症状以及及一般性性指标的的变化，并与月月经期、黄体期期

14、、月经经后期分分别进行行应激状状态测试试，主要要进行心心理认知知测试，检测多多导脑电电等指标标，建立立数据库库进行分分析，探探索月经经周期中中肝藏血血状态变变化与疏疏泄功能能的相关关性，并并总结肝肝藏血主主疏泄异异常状态态下应激激变化规规律，探探讨肝藏藏血主疏疏泄的内内在机制制。3.2健健康志愿愿者应激激刺激前前后不同同状态与与肝藏血血主疏泄泄关系的的研究：选取1120例例（男：女=11：1）健康志志愿者，采用情情绪图片片、面孔孔、音乐乐、声音音、文字字和影片片等刺激激材料，根据研研究需要要控制其其情绪类类型以及及愉悦度度和唤醒醒度水平平。通过过自我回回忆、材材料刺激激、社会会交互作作用等诱诱

15、发手段段使被试试处于一一定情绪绪状态。在情绪绪表达抑抑制、认认知重评评、向上上和向下下情绪调调节、情情绪分类类、内隐隐情绪任任务、快快速呈现现、视觉觉掩蔽、线索靶范式式、情感感启动范范式、延延迟反应应任务、n-bbackk等经典典的实验验范式中中，综合合运用行行为学测测试、生生理多导导仪记录录、事件件相关电电位（EERP）和功能能磁共振振成像（fMRRI）等等技术手手段，从从反应时时、正确确率、EERP成成分的波波幅和潜潜伏期、脑区激激活以及及脑功能能联结等等多个方方面分析析肝脏在在情绪产产生、调调节和情情绪与认认知相互互作用中中的地位位及相应应心理、生理机机制。 给予志志愿者进进行较大大强度

16、的的运动任任务负荷荷，通过过主观报报告、问问卷调查查和客观观评分确确定和划划分研究究对象的的情绪状状态。进进行运动动前后心心理量表表评测、视力系系统测定定、脑电电图、脑脑血流图图、肝血血流图的的检测，以及微微循环系系统指标标的检测测，探讨讨运动前前后肝藏藏血功能能的调节节机制。并分析析藏血与与疏泄之之间的相相关性。4、信息息学管理理系统及及分析方方法研究究4.1 编写数数据库程程序，应应用现代代信息管管理学方方法，根根据研究究中文献献、临床床、实验验各项研研究数据据的特点点，编制制关联数数据库，对相关关信息进进行统一一规范、标示及及编码，从而形形成统一一的数据据库录入入平台。 4.2针针对研究

17、究目标及及相关研研究数据据的特点点，进行行算法研研究，完完善基于于熵理论论的数据据分析方方法及隐隐结构模模型的分分析方法法，并编编写为软软件开展展网络化化运行，为整体体项目搭搭建数据据分析平平台。4.3应应用两种种数据分分析方法法，对四四种疾病病的临床床宏观表表现及微微观指标标进行综综合分析析，提取取与肝藏藏血主疏疏泄相关关的病证证结合下下宏观表表现与微微观表现现的共性性特点和和个性特特征。4.4应应用两种种数据分分析方法法，对四四种疾病病提取肝肝藏血主主疏泄相相关的病病证结合合下动物物模型的的宏观表表征与微微观指标标进行分分析，提提取其共共性特点点和个性性特征，建立动动物模型型的判别别模式。

18、4.5对对项目组组脏象研研究的各各项数据据进行综综合分析析，提炼炼肝藏血血主疏泄泄的共性性生物学学基础。4.6 应用信信息平台台对各项项研究进进行实时时录入、盲法核核对及质质量监控控。5、抑郁郁症、经经前期综综合征从从肝论治治的研究究5.1 流行病病学调查查5.1.1编制制调查表表。由专专家组根根据研究究目的，通过参参考大量量文献，充分考考虑可行行性及有有效性，设计抑抑郁症（轻中度度）、经经前期综综合征（重度，PMDDD）流流行病学学调查内内容，并并进行预预调查，在此基基础上，修改制制定研究究用调查查表。5.1.2开展展流行病病学调查查。应用用编制的的调查表表，对符符合上述述疾病诊诊断和纳纳入

