细菌内毒素检查4.试剂卡片技术

1、试剂卡片技术细菌内毒素检测的创新湛江安度斯生物有限公司2017年5月创新驱动力了解创新的必要过程分析技术(,PAT)指出：精确和可靠的预测反映出对过程的了解过程的了解与风险成反比对过程越了解风险就越低2PAT：Process Analysis Technology质量源于设计 Quality by Design (QbD) “Quality cannot be tested into pharmaceutical products. Rather, it results from a quality oriented process design without specific on-str

2、eam analytical instruments, final product quality is neither predictable nor controllable”.药品的质量不是检测出来的，而是源于质量为导向的流程设计没有专门的在线分析仪器，终产品的质量既不可测也不可控。 阿贾斯 S.侯赛因博士，药品评价和研究中心（CDER）药物科学处副主任，在第十七届国际过程分析化学论坛上提出他的过程分析技术观点。（国际过程分析技术论坛/2003）3过程分析技术与质量源于设计理念如何支持内毒素检测？*内毒素检测的策略应基于：对产品和过程的了解风险管理适当的过程检测为了评估产品污染的相对风险

3、，使用定量检测方法比使用限量检测方法更可取，有利于产品质量趋势追踪及在超过指标并导致产品不合格前识别和纠正偏差。*美国FDA行业指南，热原和内毒素检测：问与答2012年6月 4将创新应用到实践中我们坚信有一个更简单、更好的方法，所以开发了革命性的 Endosafe-PTS Endosafe-PTS 2006年获得FDA认证。仪器需要符合细菌内毒素检查法规、必须操作简单、携带方便有助于满足PAT的要求：可在供试品采集现场获得结果。5Endosafe-PTS 可以节省用户宝贵的时间和金钱。它只需使用传统鲎试验所需供试品用量的1/4。快速、完整和精确，卡片技术使实时内毒素检测成为现实。将创新应用到实

4、践中62017年，Nexgen-PTS 正式登陆中国。在兼具PTS快速、便携、准确等优点的同时，增强了软件功能，增加了网络功能。新一代PTS8触摸屏用户账户供试品数据库USB设备检测报告系统设置电源按钮8新的触摸大屏可以显示更多试验信息；操作更为直观方便；支持戴手套操作。显示反应曲线反应过程中、结束后可查看反应曲线；通过反应曲线走势协助分析供试品干扰9强化试验报告功能试验结果按日期、供试品名、供试品批号、是否通过进行显示可以根据供试品名、供试品批号、日期进行搜索可以多选、保存到USB、打印10用户账户管理可提供三级用户管理管理员（Administrator）经理（Manager）一般用户（Us

5、er）不同等级的用户拥有不同的权限11审计日志具有审计追踪功能；记录试验的进行、参数的修改；审计日志无法停用、删除和修改（满足数据完整性和CFR21 part11要求）12其他功能通过USB接口使用U盘导出试验报告和日志；能使用条码扫描器；通过以太网或无线网络功能传输数据，输出数据到LIMS或输出报告到无线打印机；14快速内毒素检测系统创新实践Endosafe PTSEndosafe MCS Endosafe Nexus14试剂被分装、干燥固定在一次性聚苯乙烯卡片上复核药典的双平行试验设置试剂卡片加样槽鲎试剂显色基质光学池供试品通道（1、3）放大图试剂位置试剂位置试剂位置试剂位置鲎试剂显色基质

6、鲎试剂+内毒素显色基质泵连接泵连接光学池光学池加样槽加样槽供试品阳性通道（2、4）放大图试剂卡片工作原理在厂家完成卡片的标定。每批卡片均使用美国内毒素参考标准品（USP RSE）制作标准曲线；确定2、4通道中添加内毒素的值 (PPC)；将标定结果制作成校准码；用户将试剂批号、校准码输入PTS仪器，软件会分析并建立标准曲线。16试验时，将25L供试品加入4个反应通道的加样孔中，供试品将试剂溶解；仪器采集并获得4条通道的达限时间；软件将获得的达限时间代入标准曲线中，自动计算得到供试品检测值和内毒素回收率，如同传统的动态法鲎试验。试剂卡片工作原理17反应时间添加内毒素浓度183使用PTS键盘输入卡片

