医院消毒灭菌效果监测总论

1、医院消毒灭菌效果监测广西区疾病预防控制中心 消毒与媒介防制科联系电话 第一页，共三十七页。医院消毒效果监测的意义 医院消毒灭菌是预防医院内感染的重要措施之一，消毒效果的监测是评价其消毒设备运转是否正常、消毒药剂是否有效、消毒方法是否合理、消毒效果是否达标的唯一手段，因而在医院消毒、灭菌工作中必不可少。 第二页，共三十七页。 一、医院消毒效果监测的原那么 监测人员需经过专业培训，掌握一定的消毒知识，熟悉消毒设备和药剂性能，具备熟练的检验技能； 选择合理的采样时间和顺序 遵循严格的无菌操作第三页，共三十七页。 二、医院消毒效果监测范围 日常监测重点科室手术室、层流洁净病

2、房、ICU、产房、新生儿科、母婴同室病房、透析室、血液病房、烧伤病房、供给室、内镜室、治疗室、换药室 发生医院内感染时应在发生感染的科室及相关科室采样监测 第四页，共三十七页。三、医院消毒效果监测分类 消毒灭菌效果监测： 使用中消毒液或无菌器械保存液 灭菌设备压力蒸汽灭菌器、环氧乙烷灭菌器 紫外线灯 灭菌物品 环境卫生学监测： 空气 物表 医务人员手 第五页，共三十七页。四、空气消毒效果监测 1、采样时间：消毒处理后、操作前进行采样。 2、布点及采样方法： 1类环境布点、采样方法：依据?医院洁净手术部建筑技术标准?(GB50333-2002)10.3.13、 手术区：需要特别保护的手术台及其周

3、围区域。 级手术室的手术区是指手术台两侧边至少各外推0.9m、两端至少各外推0.4m后包括手术台的区域； 级手术室的手术区是指手术台两侧边至少各外推0.6m、两端至少各外推0.4m后(包括手术台)的区域； 级手术室的手术区是指手术台四边至少各外推0.4m后包括手术台的区域。 级手术室不分手术区和周边区。 周边区：洁净手术室内除去手术区以外的其他区域。 第六页，共三十七页。1类环境级手术室布点方法 级手术室布点方法：13个点。其中：手术区5个点双对角线布点，周边区8个点每边内2点。 + + + + + + + + + + + +第七页，共三十七页。1类环境级手术室布点方法 级手术室布点方法： 9

4、个点。其中：手术区3个点单对角线布点，周边区6个点长边内2点，短边内1点。 + + + + + + + + +第八页，共三十七页。1类环境级手术室布点方法 类环境级手术室共布7个点。 其中：手术区3个点单对角线布点，周边区4个点每边内1点。 + + + + + + +第九页，共三十七页。 类环境采样方法 将普通营养琼脂平皿直径为9cm放在室内手术区和周边区各采样点处，采样高度离地面0.8米，采样时将平皿盖翻开，扣放于平皿旁，暴露30 分钟，盖好，于37培养24小时，分别计数手术区和周边区的平均菌落数。第十页，共三十七页。2、类环境布点、采样方法 依据?消毒技术标准?(卫生部2002年版) 3.

5、17.8。室内面积30M2，设内、中、外对角线3点，内、外点布点部位距墙壁1M处；室内面积30 M2，设4角及中央5点双对角线，4角的布点部位距墙壁1M处。 将普通营养琼脂平皿(直径为9cm)放在室内各采样点处，采样高度距地面1.5米GB15982-1995：0.81.5米，采样时将平皿盖翻开，扣放于平皿旁，暴露5分钟，盖好立即送检，于37培养48小时，计数平板菌落数，并计算出空气细菌菌落总数。 第十一页，共三十七页。3、空气样品检测方法 依据?消毒技术标准?2.1.3要求进行。 平板暴露法结果计算公式： 细菌总数(cfu/m3)=50000N / (AT) 式中A为平板面积cm2；T 为平板

6、暴露时间min；N 为平均菌落数cfu； 第十二页，共三十七页。4、结果判定 类区域结果判定： 等级 手术室名称 空气洁净度级别 细菌最大平均浓度(个30min) 手术区周边区手术区周边区特别洁净手术室100级1000级0.20.4标准洁净手术室1000级10000级0.751.5一般洁净手术室10000级100000级24准洁净手术室 300000级 5 第十三页，共三十七页。4、结果判定 类区域结果判定：细菌总数200 cfu/m3，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格。 类区域结果判定：细菌总数500 cfu/m3，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格。 第十四页，共三十