19、标准准的患者者开展流流行病学学横断面面调查，采集患患者的一一般个人人信息、躯体症症状、情情绪精神神症状、舌象、脉象，并对部部分患者者进行相相关微观观指标检检测。5.1.3资料料整理与与分析。建立流流行病学学研究数数据库，对资料料进行逻逻辑检查查和处理理；运用用方差分分析、LLogiist回回归分析析等方法法，确立立肝主疏疏泄调畅畅情志功功能异常常的主要要宏观表表现及微微观指标标，建立立宏观与与微观相相结合的的肝主疏疏泄调畅畅情志功功能异常常状态的的判别模模式。5.2 临床疗疗效研究究5.2.1从肝肝论治抑抑郁症（轻中度度）临床床疗效。病例选选择 符合中中国精神神疾病分分类方案案与诊断断标准第第

20、3版（CCMMD-）的抑抑郁症发发作诊断断标准且且中医辨辨证为肝肝气郁证证、符合合纳入标标准的患患者。分组方方法 采用随随机数字字表将受受试者随随机分配配至方药药对证组组（自拟拟方舒郁郁）、方方药次对对证组（自拟方方舒郁加加减）。疗程及及随访 疗程程8周，对治疗疗后临床床痊愈、显效及及有效的的患者，治疗后后长期随随访，观观察是否否复发。临床疗疗效评定定方法 于治治疗前、治疗11w、22w、44w、66w、88w末，采用汉汉密尔顿顿抑郁量量表、临临床疗效效总评量量表、疾疾病严重重程度量量表、中中医证候候积分表表、副反反应量表表进行疗疗效及副副反应评评定。5.2.2从肝肝论治经经前期综综合征（重度

21、，PMDDD）临临床疗效效。病例选选择 符合西西医经前前期综合合征（重重度，PPMDDD）诊断断标准且且中医辨辨证为肝肝气逆证证、符合合纳入标标准的患患者。分组方方法 采用随随机数字字表将受受试者随随机分配配至方药药对证组组（自拟拟方白香香丹）、方药次次对证组组（自拟拟方白香香丹加减减）。疗程及及随访 疗程程2个月月经周期期，对治治疗后临临床痊愈愈、显效效及有效效的患者者，治疗疗后进行行远期随随访，观观察是否否复发。临床疗疗效评定定方法 采用用症状状严重程程度每日日报告、经经前期综综合征（重度，PMDDD）肝肝气逆证证症状严严重程度度医生记记录表、副反反应量表表进行疗疗效和副副反应评评定。5.

22、3临临床疗效效的作用用机制5.3.1临床床研究脑功能能区定位位研究 小样样本选取取健康志志愿者，抑郁症症（轻中中度）肝肝气郁证证患、经经前期综综合征（重度，PMDDD）肝肝气逆证证患者，采用BBLODD-fMMRI技技术，观观察上述述研究对对象治疗疗前后相相关脑区区（激活活、抑制制）的位位点及其其数目、强度，并与对对照组比比较，探探讨其脑脑功能活活动区的的异同点点。定位下下的脑功功能区血血流灌注注及相关关指标信信号检测测 利利用利用用单光子子/正电电子发射射计算机机断层显显像（SSPECCT/PPET）及磁共共振波谱谱成像（MRSS）技术术，在研研究内容容基础上上，探查查其局部部脑血流流状态及

