666DDT检测作业指导书

1、666DDT检测作业指导书1.试剂及其配制1.1硫酸：=1.84g/ml，超纯。1.2无水硫酸钠（Na2SO4）：600灼烧4h以上，冷却后密闭保存，有效期1个月。1.3硫酸钠溶液（20g/l）：将20g无水硫酸钠溶于水中，稀释至1000ml。1.4正己烷（含量大于99%）：于全玻璃磨口回流蒸馏器中每1000ml正己烷加入1g固体氢氧化钠，回流4h。换上分馏柱水浴蒸馏，收集（6669）馏分，弃去前5%和最后10%的馏分。1.5苯：经全玻璃蒸馏器重蒸，收集80%馏分。1.6异辛烷：经全玻璃蒸馏器重蒸。1.7丙酮：经全玻璃蒸馏器重蒸，收集（3839）馏分。1.8色谱担体：Gas Chrom Q,1

2、00目120目（150um120um）。1.9固定液：OV-17,OV-210。1.10 666、DDT各组分标准品：-666、-666、-666、-666、o.p-DDT、p.p-DDE、p.p-DDT、p.p-DDD，色谱纯。1.11 666、DDT各组分标准贮备溶液：分别称取1.00mg-666、-666、-666，4.00mg-666，p.p-DDE、5.00mg p.p-DDD，8.00mg o.p-DDT和10.0mg p.p-DDD于8个10.0ml的量瓶中，用正己烷或异辛烷溶解并稀释至标线，混匀。各标准贮备液的浓度分别为：0.100mg/ml, 0.100mg/ml，0.100

3、mg/ml，0.400mg/ml，0.400mg/ml，0.500mg/ml，0.800mg/ml，1.00mg/ml。1.12 666、DDT各组分混合标准使用溶液：分别准确移取一定体积666、DDT各组分标准贮备液于同一量瓶中用正己烷稀释定容，最终制成混合标准使用液的浓度分别为：-666、0.010ng/ul；-666，0.010ng/ul；-666，0.040ng/ul；-666，0.010ng/ul；p.p-DDE， 0.040ng/ul；o.p-DDT，0.080ng/ul；p.p-DDD，0.050ng/ul；p.p-DDT ，0.100ng/ul。将上述混合标准使用液分装于2ml

4、安瓿瓶（经450灼烧4h以上）中封存，置冰箱内保存。每支安瓿瓶装0.3ml0.5ml标准使用液，临用时启封。2.色谱柱制备a)色谱柱预处理：玻璃柱用盐酸溶液（1+1）浸泡过夜，用水冲净，烘干。注入10%（V/V）二甲基二氯硅烷的甲苯溶液浸泡2h，弃去溶液，用氮气吹干；b）固定相制备：称取0.080G OV-17和0.320g OV-210于100ml圆底烧杯内，用适量丙酮溶解。烧杯与冷凝管联接，置于水浴中回流2h。稍冷后将5g预热过的色谱担体倒入，控制丙酮页面略高于担体，在微沸下回流4h。冷却后自然晾干（不时摇动，以防粘结）；c）色谱柱装柱：将玻璃柱与固定相在120下预热2h，冷却。在柱的一端

5、填上一小块玻璃毛，高度约为5min，并接到真空系统的抽滤瓶。柱的另一端接一小漏斗，在减压下边振荡，边填柱，使固定相填充均匀。填完后取下漏斗，并填上一小块玻璃毛；d）色谱柱老化：将已填好的色谱柱一端接色谱仪注射进样口，另一端放空，依次在150，180，210各老化2h，最后在230老化16h以上；e)连接检测器：将已老化的色谱柱放空端接入检测器，在工作条件下用氮气吹洗8h。注射666、DDT各组分混合标准使用溶液，根据其色谱图检验色谱柱的分离效果，应得到完全分离的8种异构体的色谱峰。3.样品测定a)样品萃取：量取500ml海水样品于锥形分液漏斗中，加入10.0ml正己烷，剧烈振荡2min，静置分

6、层后弃去水层；b）净化：正己烷相用硫酸净化2次，每次5ml，剧烈振荡1min，再用硫酸钠溶液洗涤2次，每次10ml，振荡1min。正己烷相经无水硫酸钠柱脱水。用10ml正己烷分两次洗涤分液漏斗并经脱水柱。最后用5ml正己烷冲洗脱水柱。所有流经脱水住的正己烷均采集在浓缩瓶内；c）浓缩：将浓缩瓶装到K-D浓缩器或蒸发浓缩装置，在8090的水浴中浓缩至3ml5ml。取下浓缩瓶，在常温下用氮气吹拂使溶液体积小于0.5ml，最后用正己烷定容至0.50ml。若不能立即进行色谱测定，将溶液封存在安瓿瓶内，冰箱保存；d）色谱测定：分别抽取相同体积的样品浓缩液和混合标准使用液按选定的气相色谱仪工作条件测量各异构体的峰高hw和ho；e）同时，取10ml正己烷按步骤测定试剂空白hb。4.记录与计算将测得的标准空白和水样的有机氯农药各异构体的数据记入表中，按式计算水样中有机氯农药各异构体的浓度。 666、DDT=co（hw-hb）V/hoV1(27)式中：666、DDT水样中有机氯农药各异构体浓度，单位为纳克每升（ng/l）；co标准使用溶液中该异构体的浓度，单位为纳克每微升（ng/ul）；hw样品提取液相应的异