7、七页。空气采样时的本卷须知 1、消毒前前提将放置平皿的采样台准备好。 2、开门方式：自动门,推拉式弹簧门,有把手的门。 3、行走路线尽可能少 在室内走动 动作要 轻。先布皿 后开盖。 4、动态环境 5、同一房间空气、物表 采样，先采空气，后 采物表；最好由同一 人操作 。 5 4 3 2 1第十五页，共三十七页。五、物体外表消毒效果监测 1、采样时间：消毒处理后进行采样。 2、采样方法： 用5cm5cm的标准灭菌规格板，放在被检物体外表，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转棉拭子，连续采样4个，剪去手接触部位后，投入10ml含相应中和剂的无菌洗

8、脱液试管内，进行细菌菌落总数和致病菌检测。 门把手等不规那么物体外表用棉拭子直接涂擦采样 第十六页，共三十七页。五、物体外表消毒效果监测 3、检测方法： 1细菌总数检测：检测方法按?消毒技术标准?3.17.6. 31执行。小型物体外表的结果计算，用cfu/件。 2致病菌检测：检测方法按?消毒技术标准?3.17.15原那么执行。 4、结果判定 、类区域：细菌总数5cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。 类区域：细菌总数10cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。 类区域：细菌总数15cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。第十七页，共三十七页。采样本卷须知 1、空气、物表采样由同一人操作

9、。 2、物表采样应由近及远，兼顾上下中左右 3、母婴同室、血透室属类环境 4、样品标识一定要清楚，能朔源、追踪，以便整 改。 5、致病菌包括金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、 溶血性链球菌产房、新生儿科、母婴同室加 测沙门氏菌 6、采样棉签在现场要做空白对照。 第十八页，共三十七页。六、手消毒效果监测 1、采样时间：消毒后立即采样。 2、采样方法：被检人五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦2次(一只手涂擦面积约30cm2)，并随之转动采样的棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，进行细菌菌落总数和致病菌检测。 第

10、十九页，共三十七页。3、手消毒效果监测检测方法 1细菌总数检测：将采样管在混匀器上振荡20秒或用力振打80次，用无菌吸管吸取1.0ml待检样品接种于灭菌平皿，每一样本接种2个平皿，内参加已溶化的4548的营养琼脂15ml18 ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置361温箱培养48h，计数菌落数。 采样结果计算方法： 细菌总数cfu/cm2= 2致病菌检测：按?消毒技术标准?3.17.15原那么执行。 平板上菌落数稀释倍数 采样面积（cm2）第二十页，共三十七页。4、结果判定 、类区域工作人员：细菌总数5cfu/cm2，并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌为消毒合格。 类区域：细菌总数1

11、0cfu/cm2，并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。 类区域：细菌总数15cfu/cm2，并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。 母婴同室、婴儿室、新生儿科及儿科病房的工作人员手上，不得检出沙门氏菌、大肠杆菌、溶血性链球菌、黄色葡萄球菌。第二十一页，共三十七页。 本卷须知 1、分清普通卫生洗手和外科洗手卫生手消毒。 外科洗手标准值 ? 类环境：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌(产房、母婴同室、新生儿科加测沙门氏菌、溶血性链球菌) 类环境：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌 第二十二页，共三十七页。七、使用中消毒液或无菌器械保存液监测 1、使用中消毒液有效成分的测定 2、使用中消毒液

12、或无菌器械保存液染菌量的测定 1涂抹法： 2倾注法：用无菌吸管吸取消毒液1.0 ml，参加到9ml含相应中和剂的无菌生理盐水采样管中混匀，分别取0.5ml放入2只灭菌平皿内，参加已溶化的4548的营养琼脂15ml18 ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，一平板置20培养7天，观察霉菌生长情况；另一个平板置361温箱培养72h，计数菌落数。同时按3.17.15检测致病菌。 使用中消毒液或无菌器械保存液染菌量cfu/ml=每个平板上的菌落数20 结果判定：消毒液染菌量100cfu/ml，并未检出致病菌为合格。 第二十三页，共三十七页。本卷须知： 1、必须是使用中消毒液或无菌器械保存液。 2、要求采样后

13、1h内检测，实际工作中由于各种原因做不到，采5ml样品放在灭菌试管中试管中不放中和剂带回实验室。 3、样品名称一定要标识清楚，不仅要注明采样地点，而且要注明消毒液的名称、有效浓度等，例：劲康消毒剂、0.1%健之素消毒液、80%漂白粉溶液、 0.5%洗必泰等标识都是不正确的。 4、消毒液细菌菌落总数标准值100cfu/ml，无菌器械保存液细菌菌落总数标准值是不得检出。 5、致病菌检测包括金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、沙门氏菌、溶血性链球菌。 第二十四页，共三十七页。八、灭菌物品消毒效果监测 1、采样时间：在灭菌处理后，存放有效期内采样。 2、采样方法：按?消毒技术标准?3.17.5.2原那么执行

