动物生理学血液学实验

1、实验二 血液学实验浙江大学动物生理实验室目的 掌握实验用兔颈动脉采血的方法了解红细胞比容及其测定方法血液凝固的基本过程及影响血凝的一些因素原理 将抗凝血放在特制有刻度的玻璃管(温氏分血管)中，经过离心沉淀，使血细胞与血浆分离。红细胞下沉，彼此压紧而又不改变每个血细胞的正常形态。根据玻璃管刻度的读数，可以计算出红细胞在全血中所占的容积百分比即红细胞比容。 图 温氏分血管血液凝固可分为三个主要步骤:第阶段是凝血因子FX激活成FXa并形成凝血酶原复合物（凝血酶原激活物）第阶段是凝血酶原（Prothrombin，F）激活成为凝血酶（thrombin，Fa）第阶段是纤维蛋白原（FI）转变成纤维蛋白（fi

2、lbrin，FIa）在这三个主要步骤中都需要Ca离子的参与材料及设备 大兔一只，兔手术保定台，烧杯（500ml，50ml），常用手术器械（手术刀、毛剪、手术剪、止血钳），线动脉套管，动脉夹温氏分血管，长颈滴管，5毫升试管，离心机，天平，5ml 注射器试管，试管架，吸管2戊巴比妥钠，3.8柠檬酸钠，肝素，1氯化钙，5草酸钾，液体石蜡，带有开叉橡皮管的玻棒等。 方法及步骤 手术操作 2戊巴比妥钠按1ml/kg的剂量从耳缘静脉注入实验用兔 麻醉后仰卧固定于手术台上（同时准备实验用试管等）剪去颈部术野的被毛，切开皮肤，找出两侧颈动脉将颈动脉剥离2厘米左右，然后在颈动脉下面穿两条线。将一侧颈动脉在远心端

3、用线结扎，再于近心端用动脉夹夹住。结扎处与动脉夹之间最好不少于1.5厘米用眼科剪刀在这段动脉上靠近结扎处14的地方，斜向近心方向剪一小口，将动脉套管插入，用线扎好，以免滑脱，待用（需采集血样时打开动脉夹即可）图 兔颈局部解剖图1喉及气管 2颈总动脉 3迷走神经 4交感神经 5减压神经 6节状神经 7颈前神经节 8喉区神经9主动脉弓 10迷走心神经比容的测定： （1）用配有长注射针的注射器吸取含肝素的抗凝血，然后将注射针插入温氏分血管的底部，缓缓地将滴管内的血液注入分血管内(不得有气泡)，使血液正确地装到刻度10处。（2）离心：将温氏分血管放入离心机中，以每分钟3000转的速度离心30分钟。取出

4、分血管，观察红细胞所占的容积并记录其数值(不包括白细胞和血小板沉积所形成的灰白色薄层)。然后再以3000转速度离心5分钟，如红细胞的容积与上次记录相同，表明红细胞已被压紧，读数即为红细胞的比容(如读数为4. 0，即表示100毫升血液中，红细胞容积占40毫升)。影响血凝的因素影响血凝的物理因素 a 取试管3支，一支管内加少量棉花，一支管内壁涂少许液体石蜡，一支不作任何处理，为对照。 b 将以上三支试管分别加入新鲜血液2毫升，每30秒轻轻地倾斜试管一次，分别记录三支试管的凝血时间。温度对血凝的影响 取试管两支，分别加入新鲜血液2毫升。一管置于常温或37水浴中，一管放在低温或冰箱内，记录两支试管的凝

5、血时间。钙离子对血凝的影响 1取试管3支，一支放入3.8柠檬酸钠3滴，一支加入5草酸钾3滴，一支不作任何处理，为对照(与1共用)。然后，再向各管分别加入1毫升新鲜血液，混合后观察并记录血凝情况。 2将加入柠檬酸钠管和草酸钾管分别再加1CaCl2 12滴后，观察并记录血凝情况。肝素的作用取一支试管放肝素8单位，再加入新鲜血液1毫升，摇匀后，观察其结果。取新鲜血液50毫升，放入烧杯中用带有开叉橡皮管的玻棒搅动，以除去其中的纤维蛋白；将除去纤维蛋白的血液静置之，观察其能否凝固。结果 将上述实验步骤的结果填入下表。序号项目处理结果备注1比容 3000rpm,30min, 3000rpm,5min, 2物理因素对血凝影响 棉花2ml血液 液体石蜡对照与“3”共用3钙离子对血凝的影响 3.8%柠檬酸钠1CaCl2 1ml 血液 5草酸钾4温度对血凝的影响 37 2ml血液 4 5肝素的作用肝素8单位 1ml 血液 与“1”共用6纤维蛋白开叉橡皮管的玻棒搅动分析讨论 蟾蜍实验（一） 1、学习破坏两栖类脑脊髓的方法和神经肌肉标本、神经标本制备的方法。2、测