23、及葡萄糖糖物质代代谢变化化，评估估其脑功功能，揭揭示抑郁郁症（轻轻中度）肝气郁郁证患、经前期期综合征征（重度度，PMMDD）肝气逆逆证相关关脑区功功能改变变。外周联联系途径径相关指指标变化化 检检测各组组受试对对象血浆浆中相关关微观指指标，并并通过组组间及治治疗前后后对照，比较各各组疗效效差异，探讨抑抑郁症（轻中度度）、经经前期综综合征（重度，PMDDD）不不同病证证的神经经体液机机制。5.3.2模型型动物及及离体细细胞实验验。动物模模型造模模及评价价 经经前期综综合征（重度，PMDDD）肝肝气逆证证大鼠模模型：应应用情志志刺激为为主多因因素造模模法制备备经前期期综合征征（重度度，PMMDD）

24、肝气逆逆证大鼠鼠模型。动物模模型评价价：采集集模型动动物证候候表征进进行证候候归属评评价，检检测模型型动物生生物指标标进行疾疾病归属属评价。 动物物模型相相关脑区区定位及及定位下下的神经经机制 进行行相应脑脑区定位位并应用用脑微透透析灌流流技术，实时检检测去甲甲肾上腺腺素（NNE）、5-羟羟色胺（5-HHT）等等关键指指标水平平变化。动物模模型外周周血及不不同脑区区关键指指标变化化特点与与关键基基因功能能验证 检测测模型动动物相关关脑区、外周血血中关键键生物指指标含量量，筛选选出与经经前期综综合征（重度，PMDDD）肝肝气逆证证密切相相关的神神经递质质和激素素。进行行模型动动物的基基因表达达谱

25、分析析及关键键基因的的分布、定位及及功能验验证，筛筛选其发发病及药药物干预预密切相相关靶基基因。相关指指标的分分子机制制及其信信号转导导 取取正常大大鼠相应应部位神神经元进进行体外外培养，用上述述病证的的人或动动物血清清、脑脊脊液处理理细胞，免疫荧荧光和WWestternn Bllot寻寻找病证证相关神神经递质质或激素素的受体体及其介介导的细细胞内信信号转导导。6、肠易易激、高高血压、肝硬化化三种疾疾病病证证临床流流行病学学横断面面调查6.1 通过对对三种疾疾病现代代文献分分析，提提取与肝肝藏血主主疏泄相相关的症症状、证证候要素素、证候候；依据据此信息息建立临临床信息息采集量量表，通通过预调调

26、查进行行量表的的联合信信度检测测。 6.2 应用临临床信息息采集表表，在全全国多中中心同步步开展大大样本约约8000例/病病的临床床流行病病学横断断面普查查。分别别对符合合现代疾疾病诊断断和各项项纳入标标准的患患者进行行临床躯躯体症状状、情绪绪精神症症状的调调查，并并采用统统一的检检测标准准，检测测相关实实验室指指标。其其中主要要指标包包括：三三种疾病病同性指指标血液流流变学指指标、血血脂、血血糖、血血清促肾肾上腺皮皮质激素素释放激激素（CCRH）；血清清皮质醇醇，血浆浆去甲肾肾上腺素素（NEE）、55-羟色色胺（55-HTT）等；各种疾疾病特有有指标。6.3 建立临临床信息息数据库库，进行行

27、多种统统计分析析，主要要包括：频数分分析描述述调查人人群特征征；方差差分析方方法统计计不同疾疾病不同同分期的的差异性性；相关关分析方方法统计计宏观症症状与微微观指标标的相关关性；LLogiist回回归分析析、判别别分析提提取特征征症状、指标；并结合合无监督督数据分分析方法法（如基基于熵的的分析、隐结构构模型）确立肝肝藏血主主疏泄功功能异常常的主要要宏观表表现及微微观指标标，及其其在三种种疾病中中的共性性表现特特点和个个性特征征；建立立宏观与与微观相相结合的的肝藏血血主疏泄泄功能异异常状态态的判别别模式。7、应用用养血调调肝系列列方剂对对三种疾疾病患者者进行药药物干预预7.1按按照三种种疾病现现

