土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

1、学习必备 欢迎下载课题 2 土壤中分解尿素的细菌的分别与计数课题目标（一）学问与技能 利用挑选培育基分别细菌,运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数（二）过程与方法 分析争论思路的形成过程,找出共性和差异性（三）情感、态度与价值观形成无菌不在的概念,养成讲究卫生的习惯课题重点 对土样的选取和挑选培育基的配制课题难点 对分解尿素的细菌的计数教学方法启示式教学教学工具多媒体课件教学过程（一）引入新课 上节课我们学习了培育基的配置以及接种技术；下面我们来学习如何进行细菌的分别,获得所需要的目的微生物；（二）进行新课 1基础学问 11 尿素是一种重要的氮肥,农作物不能（能,不能）直接吸取利用,而是

2、第一通过土壤中的细菌将尿素分解为氨和 CO2 ,这是由于细菌能合成脲酶 ；12 科学家能从热泉中把耐热细菌挑选出来是由于热泉的高温条件剔除了绝大多数微生物,这样也适用于试验室中微生物的挑选,原理是 人为供应有利于目的菌株生长的条件（包括养分、温度、PH 等）,同时抑制或阻挡其他微生物生长；点评：生物适应肯定环境,环境对生物具有挑选作用；培育条件等挑选目的微生物；所以通过配制挑选培育基、掌握摸索 1在该培育基配方中,为微生物的生长供应碳源的是葡萄糖,供应氮源的的是 尿素 ,琼脂的作用是凝固剂；摸索 2该培育基对微生物具有 （具有,不具有）挑选作用；假如具有,其挑选机制是只有能够以尿素作为氮源的微

3、生物才能在该培育基上生长；除13 在统计菌落数目时,常用来统计样品中活菌数目的方法是稀释涂布平板法此之外,显微镜直接计数学习必备欢迎下载也是测定微生物数量的常用方法；【补充】显微镜直接计数是测定微生物的方法；公式：观看到的红细胞平均数观看到的细菌平均数红细胞含量细菌含量14 采纳稀释涂布平板法统计菌落数目时,培育基表面生长的一个菌落,来源于 样品稀释液中一个活菌；通过统计 平板上的菌落数,就能估计出样品中大约含有多少活菌；为了保证结果精确,一般挑选菌落数在30300 的平板进行计数；摸索 3从平板上的菌落数估计出每克样品中的菌落数的运算方法是（平均菌落数 涂布的稀释液体积） 稀释倍数；摸索 4

4、利用稀释涂布平板法胜利统计菌落数目的关键是 恰当的稀释度；摸索 5第 二 位同学的结果接近真实值；你认为这两位同学的试验需要改进的操作是第一位同学需设置重复试验组；其次位同学统计的三个菌落数相差太大,说明操作有误,需重新试验；15 统计的菌落数比活菌的实际数目低 ；这是由于当两个或多个细胞在一起时,平板上观看到的只是一个 菌落；因此,统计结果一般用菌落数来表示；16 设置对比的主要目的是排除试验组中非测试因素对试验结果的影响,提高试验结果的可信度；17 对比试验是指除了被测试的条件外,其他条件都相同的试验；满意该条件的称为对比组,未满意该条件的称为试验组；摸索 6请设计本试验的对比试验组：方案

5、 1：其他同学用 A 同学的土样进行试验；方案 2：A 同学以不接种的培育基作为空白对比；2试验设计21 试验设计的内容包括试验方案、材料用具、实施步骤和时间支配等；22 依据图示 27 填写以下试验流程：配制土壤溶液系列稀释涂布平板与培育菌落计数23 土壤微生物主要分布在距地表3 8cm 的近中性土壤中,约70 80为细菌；24 分别不同的微生物采纳不同的稀释度,其缘由是不同微生物在土壤中含量不同,其目的是保证获得菌落数在 30300 之间、适于计数的平板；细菌稀释度为 104、105、106,放线菌稀释度为 103、104、105,真菌稀释度为 102、 103、104；25 培育不同微生

6、物往往需要不同培育温度；细菌一般在 30 37培育 12d,放线菌一般在 2528培育 57d,霉菌一般在 2528的温度下培育 34d；26 在菌落计数时,每隔24h 统计一次菌落数目；选取菌落数目稳固时的记录作为结果,以防止因培育时间不足而导致遗漏菌落的数目；点评：菌种中有些菌体增殖快,有些菌体增值慢,所以培育时间要充分,使得每个菌体学习必备 欢迎下载都能形成肉眼可观看到的菌落；27 菌落的特点包括外形、大小、隆起程度、颜色等方面；摸索 8土壤微生物种类最多、数量最大的缘由是什么？土壤中养分物质含量丰富,环境条件相宜等；29 试验过程1）取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌；2

7、）应在火焰旁称取土壤10 g；将称好的土样倒入盛有90mL 无菌水的锥形瓶中,塞好棉塞；3）在稀释土壤溶液的过程中,每一步都要在火焰旁进行；4）试验时要对培育皿作好标记；注明培育基类型、培育时间、稀释度、培育物等；5）为了提高效率,在操作时更加有条不紊,应当事先规划时间；摸索 9在争论未知微生物时务必规范操作,以防被致病微生物感染,试验后肯定要洗手；3结果分析与评判31 对分别的菌种作进一步的鉴定,仍需要借助 生物化学 的方法；32 在细菌分解尿素的化学反应中,细菌合成的 脲酶 将尿素分解成了 氨 ；氨会使培育基的碱性 增强 ,PH 上升 ；因此,我们可以通过检测培育基 pH 变化来判定该化学

8、反应是否发生；33 在以 尿素 为唯独氮源的培育基中加入 酚红 指示剂；培育某种细菌后,假如PH 上升,指示剂将变 红 ,说明该细菌能够 分解尿素；摸索 10测定饮水中大肠杆菌数量的方法是将肯定体积的水用细菌过滤器过滤后,将滤膜放到 伊红美蓝 培育基上培育, 大肠杆菌菌落出现 黑 色,通过记述得出水样中大肠杆菌的数量；你认为在该试验中至少应取 三 个水样；（三）课堂总结、点评土壤分别挑选微生物的原理人为 条件有利于目的菌株生长中尿抑制或阻挡其他微生物生长素分微生物计数方法与原理稀释涂布平板法解菌显微镜直接计数的分对比设置与重复设置离与计数试验设计试验方案试验操作结果与分析课余作业学习必备 欢迎

9、下载某生物小组以空气中细菌含量为指标,调查校内内不同区域（教室、草场、校长室、卫 生间）的空气质量状况；请你写出完整的试验调查方案；教学体会 本节课可以从尿素在农业上的重要应用切入,介绍能分解尿素的细菌,进而说明这种细 使同学对 菌的作用是能够合成分解尿素的酶；在教学过程中, 可以联系生产生活实际,尿素以及分解尿素的细菌形成肯定的感性熟悉；同时通过课题背景的介绍,可以进行STS 训练； 对于试验中的对比原就,可以指导同学分组争论,在把握微生物分别技术的同时巩固试验设计的基本原就；资料袋 挑选培育基 挑选培育基的含义是：在培育基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进需要的微生物的生长；目的是从众多微生物中分别所需要的微生物；在培育基中加入某种化学物质可以做到这一点,如加入青霉素可以分别出酵母菌和霉菌；加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌；上加入的；这里的加入是在培育的培育成分的基础培育基中的养分成分的转变也可达到分别微生物的目的；如培育基中缺乏氮源时,可以分别固氮微生物, 由于非固氮微生物不能在