7、及供试品信息124PTS工作示意19卡片技术简化细菌内毒素检测用户无需用户制备标准曲线，这是检测误差的主要来源制备供试品阳性对照使用多种配套用品数天的专门培训快速，开始到结束只需约15分钟高度灵活的平台操作简易、快速以及便携，实现实时供试品分析，有助于消除风险放行通过计算机联网，MCS和Nexus等高通量检测仪，可替代中心实验室酶标仪和试管仪20凝胶法试验传统光度法试验PTS试验具有FDA License的卡片：用于产品放行及其他各种内毒素试验用途10-0.1EU/mL5-0.05EU/mL1-0.01EU/mL0.5-0.005EU/mL非FDA卡片：用于产品内控、研发等非放行试验10-0.

8、1EU/mL5-0.05EU/mL1-0.01EU/mL抑制/增强卡片：用于样品干扰初筛试验卡片规格灵活多样 细菌内毒素检测的未来25所有供试品送到QC成品放行过程监控水系统原材料用具研发目前的BET模式关键供试品必须立即检测！怎么办？26QC任务：重检测等待时间：长生产部得到反馈：慢供试品管理（11个步骤）27取样供试品送到数据分析中心填写检测表格录入检测表格检测信息检查供试品送到QC暂存供试品分批供试品送到QC实验室供试品检测通知生产人员结果数据审核签名QC实验室检测的供试品成品放行水系统用具15分钟获得关键供试品检测结果！采样现场检测，结果送到QC实验室过程监控水系统用具研发与PAT看齐

9、的BET模式28QC任务：减轻检测等待时间：短生产部得到反馈：马上供试品数据管理：使用PTS29取样供试品用PTS检测填写检测表格录入检测表格检测信息检查供试品送到QC暂存文件送到数据分析中心供试品检测X供试品送到QC实验室X供试品分批X数据审核签名通知生产人员结果X30期望的未来BET模式采样现场检测，结果送到QA/QC审核：过程监控水系统用具研发供试品在QC实验室检测，结果送到QA/QC审核：成品放行水系统用具供试品数据管理：通过网络和电子化管理的PTS31取样用PTS检测供试品获得结果供试品测试XX供试品分批X在线审核数据签名供试品送到QC暂存X检测信息检查X录入检测表格X填写检测表格X

10、文件送到数据分析中心XX供试品送到QC实验室通知生产人员结果PTS/MCS 应用医药生物制药医疗设备透析诊所核医学化学合成药干细胞研究终产品中间产品洁净室供试品缓冲区清洗验证研发供试品注射用水及原料32Endosafe PTS/MCS供试品干扰验证33样品干扰验证样品干扰验证可分为以下2步：干扰初筛试验干扰验证341：PTS/MCS干扰初筛制备并检测若干个浓度的供试品稀释液介于供试品原液（未经稀释）和MVC或MVD之间利用抑制/增强卡片(PTS220)可同时检测四个浓度用灵敏度足够的卡片确认无干扰浓度或稀释倍数可能的话请留一个安全系数（避免在MVD或接近MVD检测）352：PTS/MCS干扰验

11、证检测三批独立的产品使用所需灵敏度的卡片确保符合所有适用标准验证文件，包括日后放行实验中使用与验证中相同的供试品制备方法的说明36PTS/MCS验证有效性有效的试验为回收率50-200%供试品变异系数25%供试品阳性对照变异系数25%37实验人员/试剂/实验室验证试剂信息检测范围：1-0.01EU/mL添加内毒素：0.17EU/mL38仪器验证仪器信息 制造商/仪器序列号校准有效期便携式检测系统(PTS)EndosafePTS174005. Mar. 2015391. 供试品信息内毒素限值: 3EU/ml产品浓度: 1ml/mlMVD = (3EU/ml x 1ml/ml) / 0.01EU/ml = 300检测浓度: 1/1, 1/10, 1/50, 1/100, 1/200, 1/300干扰初筛试验40干扰初筛试验3. 结果用于验证所选择的稀释倍数 /浓度: 1/20041b. 干扰试验（验证）批次1结果42b. 干扰试验（验证）批次2结果43b. 干扰试验（验证）批次3结果44结果验证标准曲线范围: 1 - 0.01 EU/ml相