28、代医学学的疾病病诊断标标准，及及较为公公认的中中医证候候诊断标标准，选选择肠易易激综合合征肝郁郁脾虚证证3000例、脾脾胃虚寒寒证1000例；高血压压病肝阳阳上亢证证3000例、肝肝火炽盛盛证1000例；肝硬化化脾肾阳阳虚、肝肝气滞血血瘀证1100例例、肝肾肾阴虚、气滞血血瘀证2200例例。按照照临床为为理论创创新服务务，为实实验研究究奠定基基础的原原则，按按照1：1：11：1的的比例，分别设设立安慰慰剂对照照组、方方证对应应组、方方证次对对应组、非干预预证候对对照组，参照新新药创制制的研究究方法，应用养养血调肝肝方剂的的免煎颗颗粒，进进行临床床干预研研究。 7.2依依据建立立的肝藏藏血主疏疏

29、泄功能能异常状状态的判判别模型型编制临临床观测测量表，对纳入入研究的的患者分分别在治治疗前、治疗后后及随访访期，采采集其宏宏观临床床症状、体征及及微观指指标，建建立数据据库。 7.3 应用方方差分析析、秩和和检验、判别分分析、因因子分析析、多维维尺度分分析等多多种统计计方法，分析各各项症状状、指标标在治疗疗前后的的差异性性；不同同证候类类型间的的差异性性；不同同疾病间间的异同同性等。并综合合分析结结果分析析从肝论论证的干干预机制制及证治治规律。8、肝藏藏血主疏疏泄现代代科学内内涵的实实验研究究8.1肝肝藏血主主疏泄功功能异常常的病证证结合动动物模型型的构建建8.1.1 建建立公认认的疾病病动物

30、模模型。分分别采用用慢性应应激和嗅嗅球切除除法制备备抑郁症症大鼠模模型，采采用孤养养加慢性性不可预预见性应应激和新新生鼠母母子分离离复合避避水应激激法建立立肠易激激综合征征大鼠模模型，采采用双肾肾一夹法法和自发发高血压压大鼠构构建高血血压大鼠鼠模型，采用腹腹腔注射射二甲基基亚硝胺胺法和皮皮下注射射四氯化化碳法诱诱导肝纤纤维化大大鼠模型型。以上上的疾病病模型分分别按照照现行的的疾病诊诊断标准准进行严严格的评评价，合合格动物物纳入研研究。8.1.2 进进行动态态、全面面的信息息采集。对上述述符合疾疾病诊断断的动物物模型，从模型型成立的的时间点点起，拟拟定动物物信息观观察表，进行规规范化的的动态信信

31、息采集集，以评评价其证证候属性性。信息息采集表表的条目目主要来来自于：动物实验验研究文文献提示示的反映映疾病的的动物宏宏观表征征 和反反映证候候属性的的动物宏宏观表征征 ；临床证候候研究文文献提示示的与证证候密切切相关的的理化指指标；本项目组组的临床床研究提提示的与与具有诊诊断和鉴鉴别诊断断意义的的临床症症状和可可用于证证候判别别的理化化指标特特征模式式。8.1.3 动动物证候候属性的的辨识。 动物物证候属属性的辨辨识以临临床诊断断标准为为依据，采用课课题组前前期建立立的以宏宏观特征征组合、微观指指标特征征组合、方剂反反证相结结合的三三维动物物证候判判别方法法进行辨辨识。首首先通过过宏观特特征

32、组合合和微观观指标特特征组合合确定各各疾病模模型的证证候演变变规律。通过不不同疾病病造模方方法的比比较，筛筛选出较较优的抑抑郁症肝肝气郁结结证、肠肠易激综综合征肝肝郁脾虚虚证、高高血压肝肝阳上亢亢证、肝肝硬化肝肝肾阴虚虚气滞血血瘀等病病证结合合动物模模型。8.1.4方剂剂反证。在上述述病证结结合动物物模型证证候属性性稳定的的时间窗窗内，分分别采用用对证的的养血调调肝方药药和次对对证的方方药进行行干预治治疗，并并以模型型组和正正常组作作为对照照，进一一步佐证证模型动动物的证证候属性性。各模模型的干干预药物物和临床床组统一一，以相相互应证证。8.2 肝藏血血主疏泄泄的调控控机制研研究8.2.1分组