14、 3、结果判定：阳性对照在24小时内应有菌生长，阴性对照在培养期间应无菌生长,如需-厌氧菌及霉菌培养管内均为澄清或虽显浑浊但经证明并非有菌生长，判为灭菌合格；如需-厌氧菌及霉菌培养管中任何1管显浑浊并证实有菌生长，应重新取样，分别同法复试2次，除阳性对照外，其他各管均不得有菌生长，否那么判为灭菌不合格。 第二十五页，共三十七页。4、灭菌物品消毒效果监测本卷须知 1、无菌检验应在洁净度为100级单向流空气区域内进行，最好把灭菌包带回在百级实验室翻开。应严格遵守无菌操作，防止微生物污染。 2、应采有效期内的样品高压灭菌：一般是两周；还氧乙烷：两年第二十六页，共三十七页。九、灭菌器灭菌效果监测1、监

15、测方法： 工艺监测 化学监测化学指示卡、指示胶带 生物监测2、常用灭菌器种类 压力蒸汽灭菌器 环氧乙烷灭菌器 3、生物指示物 嗜热脂肪杆菌芽胞ATCC7953,压力蒸汽灭菌器 枯草杆菌黑色变种芽胞ATCC9372环氧乙烷灭菌器第二十七页，共三十七页。4、压力蒸汽灭菌器灭菌效果监测检测方法 生物指示菌片布放方法?消毒技术标准? 1将两个嗜热脂肪杆菌芽胞菌片分别装入灭菌小纸袋内，置于标准试验包中心部位。 2下排气压力蒸汽灭菌器灭菌柜室内，排气口上方放置一个标准试验包 预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌器灭菌柜室内，排气口上方放置一个标准试验包 手提压力蒸汽灭菌器：通用贮物盒代替标准试验包，贮物盒内盛满中

16、试管，指示菌片放于中心部位的两支灭菌试管内，贮物盒放于手提压力蒸汽灭菌器底部。 第二十八页，共三十七页。4、生物指示菌片布点方法 生物指示菌片布放方法?现代医院消毒? 1将两个嗜热脂肪杆菌芽胞菌片分别装入灭菌小纸袋内，置于标准试验包中心部位。 20.5 M3以上的大灭菌柜在上层和中层中央部位，下层前、中、后等五个部位各放一个试验包。 小型灭菌柜两层在上层中央部位和下层前、后等三个部位各放一个试验包； 小型灭菌柜三层在上、中、下层中央各放一个试验包 手提式或台式灭菌器在下层底部放一个试验包。第二十九页，共三十七页。 经一个灭菌周期后，在无菌的条件下取出标准试验包或贮物盒中的指示菌片，投入溴甲酚紫

17、葡萄糖蛋白胨水培养基中，经培养7天自含式生物指示物按说明书执行，观察培养基颜色变化。检验时设阴性对照和阳性对照。 结果判定：每个指示菌片接种的溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基都不变色，判定为灭菌合格；指示菌片之一接种的溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基都由紫色变为黄色时，那么灭菌过程不合格。 第三十页，共三十七页。环氧乙烷灭菌器灭菌效果监测 枯草杆菌黑色变种芽胞ATCC9372菌片事先放入一次性注射器中每个注射器中放1个菌片，然后封装在一剥离式包装袋内。菌片在灭菌器内布放的数量应足够多，应放在那些在性能鉴定时发现是最难灭菌的部位，并均匀分布于整个灭菌物品中。 上、中、下层对角线前、中、后各布放一个菌片，

18、排气口上方放置一个菌片，共放置10个菌片。第三十一页，共三十七页。本卷须知1、灭菌器：要注明灭菌器型号、产地等 2、在进行环氧乙烷灭菌器灭菌效果监测时，灭菌 器一定要满载。3、出现阳性结果要进行工艺监测，分析原因4、监测所用菌片须经卫生部认可，并在有效期内 使用。第三十二页，共三十七页。十、紫外线消毒效果监测 紫外线灯管辐照度值的测定，一般采用紫外线辐照计测定法。开启紫外线灯5分钟后，将测定波长为253.7nm的紫外线辐照计探头置于被检紫外线灯下垂直距离1m的中央处，待仪表稳定后，所示数据即为该紫外线灯的辐照度值。 结果判定：普通30W直管型紫外线灯，新灯辐照强度90 W/cm2为合格；使用中紫外线灯辐照强度70 W/cm2为合格；30W高强度紫外线灯辐照强度180 W/cm2为合格； 第三十三页，共三十七页。 本卷须知： 1、紫外线辐照计必须在计量部门检定的有效期内使用，如有校正系数，测定值应用校正系数修正。 2、监测人员做好自我防护，以免被紫外线灼伤。第三十四页，共三十七页。医院消毒效果监测现场采样物品清单1、原始记录表含紫外灯监测记录2、白大褂、帽子、口罩、鞋套3、广口瓶、75%酒精手消毒液4、记号笔5、定时钟6、试管架7、酒精灯、无水酒精、打火机8、辐照计、防护服、防护眼睛9、污物缸10、橡皮筋第三十五页，共三十七页。医院消毒效果监测现场采样物品清单需提前灭菌的物品 11