CYP1A12A基因多态性与宁夏汉族乳腺癌遗传易感性研究

1、CYP1A1*2A基因多态性与宁夏汉族乳腺癌遗传易感性研究郭卫东，饶宁莲，刘春莲，赵巍，霍正浩，彭亮，陈银涛，焦海燕【摘要】目的阐发宁夏汉族YP1A1*2A基因多态性与乳腺癌遗传易感性的干系。要领应用聚合酶链反响限定性片断长度多态性PR-RFLP技能别离对144例乳腺癌患者和154例比拟的YP1A1*2A基因多态性举行测定，阐发两组基因型及等位基因频率的漫衍特点。效果YP1A1*2A等位基因T、在乳腺癌组和比拟组漫衍的差异无明显性(P0.05)，此中等位基因的乳腺癌发病风险比值比R为1.34(95%I：0.971.86)。YP1A1*2A各基因型漫衍两组间差异也无明显性(P0.05)，杂合子突

2、变T、纯合子突变别离与野生型TT比拟，乳腺癌发病风险R别离为1.32(95%I：0.802.18)和1.86(95%I：0.923.78)。结论YP1A1*2A基因多态性其突变纯合子和杂合子有增长乳腺癌风险的趋势，但未到达明显程度。YP1A1*2A基因多态性大概与宁夏汉族人群乳腺癌的发病有干系。【关键词】乳腺肿瘤StudyfYP1A1*2AGenePlyrphisandSuseptibilitytBreastanerintheHanNatinalityinNingxiaAbstrat:PurpseTinvestigatetheassiatinbeteenYP1A1*2Ageneplyrphis

3、anditssuseptibilitytbreastanerintheHannatinalityinNingxia.ethdsYP1A1*2Ageneplyrphisin144asesithbreastanerand154ntrlseredetetedbyPR-RFLP.Thefrequeniesfgentypeandalleleereanalyzed.ResultsThefrequeniesfalleleTandshednsignifiantdifferenebeteenthetgrups(P0.05).Theddsrati(R)fbreastaneriththealleleas1.34(9

4、5%I:0.971.86).ThereasnsignifiantdiffereneinthegentypeTT,T,beteenthetgrups(P0.05)t.paredtildtypeTT,theRfbreastanerithgentypesfheterzygteTandhzygteere1.32(95%I:0.802.18)and1.86(95%I:0.923.78),respetively.nlusinItispssiblethattheYP1A1*2AgeneplyrphisislinkedithbreastanerintheHannatinalityinNingxia.Hzygt

5、eandheterzygteightinreaseriskfrbreastaner,butithutsignifiantbeteenbreastanerandntrls.Keyrds:breastneplass;ythreP4501A1*2A;geneplyrphis;Ningxia;Hanppulatin如今已确认的乳腺癌伤害因素只能说明30%40%的发病缘故原由1。除家属性乳腺癌重要与BRA1、BRA2有关外，散发性乳腺癌的产生大概与环境致癌物的代谢有关。个别之间的患癌差异性被称为肿瘤遗传易感性。研究表白相与相代谢酶基因多态性与个别肿瘤易感性差异有关。YP1A1是体内紧张的相代谢解毒酶之一

6、，能代谢活化多种环境致癌物或致突变物2，外洋报道表现其遗传多态性与乳腺癌的易感性有关3。本研究对144例乳腺癌患者和154例比拟的细胞色素P4501A1YP1A1基因3端*2A多态性的阐发，探究YP1A1*2A基因多态性与宁夏汉族乳腺癌易感性的相干性。1质料与要领1.1研究工具于2022年5月2022年8月，网络经宁夏医学院第一隶属病院临床病理查抄确诊的女性乳腺癌患者144例，年事2875岁，均匀年事52.27岁；来自该院的康健体检女性比拟者154例，年事3070岁，均匀年事52.69岁。全部研究工具均无乳腺炎等乳腺疾病史、无放射和化学药物治疗史、无自身免疫性疾病史；两组研究工具均为在宁夏地域

7、生存15年以上且无血缘干系的汉族住民。以上研究工具为去除PR扩增失败的样本。1.2实行要领抽取静脉血35l，EDTA抗凝，低渗溶血法分散白细胞,酚、氯仿法提取基因组DNA，并用乙醇沉淀，溶解于保存液(TAE)中(浓度为0.1g/L)，置-4冰箱保存。PR扩增：体系总体积为25l，包罗10pl/l的引物溶液各1.25l，4dNTP(含种种dNTP2.5l/L)溶液2.0l，10Buffer2.0l，25l/Lgl2溶液1l，Tag酶1U购自华美生物工程公司，基因组DNA溶液2.0l，再加去离子水至25l配成反响体系。应用Bi-Rad公司的PE2400PR仪举行基因扩增。反响条件为94预变性5in

8、，循环周期依次为解链9435s，退火6035s，延伸7260s，33个循环周期后72再延伸7in。1%琼脂糖凝胶电泳，查抄聚合酶链反响PR扩增产物，扩增片断巨细为343bp。PR扩增产物置-4冰箱保存待用。酶切与电泳：PR扩增产物10l，sp(Prega)0.5l(10U)，10Buffer2.0l，BSA2.0l，用去离子水补足至20l，37水浴，转摇40转，消化4h。2%琼脂糖凝胶电泳40in。酶切效果经电泳后，于紫外灯下判断其基因型，YP1A1*2A野生型TT表现为343bp一条带；杂合突变型T为343bp、200bp、143bp三条带；纯合突变型为200bp、143bp两条带。另取TT