33、组。通过过上述筛筛选得到到的稳定定的反映映肝藏血血主疏泄泄异常状状态的病病证结合合动物模模型作为为实验组组，以不不符合相相应证候候诊断的的疾病模模型和正正常组作作为对照照，从整整体、器器官、分分子三个个层面分分析肝藏藏血主疏疏泄的调调控机制制，观测测指标分分为共性性的核心心指标和和反映疾疾病个性性的二级级指标以以及探索索性的基基因分析析指标等等三大类类。8.2.2核心心指标和和疾病相相关的二二级指标标的检测测。采用用HPLLC电电化学检检测、EELISSA、免免疫组化化、RTT-PCCR等，研究： （11）核心心指标围围绕慢性性应激相相关的调调控网络络，包括括：1）整体体指标：行为学学实验、脑

34、血流流图、肝肝血流图图、功能能核磁共共振。2）血液液指标：神经递递质（包包括DAA、NAA、NEE、5-HT、Achh等）；内分泌泌激素（包括CCRH、ACTTH、皮皮质醇、褪黑素素等）；血管舒舒缩因子子（包括括ET、CGRRP、 AnggII 等）、肝脏合合成（代代谢）的的生物活活性分子子（如 HSPP70、Hcyy 等）。3）组织织检测指指标：神神经递质质、激素素及其受受体在特特定脑区区、疾病病相关的的效应器器官的表表达水平平（包括括DA、NA、5-HHT 、皮质醇醇等及其其受体）和病理理形态学学检测。（2）疾疾病相关关的二级级指标1）抑郁郁症：氨氨基酸神神经递质质含量/受体表表达（GGl

35、uNMDDA受体体、GAABAGABBA受体体），离离子通道道和信号号转导分分子分析析、对信信号转导导分子调调节物质质（包括括PDEE4等），适应应性调控控分子（包括GGRK、-arrresstinn等）2）肠易易激综合合征：在在体结肠肠运动、离体结结肠平滑滑肌张力力、离体体肠粘膜膜短路电电流、外外周血PP物质含含量、GGABAA、肥大大细胞活活化程度度观察、胸腺、脾脏脏脏体指数数计算、T淋巴巴细胞亚亚群水平平分析、外周血血环核苷苷酸水平平、外周周血前列列腺素EE2水平平等。3）高血血压：224h动动态血压压、ATT1、 NO 、ANNP、 AVPP、 CCa2+ PPGI22 、TTXA22

36、、 精精氨酸加加压素等等。4）肝硬硬化：外外周血HHA、PPCIIII、LLN、IIVCC、 TTGF-1，血血清肝功功能（包包括ALLT,AAST,ALBB等）、肝组织织血管紧紧张素受受体、TTGF1、SSmadd4、SSmadd7等。8.2.3数字字化基因因表达谱谱分析和和smaall RNAA分析。在上述述的研究究结果进进行分析析和整合合，初步步确定肝肝藏血主主疏泄的的共性的的特定反反应脑区区。对特特定反应应区域的的组织样样本，采采用测序序技术数数字化基基因表达达谱分析析和smmalll RNNA分析析，结合合生物信信息学分分析，进进一步探探索其可可能的分分子调控控机制。8.2.4共性性

