复方芩柏颗粒剂提取工艺的研究

1、复方芩柏颗粒剂提取工艺的研究【摘要】本文通过对大黄、延胡索的薄层色谱进展比照，及对小檗碱、黄芩甙含量的测定，确定了分提法优于混提法。并采用正交实验法考察了浸泡时间、加水量、加醇量、提取时间、乙醇浓度几个因素，确定了水提与醇提的工艺条件。【关键词】黄芩甙小檗碱分提混提正交实验复方芩柏颗粒剂由黄芩、黄柏、大黄等11味中药组成。临床用于痔疮术后感染，疗效满意。为了将药材中有效成分充分提出，进步制剂的质量，本文对该制剂提取工艺进展了系统的研究。1仪器与试药1.1仪器日本岛津S-930双波长薄层扫描仪，微量进样器10ul上海医用激光仪器厂。uv-1型三用紫外分析仪，X-100超声波清洗器。1.2试药无水

2、乙醇，甲醇，95%乙醇，苯，氯仿，甲酸，冰醋酸，乙酸乙酯，正丁醇等均为分析纯，盐酸小檗碱，黄芩甙卫生部药品生物制品检定所。2提取工艺道路的选择本制剂处方由11味中药组成，其中黄柏、秦艽、玄胡、槟榔均含生物碱，泽泻中有效成分为三萜类化合物，易溶于有机溶剂。而其中大黄、当归、防风、生地、桃仁、黄芩中的有效成分能溶于水。又因大黄、黄芩等中药中的有效成分呈酸性，而生物碱呈碱性，酸与碱易发生反响而沉淀，从而影响其中有效成分的浸出。为此，设计了混提与分提二种工艺道路进展比照。2.1浸膏得率依处方比例称取药材，分别按上述分提与混提工艺制备干浸膏，并求出浸膏得率，结果见表1。表1二种工艺的浸膏得率2.2薄层色

3、谱比照2.2.1延胡索的检识取混提样品粉末3g，分提样品粉末2.6g，各加浓氨水2l，放置密塞15in，加无水乙醇40l，超声提取1h，过滤，滤液蒸干，残渣加氯仿2l溶解，作为供试品溶液。取延胡索药材5g同法制成对照药材溶液，另取延胡索乙素，用氯仿制成每1l含水量0.5g的溶液，作为对照品溶液。汲取上述四种溶液各15ul，点于同一硅胶G薄层板以0.5%-Na为粘合剂上，以石油醚醋酸乙醋21.7为展开剂。展开前先用氨蒸气饱和15in，展开，取出，晾干，喷稀碘化铋钾溶液，结果显示混提样品中几乎不能检出延胡索生物碱成分，而分提样品的生物碱成分的斑点那么十清楚显，见图1。2.2.2大黄的检识取混提样品

4、粉末2g，分提样品粉末1.8g，加甲醇30l，超声提取30in，过滤，滤液蒸干，残渣加15l水溶解，再加盐酸2l，置水浴中加热30in，立即冷却置冰箱中，用乙醚分二次萃取，每次20l，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇2l溶解，作为供试品溶液。另取大黄对照药材1.0g，同法制成对照品药材溶液。取大黄素、大黄酚标准品，加甲醇制成每1l含0.5g的对照品溶液。汲取上述三种溶液各15l及大黄素、大黄酚的标准品溶液3ul点于同一硅胶G薄层板以0.5%-Na为粘合剂上，以石油醚6090-乙酸乙酯-甲酸1551，展开，取出，晾干。在365n紫外灯观察，分提，混提样品的薄层色谱无明显差异，见图2。2.3小檗碱、黄

5、芩甙浸出效率的比拟2.3.1小檗碱含量的测定取分提和混提浸膏粉末约0.5g，精细称定，置25l容量瓶中，加20l无水EtH，浸泡入1h，超声提取1.0h，加无水乙醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。用薄层扫描法测定小檗碱的含量，并计算浸出率，结果见表2。表2小檗碱浸出率2.3.2黄芩甙浸出率的测定取分提、混提样品粉末约0.5g，精细称定，置25l容量瓶中，加50%乙醇20l，浸泡1h，超声1h，加50%乙醇，定容至刻度，摇匀，过滤，滤液作为供试品溶液，用薄层扫描法测定黄芩甙含量，并求出浸出率，结果见表3。表3黄芩甙浸出率转贴于论文联盟.ll.2.4结果分析由薄层色谱比照可知，延胡索以分提效果较佳，

6、因分提所得斑点与单味药材几乎一样，且斑点明晰明显，而混提样品几乎不能检出生物碱成分的斑点，说明生物碱类成分未被浸出。大黄的薄层色谱中，分提与混提未见明显差异。从浸出率比照可知，分提工艺小檗碱的浸出率明显大于混提工艺，但黄芩甙的浸出率分提与混提工艺无明显差异，综合上述分析可以认为分提工艺优于混提工艺。因此，选定分提工艺作为该制剂的提取工艺。3提取工艺条件的优选3.1水提工艺条件的优选3.1.1试验设计采用正交实验法，选定浸泡时间、提取时间、加水量三个因素作为考察对象，以黄芩甙浸出率为评价指标，用L423正交表安排实验，所选因素程度见表4。表4因素程度表3.1.2试验方法取黄芩、大黄、当归、桃仁、

7、生地、防风，按正交试验设计表的安排见表4，进展提取，收取二次提取液，准确浓缩至300l备用。黄芩甙的测定:精细汲取浓缩液5l，置于10l容量瓶中，再精细参加5l无水乙醇，摇匀，静置，取上清液作为供试品溶液，用薄层扫描法测定黄芩甙的含量，并求出黄芩甙浸出率。3.1.3数据处理与结果分析对实验数据进展处理，由直观分析可知，因素对黄芩甙浸出率影响最大，其次为B、A。最正确工艺条件为A1B22，即浸泡0.5h，加水量分别为药材的10、8倍量，煎提二次，提取时间分别为2.0、1.5h。3.2醇提工艺条件的优选3.2.1试验设计采用正交试验法，选定加醇量，乙醇浓度，提取时间三个因素作为考察对象，以小檗碱浸

8、出率为评价指标，用L423正交表安排试验，所选项因素程度见表5。表5因素程度表3.2.2实验方法取黄柏、秦艽、延胡索、泽泻、槟榔按正交试验设计表的安排见表5进展提取，搜集二次提取液，准确浓缩至300l，备用。小檗碱含量的测定:精细汲取上清液10l，浓缩至5l，作为供试品溶液，用薄层扫描法测定小檗碱的含量，并求出小檗碱浸出率见表6。3.2.3数据处理与结果分析对实验数据进展处理见表6，由直观分析可知，因素对小檗碱浸出率影响最大，其次为A、B。最正确工艺条件为A2B12即用95%乙醇为溶媒，浸泡12h，加热回流提取二次，加醇量分别为药材的8、6倍量，提取时间分别为2.0、1.5h。表64小结与讨论4.1芩柏颗粒剂由11味中药组方制剂而成，根据它们各自所含的成分不同，水溶性、醇溶性的不同，以及酸与碱易发生反响而影响有效成分的浸提，从而将它们分成两组，分开进展提龋薄层色谱及小檗碱、黄芩甙浸出率均显示分提优于混提。4.2正交试验结果说明，水提工艺的最正确工艺条件为A