9、和的PR扩增样本数例送测序，查验基因分型的正确性。1.3统计学处置惩罚接纳SPSS11.5软件对所得数据举行统计阐发。测得的基因型、等位基因频率与Hardy-Einberg平衡的切合程度接纳卡方查验。两组之间等位基因与基因型频率比力用2查验，P0.05为差异有统计学意义。用R和95%I确定YP1A1*2A多态性与乳腺癌发病的相对伤害度。2效果2.1酶切和测序效果经电泳后，于凝胶成像体系拍照记载，以直接计数法别离统计两组各基因型的个数。经聚合酶链反响限定性片断长度多态性PR-RFLP技能挑选出野生型和纯合突变型PR的扩增产物各1例，由北京利嘉生物公司测序，见图1。2.2群体代表性查验两组研究工具

10、YP1A1*2A基因型漫衍，经2查验，P0.05,切合Hardy-Einberg平衡，表白研究工具来自同一群体，具有较好的代表性。2.3YP1A1*2A基因多态性漫衍环境3讨论YP1A1由YP1A1基因编码,该基因位于染色体15q2224，含7个外显子和6个内含子，如今已创造4个紧张的多态性位点。此中等位基因YP1A1*2A，位于YP1A1基因3端非翻译区，由3801T多聚A位点卑劣约264bp突变所引起。除野生型纯合子TT，突变型杂合子T和突变型纯合子均具有sp识别的酶切位点。3种基因型在差异人群中的漫衍表示出较大的差异。在亚洲人群基因型和基因型T频率别离是2%18%和32%55%，而在欧洲

11、和美洲碧眼儿群两种基因型的频率那么别离是05%和9%28%4。环境致癌物如多环芳烃(PAHs)5通过胞浆内芳烃受体(AhR)介导而高度诱导YP1A1表达。前致癌物与受体结合后，AhR与Hsp90解离，在芳烃受体核转运卵白(Ahreeptrnuleartranslatr，ARNT)帮助下进入细胞核内，AhR/ARNT复合物敏捷结合于YP1A1的5区的外源物反响元件(xenvitirespnsiveeleents,XRE)上，通过强有力的转录激活布局域激活YP1A1基因的表达。YP1A1可催化多环芳烃等环境致癌物的羟基化等反响，所形成的亲电子的中心代谢产物可与DNA共价结合,形成DNA与致癌物的加

12、合物,引起癌基因与抑癌基因的突变，启动致癌或诱变历程。本研究效果表现YP1A1*2A多态位点的基因型漫衍和等位基因频率漫衍在乳腺癌组与比拟组之间无明显性差异。但突变等位基因使患乳腺癌的伤害度增长了1.34倍；突变基因型与野生型TT比拟，患乳腺癌的伤害度增长了1.86倍，表白YP1A1*2A多态性与乳腺癌易感性大概有关，突变基因型大概通过上述的机制增长了环境毒素的毒性作用，为乳腺癌产生的缘故原由之一。如今外洋对该基因多态性与乳腺癌的相干性研究较多，但效果不一样等。自从Taili等31995年报道了YP1A1*2A多态位点与美国黑人女性乳腺癌的伤害有明显关联以来，相继有近10项研究报道了该位点与乳

13、腺癌伤害的干系，在早期的研究中倾向于该位点与一些特别人群如黑人女性、绝经妇女的乳腺癌发病关联，R值在29摆布，且有统计学意义，但其时研究样本较小(n200)。20世纪90年代末期美国粹者Bailey6和Ishibe7在两项大型的乳腺癌病例比拟研究中未创造YP1A1*2A与乳腺癌关联。令浩繁学者狐疑的是，厥后在日本大阪8、德国和奥地利9的2项研究以为YP1A1*2A杂合子和纯合子反而对乳腺癌有庇护作用，R为0.60.7摆布，而且有统计学意义。结合本研究效果阐发，提示YP1A1*2A基因多态性其突变纯合子和杂合子有增长乳腺癌风险的趋势，但未到达明显程度。因此YP1A1*2A多态性在散发性乳腺癌产生

14、、生长中的机制另有待进一步研究。只有在普及思量到遗传异质性作用、环境因素影响以及种族群体差异的底子上进一步扩大样本，并结合别的连锁阐发要领，才气真准确定YP1A1基因多态性与乳腺癌产生的内涵接洽。【参考文献】1HendersnI.RiskfatrsfrbreastanerdevelpentJ.aner,1993,71(6Suppl):2127-2140.2reeHK,NtleyL,unshR,etal.etablisftaxifenbyrebinanthuanythrep450enzyes:fratinfthe4-hydrxy,4-hydrxyandN-desethyletablitesand

15、iserizatinftrans-4-hydrxytaxifenJ.DrugetabDisps,2002,30(8):869-874.3TailiE,TrahanJ,henX,etal.AYP1A1restritinfragentlengthplyrphisisassiatedithbreastanerinAfrian-AerianenJ.anerRes,1995,55(17):3757-3758.4assnLF,SharpL,ttnS,etal.ythreP4501A1geneplyrphissandriskfbreastaner:AHuGErevieJ.AJEpideil,2022,161

16、(10):901-915.5AlexandieAK,arhl,arstensenU,etal.YP1A1andGST1plyrphissaffeturinary1-hydrxypyrenelevelsafterPAHexpsureJ.aringenesis,2000,21(4):669-676.6BaileyLR,RdiN,VerrierS,etal.BreastanerandYPIA1,GST1,andGSTT1plyrphiss:evidenefalakfassiatininauasiansandAfrianAeriansJ.anerRes,1998,58(1):65-70.7IshibeN,HankinsnSE,lditzGA,etal.igarettesking,ythreP4501A1plyrphiss,andbreastanerriskintheNursesHealthStudyJ.anerRes,1998,58(4):667-671.8iysh