37、调控机机制的提提取。综综合研究究结果，采用神神经网络络、图模模型等多多种数据据挖掘方方法，对对上述各各调控分分子进行行关联和和分析，初步建建立起调调控网络络。并实实现分子子、组织织器官和和整体水水平的功功能状态态的逐级级整合，刻画出出肝藏血血主疏泄泄的多级级的特定定调控网网络。8.3养养血调肝肝方干预预的效应应机制研研究8.3.1分组组。采用用本研究究构建的的反映肝肝藏血主主疏泄功功能异常常状态的的病证结结合动物物模型，随机分分为模型型组、对对证治疗疗组、次次对证治治疗组，同时设设正常对对照组。8.3.2 肝肝藏血主主疏泄的的分子调调控网络络的检测测。在证证候稳定定的时间间窗内分分组给药药，观

38、察察养血调调肝药物物对于22.2.4获得得的特定定指标群群的影响响，从而而验证肝肝藏血主主疏泄的的调控网网络并阐阐明养血血调肝药药物的作作用机制制。技术路线线图四、年度度计划年度研究内容容预期目标标第一年1、研究究实施方方案的论论证与讨讨论2、文献献整理研研究。3、生理理状态研研究的文文献分析析4、应激激研究的的文献分分析5、信息息平台建建设的筹筹建6、五种种疾病的的现代文文献研究究7、五种种疾病临临床调查查的前期期准备8、五种种疾病动动物模型型的构建建9、动物物模型证证候评价价指标体体系的文文献研究究1、拟定定课题实实施方案案，分割割研究任任务，签签订研究究任务书书2、完成成知识考考古学分分

39、析肝藏藏血主疏疏泄有关关的研究究单元的的对象形形成分析析3、完成成肝脏象象功能生生理状态态研究的的文献分分析，编编制生理理状态研研究调查查表，分分析北京京地区四四时八节节气象变变化特点点5、完成成中医理理论与应应激研究究相关的的文献分分析，编编制月经经周期研研究调查查表，初初步筛选选志愿者者6、拟定定信息平平台建设设方案，编制相相关程序序，进行行平台试试运行7、建立立五种疾疾病现代代文献数数据库，完成数数据分析析8、拟定定五种疾疾病临床床流行病病学调查查实施方方案，编编制调查查表，进进行人员员培训，并完成成预调查查9、建立立五种疾疾病动物物病证结结合的证证候模型型10、发发表文章章10篇篇左右

40、第二年1、肝藏藏血主疏疏泄知识识考古学学研究2、开展展健康人人群及动动物的四四时八节节动态观观察3、进行行月经周周期动态态观测4、正式式运行信信息平台台5、五种种疾病的的临床流流行病学学调查6、五种种疾病动动物模型型的动态态观察和和证候属属性辨识识7、模型型动物证证候属性性的方剂剂反证研研究8、进行行课题中中期总结结与检查查1、完成成知识考考古学对对肝藏血血主疏泄泄有关的的研究单单元进行行话语构构成分析析之陈述述方式分分析、概概念扩散散分析、主题从从属分析析。2、完成成3000例健康康人群88个时间间点的动动态观察察，完成成宏观指指标与微微观指标标的观测测；3、完成成1000只大鼠鼠，200只

41、树鼩鼩8个时时间点的的动态观观测4、完成成1000例健康康志愿者者月经周周期观察察与应激激测试5、进行行信息平平台使用用培训，正式进进行平台台运行6、完成成五种疾疾病各8800例例全国多多中心临临床流行行病学调调查7、基于于临床流流调数据据进行数数据分析析，建立立宏观与与微观相相结合的的“肝藏血血主疏泄泄”异常状状态的判判别模式式。8、4种种以上的的反映肝肝藏血主主疏泄功功能异常常状态的的病证结结合动物物模型及及其判别别方法。9、撰写写课题中中期总结结报告，完成中中期检查查10、发发表论文文10篇篇左右第三年1、完善善后三年年研究方方案2、肝藏藏血主疏疏泄有关关的研究究单元的的知识考考古学话话

