实验一 水体富营养化程度的评价

1、实验一 水体富营养化程度的评价一、实验目的和要求1、掌握总磷、叶绿素-a的测得原理及方法。2、评价水体的富营养化状况。二、实验原理和方法富营养化(eutrophication)是指在人类活动的影响下，生物所需的氮、磷等营养物 质大量进入湖泊、河口、海湾等缓流水体，引起藻类及其他浮游生物迅速繁殖， 水体溶解氧量下降，水质恶化，鱼类及其他生物大量死亡的现象。在自然条件下， 湖泊也会从贫营养状态过渡到富营养状态，沉积物不断增多，先变为沼泽，后变 为陆地。这种自然过程非常缓慢，常需几千年甚至上万年。而人为排放含营养物 质的工业废水和生活污水所引起的水体富营养化现象，可以在短期内出现。水体 富营养化后，

2、即使切断外界营养物质的来源，也很难自净和恢复到正常水平。水 体富养化严重时，湖泊可被某些繁生植物及其残骸淤塞，成为沼泽甚至干地。局 部海区可变成“死海，或出现“赤潮现象。植物营养物质的来源广、数量大，有生活污水、农业面源、工业废水、垃圾 等。每人每天带进污水中的氮约50 g。生活污水中的磷主要来源于洗涤废水，而 施入农田的化肥有50%80%流入江河、湖海和地下水体中。许多参数可用作水体富营养化的指标，常用的是总磷、叶绿素-a含量和初级 生产率的大小(见表7-1 )。表水体富营养化程度划分富菖养化程度初皴生产率- m2 - S1总璘j ig L1无机冠J ! r1楹贫01360.0050.200

3、贫-中0.0050.010a.2000.400中1374090.0100.030a.3000.650中-富a.0300.100a.5001.500富蜀口5470.1001.5001、磷的测定在酸性溶液中，将各种形态的磷转化成磷酸根离子(PO43-)。随之用钼酸铵和酒石 酸锑钾与之反应，生成磷钼锑杂多酸，再用抗坏血酸把它还原为深色钼蓝。砷 酸盐与磷酸盐一样也能生成钼蓝，0.1 g/m的砷就会干扰测定。六价铭、二价 铜和亚硝酸盐能氧化钼蓝，使测定结果偏低。三、仪器设备及试剂1、仪器可见分光光度计。移液管：1 mL、2 mL、10 mL。容量瓶：100 mL、250 mL。锥型瓶：250 mL。比色

4、管：25 mL。BOD 瓶：250 mL。具塞小试管：10 mL。玻璃纤维滤膜、剪刀、玻棒、夹子。试剂过硫酸铵(固体)。浓硫酸。1 mol/L硫酸溶液。2 mol/L盐酸溶液。6 mol/L氢氧化钠溶液。1%酚酞：1 g酚酞溶于90 mL乙醇中，加水至100 mL。丙酮:水(9:1)溶液。酒石酸锑钾溶液:将4.4 g K(SbO)C4 H4 06 -1/2H2 O溶于200 mL蒸馏水中， 用棕色瓶在4C时保存。钼酸铵溶液：将20g (NH4 )6MO7 O24 -4 H2 O溶于500 mL蒸馏水中，用塑料 瓶在4 C时保存。抗坏血酸溶液：0.1 mol/L (溶解1.76 g抗坏血酸于10

5、0 mL蒸馏水中，转 入棕色瓶，若在在4C时保存，可维持一个星期不变)。混合试剂：50 mL 2 mol/L硫酸、5 mL酒石酸锑钾溶液、15 mL钼酸铵溶 液和30 mL抗坏血酸溶液。混合前，先让上述溶液达到室温，并按上述次序混合。 在加入酒石酸锑钾或钼酸铵后，如混合试剂有浑浊，须摇动混合试剂，并放置几 分钟，至澄清为止。若在4C下保存，可维持1个星期不变。磷酸盐储备液(1.00 mg/mL磷)：称取1.098 g KH2 PO4，溶解后转入 250 mL容量瓶中，稀释至刻度，即得1.00 mg/mL磷溶液。磷酸盐标准溶液:量取1.00 mL储备液于100 mL容量瓶中，稀释至刻度， 即得磷

6、含量为10用/ mL的工作液。四、实验步骤1、标准曲线的绘制：分别吸取10用/ mL磷的标准溶液0.00、0.50、1.00、 1.50、2.00、2.50、3.00 mL于50 mL比色管中，加水稀释至约25 mL，加入1 mL 混合试剂，摇匀后放置10 min，加水稀释至刻度，再摇匀，10 min后，以试剂空 白作参比，用1 cm比色皿，于波长880 nm处测定吸光度。2、水样处理：水样中如有大的微粒，可用搅拌器搅拌23 min，以至混合 均匀。量取100 mL水样(或经稀释的水样)2份，分别放入250 mL锥型瓶中， 另取100 mL蒸馏水于250 mL锥型瓶中作为对照，分别加入1 mL

7、 2 mol/L H2 SO4， 3 g (NH4 )2 S2 O8，微沸约1 h，补加蒸馏水使体积为2550 mL (如锥型瓶壁上 有白色凝聚物，应用蒸馏水将其冲入溶液中)，再加热数分钟。冷却后，加一滴 酚酞，并用6 mol/L NaOH将溶液中和至微红色。再滴加2 mol/L HCl使粉红色恰 好褪去，转入100 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，移取25 mL至50 mL比色管 中，加1 mL混合试剂，摇匀后，放置10 min，加水稀释至刻度再摇匀，放置10 min，以试剂空白作参比，用1cm比色皿，于波长880 nm处测定吸光度(若分 光光度计不能测定880 nm处的吸光度，可选择710 nm波长)。五、数据处理1、总磷的测定由标准曲线查