尿液胆红素定性试验

1、文件编号：XYJY-OP-LJ-XM-001版本/修订号：2.0/1.0发布日期：2011-08-30西苑医院检验科编制者：实施日期：2011-08-30临检作业指导书审核者：批准者：尿液胆红素定性试验页码：第1页，共4页 PAGE - 4 -（共 NUMPAGES 4页）尿液胆红素定性试验1 检验目的胆红素是血红蛋白分解代谢的中间产物，是胆汁中的主要成份，其代谢产物有尿(粪)胆原等。在正常情况下，肝细胞中生成的结合胆红素，随胆汁排入肠道，转化为无色的胆素原族化合物，故尿液中无胆红素出现。当各种原因造成胆红素产生过多或肝细胞摄取、结合及排泄等过程发生障碍时，均可导致血、尿、粪便中胆红素及其代谢

2、产物(尿胆原等)的改变。因此检验尿液中的胆红素可对胆红素有关疾病的诊断，观察疾病的变化及治疗效果提供参考价值。2 检测原理尿液胆红素定性测定方法主要有干化学法和Harrison法。干化学法测定原理是在强酸介质中，直接胆红素与二氯苯胺重氮盐起偶联反应生成红色的复合物，其反应过程是重氮盐作用胆红素中央使其裂开，再结合形成2分子的偶氮胆红素而呈现颜色变化。Harrison法的实验原理是用氯化钡吸附尿液中胆红素后，将吸附物(钡盐胆红素)与含有三氯化铁及三氯醋酸的Fouchet试剂作用，将胆红素氧化为蓝色的胆青素(chole-cyanin)或绿色的胆绿素(biliverdin)及黄色的胆黄素(chole

3、telin)复合物。3 操作性能Harrison氏法测定尿液胆红素的敏感度较高为0.9mol/L(0.05mg/dl)；尿液胆红素定性试验是一个定性试验，目前还没有其它试验性能指标。4 标本4.1 收集患者清晨新鲜尿液10ml。4.2 标本采集后应立即送到临床检验临检室。4.3 不能及时测定的标本应于2-8冰箱保存。5 容器及添加剂类型一次性洁净的尿杯、尿管。6 设备和试剂6.1 干化学法：罗氏公司的URYSYS 2400尿液分析仪及专用试带。6.2 Harrison法：10%氯化钡溶液3-5滴；三氯化铁试剂：三氯醋酸：25g；三氯化铁：0.9g；蒸馏水：100ml。7 干化学法的校准步骤7.

4、1 URYSYS 2400尿液分析仪每月对仪器进行校准一次。7.2 仪器校准的操作步骤，详见URYSYS 2400尿液分析仪仪器登记文件。8 操作步骤8.1 干化学法操作步骤样本的准备：将编好号的样品放在仪器相应的标本位置；试剂的检查：仪器开机后，检查各种试剂的位置、体积、批号等，确认无误后方可进行测定；操作方法：测定样本项目必须在仪器校准通过的情况下进行，其操作过程操作步骤详见URYSYS 2400尿液分析仪仪器登记文件。8.2 Harrison法操作步骤取尿液约5ml加氯化钡溶液3-5滴，此时出现白色沉淀物，混匀，离心3-5分钟，轻轻将上清液倾弃。将上述混浊尿离心取沉淀物，加入三氯化铁试剂

5、2-3滴，放置片刻呈绿色或绿蓝色反应者为阳性，否则为阴性。9 质量控制干化学法每天操作过程中应使用尿液质控液至少做一次质量控制。请参见URYSYS 2400尿液分析仪仪器登记文件。Harrison法试验操作过程中，每次应做一次正常对照。10 干扰因素尿液中含高浓度维生素C和亚硝酸盐时，抑制偶氮反应，使尿胆红素呈假阴性，当患者接受大剂量氯丙嗪治疗或尿中含有盐酸苯偶氮吡啶的代谢产物时，可呈假阴性。由于胆红素不够稳定，尤其在阳光照射下更易分解，故留尿标本后应及时检查。加氯化钡溶液振荡后如生成沉淀不多，可加入饱和硫酸铵1-2滴，再振荡混合即有足够的沉淀产生。水杨酸盐和阿斯匹林可与Fouchet试剂发生

6、反应，产生假阳性结果。当Fouchet试剂加入过多时，胆红素氧化过度，则生成胆黄素而不显绿色，而误认为假阴性，因此Fouchet试剂只需加入2-3滴。11 计算URYSYS 2400尿液分析系统会自动地计算出结果。12 生物参考值区间健康人尿液胆红素定性试验呈阴性。13 检验结果的可报告区间14 警告危急值（不适用）15 实验室解释正常人尿液中胆红素定性试验为阴性。胆红素定性阳性常见于肝实质性(病毒性、中毒性肝炎)及阻塞性(胆石症以及其他原因引起)黄疸。在肝实质性及阻塞性黄疸时，血液中结合胆红素增高，超过肾阈时，可以从尿中排出。在溶血性黄疸患者，结合胆红素多不增高，尿中无胆红素，本试验一般为阴性。16 异常结果处理尿液胆红素定性试验异常结果需与临床诊断相符合，不符合的结果应复查。17 报告时间与标本保存13.1 尿液胆红素定性试验4小时出结果；病房患者的