42、语转换换分析3、完成成健康人人及动物物生理四四时八节节研究4、开展展志愿者者应激状状态测试试研究5、信息息平台多多中心质质量监控控及数据据库建设设6、开展展五种疾疾病临床床干预研研究7、动物物模型的的实验室室指标检检测1、拟定定后三年年研究实实施方案案，编制制后三年年课题任任务书2、完成成肝藏血血主疏泄泄有关的的研究单单元的系系统成分分转换分分析、话话语关系系转换分分析。3、建立立健康人人生理研研究数据据库，提提取核心心指标，描绘动动态变化化曲线，建立肝肝藏血主主疏泄生生理状态态判别模模式4、建立立动物四四时八节节研究数数据库，提取相相关核心心指标，描绘动动态变化化曲线5、建立立月经周周期变化

43、化及应激激测试的的数据库库，探讨讨肝藏血血主疏泄泄与情绪绪变化的的相关性性，揭示示其内在在机制6、拟定定应激研研究实施施方案，筛选研研究志愿愿者7、通过过信息平平台对各各课题组组全国多多中心的的研究进进行动态态实时质质量监控控，建立立大型关关联数据据库。8、完成成五种疾疾病各1100例例的临床床干预试试验，检检测各项项指标9、完成成肝藏血血主疏泄泄可能相相关的核核心指标标及二级级指标的的检测，分析其其在慢性性应激相相关的神神经内分分泌网络络的表现现特征10、发发表文章章10篇篇左右第四年1、肝藏藏血主疏疏泄的文文献研究究2、志愿愿者应激激状态前前后变化化的研究究3、信息息平台的的数据汇汇交与分

44、分析4、五种种疾病的的临床干干预研究究5、动物物模型的的基因组组学和蛋蛋白组学学研究1、完成成肝藏血血主疏泄泄的文献献研究2、进行行60例例健康志志愿者应应激测试试，分析析其应激激前后宏宏观与微微观指标标变化规规律3、完成成关联数数据库的的建设，进行数数据汇总总4、完成成五种疾疾病各2200例例的临床床干预试试验，检检测各项项指标，建立数数据库5、完成成肝藏血血主疏泄泄相关特特定脑区区的数字字化基因因表达谱谱和smmalll RNNA分析析6、完成成肝藏血血主疏泄泄共性调调控网络络的提取取7、揭示示肝藏血血主疏泄泄相关特特定脑区区的基因因表达特特征和ssmalll RRNA表表达特征征8、发表

45、表文章110篇左左右第五年1、完成成应激状状态前后后变化的的研究2、进行行数据汇汇交与分分析3、完成成养血调调肝方药药对肝藏藏血主疏疏泄共性性调控网网络的作作用及其其机制研研究4、总结结研究成成果，进进行结题题1、完成成1200例健康康志愿者者应激测测试，建建立数据据库，分分析其内内在机制制2、通过过信息平平台，进进行多种种数据分分析，进进行数据据汇交，综合进进行数据据挖掘3、揭示示养血调调肝方药药的对肝肝藏血主主疏泄调调控的内内在机制制4、阐明明养血调调肝方药药的对肝肝藏血主主疏泄调调控网络络的效应应及其机机制5、发表表文章110篇左左右6、撰写写结题报报告，完完成结题题验收一、研究究内容1

46、、肝脏脏象理论论的内涵涵、外延延及发展展源流研研究 以传统中中医文献献学的研研究方法法为基础础，借鉴鉴法国现现代思想想体系史史家米歇歇尔福福柯创立立知识考考古学的的研究方方法，结结合现代代数理挖挖掘技术术，以历历代中医医文献与与史书、志书、笔记等等其它相相关古代代文献为为研究对对象，系系统总结结、深入入阐明肝肝藏血主主疏泄及及相关理理论内在在涵义及及学术发发展源流流。其具具体研究究内容包包括：系系统梳理理从先秦秦时期到到新中国国成立前前历代中中医及相相关文献献，以肝肝主疏泄泄为切入入点，分分析肝主主疏泄及及相关专专题的对对象形成成、陈述述方式、概念的的扩散、主题策策略的选选择等内内容，对对文献

