冬凌草中总二萜的含量测定

1、冬凌草中总二萜的含量测定【摘要】目的测定冬凌草各部位及不同产地冬凌草叶中总二萜的含量。方法采用紫外分光光度法测定冬凌草提取物中总二萜的含量。结果建立了测定冬凌草中总二萜含量的方法，并对冬凌草不同部位及不同产地冬凌草叶中总二萜含量进展了测定，叶中含量最高，不同产地叶的含量也有差异。结论该方法简便、稳定、可靠，可用于冬凌草提取物中总二萜含量的测定。【关键词】冬凌草;总二萜;紫外分光光度法Abstrat：bjetiveTdeterinethettalditerpenidsfdifferentpartsfRabdsiarubesensanditsleavesfrdifferentlalities.et

2、hdsThententfttalditerpenidsasdeterinedbyultraviletspetrphtetry.ResultsBydeteriningthettalditerpenidsfRabdsiarubesens,thententasdifferentindifferentpartsandhighintheleaves.nlusinThisethdissiple,stableandreliable,andanbeusedtdeterinethettalditerpenidsfRabdsiarubesens.Keyrds：Rabdsiarubesens;Ttalditerpe

3、nids;Ultraviletspetrphtetry冬凌草Rabdsiarubesens(Hesl.)Hara，又名冰凌草，为唇形科香茶菜属多年生草本植物，以地上局部入药，广泛分布于黄河流域及其以南地区，主产于河南太行山区,味甘苦，性微寒，具清热解毒，消炎止痛、健胃活血及抗肿瘤之成效1。冬凌草中的活性成分主要是二萜类26，而冬凌草中的二萜类骨架主要有对映-贝壳杉烷型、对映-6，7-螺断-贝壳杉烷型和对映松香烷型二萜化合物，它们都是具有抗癌活性的化合物7，有相似的分子构造式和发色团，所以二萜类化合物在同一波长处具有相似的紫外吸收特征和一样的吸收系数，而且最大吸收波长都在238n左右。因此以冬凌

4、草甲素为对照品，采用紫外分光光度法测定冬凌草提取物的总二萜含量8，该法简便、稳定、可靠，可作为冬凌草总二萜含量的控制方法。1仪器和材料1.1仪器JasV550紫外/可见分光光度计;梅特勒AL104型分析天平。1.2材料和试剂冬凌草的不同部位(S1-种子，S2-花，S3-茎，S4-叶)，不同产地冬凌草叶由本课题组采摘，分别为S5-济源大峪乡叶，S6-山西绛县叶，S7-济源下冶乡叶;冬凌草甲素对照品由本实验室制备，纯度符合要求;95%乙醇(分析纯)。2方法与结果2.1冬凌草不同部位和不同产地冬凌草叶提取物的制备取经50真空枯燥后S1S7各2g，精细称定，分别置于50l的锥形瓶中，参加15倍量的95

5、%乙醇，密封，在50下浸泡3h，浸泡两次，合并浸泡液，残渣再以10l相应的溶剂洗涤3次，合并滤液滤过，准确计量其体积，密封冷藏，待测。2.2标准品溶液的制备精细称取冬凌草甲素标准品6g，用95%乙醇溶解，定容至50l，即得对照品储藏液;分别量取0.5，1，2，3，4l置于10l容量瓶中用95%乙醇定容至刻度，得浓度分别为6，12，24，36，48gl-1的系列冬凌草甲素标准液。2.3测定波长的选择取浓度为36gl-1冬凌草甲素标准品溶液，以95%乙醇为空白溶媒，在200400n范围内扫描。见图1，确定其最大吸收波长为238n。图1冬凌草甲素标准品溶液200400n扫描图2.4标准曲线的绘制取上

6、述系列浓度标准品溶液，以95%乙醇为空白，在238n处测定吸光度A。以测定的吸收度(A)对溶液浓度()进展回归，得线性方程A=0.0167+0.0107，线性相关系数r=0.9998。测定浓度648gl-1范围内吸光度和浓度呈良好线性关系。转贴于论文联盟.ll.2.5稳定性实验将样品S3每隔1.5h测定1次，连续测定4次，记录吸光度值，计算相对标准偏向。结果见表1。RSD为0.47%，说明供试品溶液在6h内稳定。表1稳定性实验结果2.6精细度实验取样品S3，连续测定5次，记录吸光度值，计算相对标准偏向。结果见表2。RSD为0.07%，说明本方法精细度良好。表2精细度实验结果2.7加样回收率实验

7、精细量取一定量的总二萜含量的冬凌草提取物溶液，参加一定量的冬凌草甲素标准品，按“2.1项下方法制得样品液，测定其吸光度，根据标准曲线计算其含量，用测定量除以实际量，计算得回收率。结果见表3。表3回收率实验结果2.8样品的测定将稀释后的样品溶液经0.45微孔滤膜过滤，分别在238n处测定其吸光度A，按回归方程计算总二萜含量。结果见表4。3讨论不同部位含量测定的样品(S1-种子，S2-花，S3-茎，S4-叶)都来自于济源下冶乡，从样品测定结果可以看出，叶子中的总二萜含量最高，其次是花、茎和种子。叶子分别为S5-济源大峪乡叶、S6-山西绛县叶、S7-济源下冶乡叶，结果显示S5-济源大峪乡叶的总二萜含

8、量最高。表4冬凌草提取物中总二萜的含量由于样品原始浓度较大，直接测定时会超出线性范围，将种子和茎提取液稀释10倍，花提取液稀释50倍，叶提取液稀释200倍，可将其稀释到线性范围内。回收率实验、精细度实验和稳定性实验结果均说明，用紫外分光光度法测定冬凌草总二萜含量，结果标准偏向较小，重现性好，精细度较高，实验条件容易控制，简单方便，是测定冬凌草提取物中总二萜含量的一种容易操作、稳定可靠的方法。【参考文献】1刘净，梁敬钰，谢韬.冬凌草研究进展J.海峡药学，2022，16(2)：1.2韩全斌，梅双喜，姜北，等.冬凌草中的新对映贝壳杉烷二萜化合物J.有机化学，2022，23(3)：270.3刘延泽，侯建军，吴养洁.冬凌草中一新的二萜成分冬凌草辛素J.天然产物研究与开发，1999，12(2)：4.4尹峰，梁敬钰，刘净.冬凌草化学成分的研究J.中国药科大学学报，2022，34(4)：302.5孙汉董，许云龙，姜北.香茶菜属植物二萜化合物.北京：科学出版社，2001：122.6薛健，宋洁，沈彩霞.冬凌草的抗肿瘤作用研究J.时