高效液相色谱法测定消糖灵胶囊中格列本脲的含量

1、高效液相色谱法测定消糖灵胶囊中格列本脲的含量【摘要】目的讨论用高效液相色谱HPL法测定消糖灵胶囊中格列本脲的含量。方法采用HPDS-Hypersil色谱柱(4.6200，5)，柱温：20,流动相为甲醇-0.005l/L磷酸二氢胺pH3.5，7030，流速0.8l/in，检测波长300n。结果格列本脲在0.1412.25g范围内呈较好的线性关系r=0.9999,n=5，平均回收率为99.18%，RSD为1.72%(n=3)。结论高效液相色谱法测定格列本脲简便、快捷、灵敏，可以作为消糖灵胶囊含量的测定方法。【关键词】消糖灵胶囊格列本脲盐酸小檗碱高效液相色谱DeterinatinfGlibenlai

2、deinXiaTangLingapsulesbyHPL1.TheHspitalfYanbianUniversity,Yanji,Jilin133000,hina；2.PharayllegefYanbianUniversity,Yanji,Jilin133000,hinar=0.9999,n=5.Theaveragereveryas99.18%，RSD=1.72%(n=3).nlusinHPLethdhasseadvantages,suhasnvenient,sift,sensitive,sHPLanbeusedasasuitableethdfrdeterinatinfXiaTangLingap

3、sule.KeyrdsXiaTangLingapsule;Glibenlaide;HPL消糖灵胶囊收载于?部颁标准?S3-B-2026，由人参、黄连、黄芪等11味中药加格列本脲组成，具有益气养阴，清热泻火，益肾缩尿的成效，用于治疗糖尿玻方中格列本脲是临床上应用广泛的降糖类合成药物，同时也具有一定的毒性和不良反响，因此很有必要对其含量进展准确的测定。为了进步制剂质量标准，拟采用高效液相色谱法测定格列本脲作为本品的含量测定方法。1仪器与试药惠普HP1100高效液相色谱仪，HP1100色谱工作站；SartriusP225-D型电子天平万分之一，德国SatriUs公司。消糖灵胶囊延边大学药剂学实验室制

4、备，批号：040603，040605，040607，格列本脲对照品，批号040411上海友思生物技术；甲醇色谱纯；水为重蒸水；其他试剂均为分析纯。2方法与结果。2.1色谱条件色谱柱为HPDS-Hypersil(4.6200，5)，柱温为20,流动相为甲醇-0.005l/L磷酸二氢胺pH3.5,70：30，流速为0.8l/in，检测波长为300n。2.2对照品溶液的制备精细称取格列本脲对照品适量，加甲醇制成每毫升含格列本脲225g的溶液，摇匀，作为对照品贮备液。2.3供试品溶液的制备取消糖灵胶囊内容物，研细过80目筛，精细称取0.5g，置50l量瓶中，加甲醇40l，超声处理30in功率250，频

5、率33kHz，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。2.4阴性对照溶液的制备取阴性样品不含格列本脲5g，按“供试品溶液的制备项方法制备，即得阴性对照溶液。2.5系统适用性实验照上述色谱条件，汲取上述3种溶液各10l，分别注入液相色谱仪。得到格列本脲对照品、供试品及阴性对照品的色谱图见图13，供试品在与对照品相应位置上有一一样的色谱峰，阴性对照品在此保存时间附近无干扰。计算格列本脲的理论板数大于5000，别离度大于1.5。2.6线性关系考察分别精细量取对照品贮备液适量配成225，112.5，56.2，28.1，14.1g/l溶液，摇匀，各精细汲取10l进样。按上述色谱条件测定峰面积积分值，以

6、峰面积积分值为纵坐标(y)，以格列本脲进样量g为横坐标(x)，绘制标准曲线，得回归方程：y=446.46x+8.48,r=0.9999，格列本脲在0.1412.25g范围内呈良好的线性关系。2.7检测量以S/N3时的进样量为最低检出量，测得格列本脲最低检出量约10g。2.8精细度实验取同一对照品溶液，重复进样5次，记录峰面积积分值，计算RSD=1.07%，说明本法精细度良好。2.9稳定性实验取同一供试品溶液分别于1，2，4，6，8进样，记录峰面积积分值，计算RSD=1.77%，说明供试品溶液在8h内稳定性良好。2.10重现性实验取同一批样品按“供试品溶液的制备项下方法，制成5份供试品溶液，测定

7、，记录峰面积积分值，计算格列本脲平均含量为1.62g/g，RSD为1.47%，说明本法的重现性良好。2.11加样回收率实验精细称取9份同一批已测知含量的样品，每份约0.5g，分别参加格列本脲对照品适量，按“供试品溶液的制备项下方法，制备供试品溶液，测定，由公式：加样回收率%=测得量样品原有量/参加量100%，计算回收率。结果见表1。表1加样回收率测定结果略2.12样品测定分别取不同批号消糖灵胶囊，按“供试品溶液的制备项方法，制备供试品溶液，按上述色谱条件依法测定。结果见表2。表2样品中格列本脲的含量略3讨论3.1样品前处理方法选择消糖灵胶囊是由多味中药和格列本脲组成的复方制剂，测定干扰大，故对提取方法及提取时间分别进展了考察。结果，在所考察的回流提取法、超声提取法、连续回流提取法三者中，采用本法对有效成分格列本脲的提取效果最优。3.2测定波长的选择经紫外分光光度计扫描，格列本脲在300n波长处有最大吸收，应选择测定波长为300n。3.3流动相的选择1，2曾试验比拟甲醇-0.005l/L磷酸二氢胺pH3.5,6535和甲醇-0.005l/L磷酸二氢胺pH3.5，7030两种流动相，结果，甲醇-0.005l/L磷酸二氢胺pH3.5,7030别离效果较好，保存时间适中，应选择