47、中中肝藏血血主疏泄泄的含义义及其诊诊治体系系生成变变化进行行具体分分析，以以发现构构成某一一时期医医学思想想整体的的深层结结构“知识识型”或“基本信信码”，也就就是话语语，根据据话语的的转变来来分析肝肝藏血主主疏泄的的含义及及其诊治治体系的的演变及及其原因因，以分分析其形形成和转转变的历历史；在在肝藏血血主疏泄泄及其相相关理论论学术发发展史的的基础上上，确立立其理论论内涵、应用范范围与原原则，论论证其在在脏象学学说、脏脏腑辨证证以及临临床各科科疾病诊诊治中的的地位与与作用，解决学学术诸如如“体阴用用阳”“肝阳虚虚”等学术术分歧与与争议；揭示相相关疾病病从肝论论治临床床疗效产产生的机机制和规规律

48、，进进一步丰丰富和发发展脏象象理论；同时探探讨中医医理论发发展与创创新的规规律，尝尝试建立立一个以以历史分分析为基基础进行行中医理理论研究究方法。 2、生理理状态下下肝藏血血主疏泄泄功能的的调控机机制研究究（1）正正常健康康人肝藏藏血主疏疏泄与四四时节律律的相关关性研究究：遵循循临床流流行病学学抽样调调查的原原则，依依据中医医时间医医学五脏脏节律的的原理，在全国国多中心心对3000例（男女各各1500例）健健康人进进行四时时八节的的动态追追踪调查查；全面面采集调调查者的的一般信信息、症症状、情情绪、生生活质量量、实验验室指标标等多种种信息，建立数数据库。（2）正正常动物物肝藏血血主疏泄泄与四时

49、时节律的的相关性性研究：选择啮啮齿类动动物大鼠鼠与灵长长类动物物树鼩，依据中中医时间间医学五五脏节律律的原理理，选取取一年中中的四时时八节，采集88个时间间点动物物的表征征，进行行动物行行为学检检测，以以及神经经递质、退黑素素、血管管紧张素素、肾上上腺皮质质等神经经内分泌泌指标的的检测，建立数数据库。 在统统一的信信息管理理系统下下，应用用现代信信息学手手段，进进行数据据分析，提炼肝肝藏血与与疏泄功功能的节节律性变变化特点点；揭示示其调节节机制。3、健康康志愿者者应激状状态下肝肝藏血主主疏泄功功能的调调控机制制研究（1）妇妇女月经经周期应应激研究究：选取取月经规规律的健健康志愿愿者1000人，

50、连续观观测其三三个月经经周期的的情绪、躯体症症状以及及一般性性指标的的变化，并与月月经期、黄体期期、月经经后期分分别进行行应激状状态测试试，主要要进行心心理认知知测试，检测多多导脑电电等指标标，建立立数据库库进行分分析，探探索月经经周期中中肝藏血血状态变变化与疏疏泄功能能的相关关性，并并总结肝肝藏血主主疏泄异异常状态态下应激激变化规规律，探探讨肝藏藏血主疏疏泄的内内在机制制。（2）健健康志愿愿者应激激刺激前前后不同同状态与与肝藏血血主疏泄泄关系的的研究：选取健健康志愿愿者1220例（男女各各60例例）进行行情绪刺刺激和运运动负荷荷两种应应激状态态前后的的比较研研究，采采集志愿愿者应激激前后的的宏观表表现、心心理与认认知功能能，以及及神经递递质、退退黑素、血管紧紧张素、肾上腺腺皮质等等神经内内分泌指指标的变变化并建建立数据据库。4、五种种疾病肝肝藏血主主疏泄功功能异常常状态的的判别研研究 在现代文文献研究究基础上上，借鉴鉴心理学