肝脂平胶囊中芍药苷的提取工艺研究

1、肝脂平胶囊中芍药苷的提取工艺研究【摘要】目的考察肝脂平胶囊中芍药苷的最正确提取工艺。方法通过正交实验，以芍药苷的含量和干膏收率为指标，考察加水量、煎煮时间、煎煮次数对提取效果的影响。结果肝脂平胶囊中芍药苷的最正确提取工艺为加水10倍，煎煮3次，1h/次。结论最正确工艺稳定，提取率高。【关键词】芍药苷高效液相色谱提取工艺正交设计Abstrat:bjetiveTptiizethepreparatinpressfpeniflrininGanzhipingapsules.ethdsTheptiupreparatinpressasinvestigatedbyL934rthgnaldesigniththe

2、peniflrinandtheextratinratefdryintentasindexes.Thehieffatrsinflueningtheextratineffiienysahasthententfthetiesfaddedater，thetiefextratinandtiesfbilingereinvestigated.ResultsTheptiutehnialnditinastadd10tiesauntfater，extrating3tiesandbiling1heahtie.nlusinPeniflrinntentashigh.Theethdisreliable，aurateand

3、easytperate.Keyrds:Peniflrin；HPL；Extratinpress；rthgnaldesign肝脂平胶囊是由姜黄、赤芍等组成的复方制剂，具有疏肝理气、活血化淤、软坚散结、健脾渗湿的成效。方中君药姜黄主要含挥发油和姜黄素类化合物，姜黄素类不溶于水及乙醚，溶于乙醇及冰醋酸；臣药赤芍主要有效成分为芍药苷23H2811，具有较好的抗炎、活血化淤通脉1等成效，具有一定的代表性。海藻的主要有效成分海藻酸钠及海藻多糖也为水溶性成分。所以，赤芍、海藻采取传统的水提工艺。?中国药典?2022年版部2对芍药苷的含量规定不得少于1.8%，经含量测定符合?中国药典?标准。本研究通过正交实验法

4、确定其最正确提取工艺。1器材Agilent1100高效液相色谱仪，G1311A泵，G1316紫外检测器；色谱柱ZrbaxSB-184.6250，5；ettler十万分之一电子分析天平；RE-52AA旋转蒸发器上海亚荣生化仪器厂；超声波清洗器华南超声设备厂；DZF-6020型真空枯燥箱上海精宏实验设备；芍药苷对照品均购自中国药品生物制品检定所；试剂均为分析纯。赤芍等购自武昌区药材公司，姜黄购自广西，经鉴定均为正品。2方法与结果2.1方法赤芍、海藻采取传统的水提工艺，以芍药苷为考察指标，影响提取率较大的因素可能有：加水量、提取次数、提取时间、浸泡时间等。将浸泡时间和吸水量单独考虑，把加水量、提取次

5、数、提取时间设置到正交程度表中，共有3个因素。各设3个程度，其因素程度设置见表1。表1赤芍、海藻水提因素程度略考虑各因素的交互作用，选用L934进展正交实验。按处方比例，取赤芍饮片和海藻9份，每份50g，置1000l圆底烧瓶中用可调温电热套加热回流提取，按表1中各实验号因素程度的要求进展处理，以干膏量和总干膏中芍药苷的含量为考察指标，结果见表24。2.2色谱条件色谱柱为ZrbaxSB-184.6250，5；流动相为甲醇-0.05l/L磷酸二氢钾溶液4065；流速1l/in；检测波长230n；柱温35；灵敏度0.08AUFS。2.3测试溶液的制备2.3.1对照品溶液的配制精细称取经P25减压枯燥

6、器中枯燥36h的芍药苷对照品12.66g于25l容量瓶内，加甲醇20l后超声处理20in使溶解，放至室温，加甲醇定容至刻度。2.3.2药材溶液的制备称取赤芍粗粉0.5g，精细称定，置具塞锥形瓶中，精细参加甲醇25l，称定重量。浸泡4h，超声处理20in，放至室温，再称定重量，用甲醇补足损失的重量，摇匀，滤过，即得。2.3.3供试品溶液的制备取赤芍和海藻提取的干膏适量，精细称定，置25l容量瓶内，精细参加甲醇20l后超声20in使溶解，放至室温，加甲醇定容至刻度。进样前均用0.45微孔滤膜过滤。2.4标准曲线的制备用微量进样器分别取已配好的对照品溶液3，4，5，6，7，8l注入高效液相色谱仪，测

7、定峰面积，根据进样量和测得的峰面积计算标准曲线附HPL图13。经计算得回归方程：Y=1990.2X698.1r=0.99999，n=6。这一结果显示芍药苷的进样量与峰面积在1.5194.051g范围内具有良好的线性关系。2.5稳定性实验汲取供试品溶液，用20l定量环间隔一定时间2h进样，连续测定5次。实验结果说明，芍药苷在8h内根本稳定，记录各峰面积，RSD=2.04%。2.6精细度实验用20l定量环进芍药苷对照品溶液，按上述色谱条件，重复进样5次，测定峰面积并计算其相对标准偏向，RSD=0.97%，结果说明精细度较好。2.7回收率实验采用加样回收法，取适量样品，参加芍药苷适量，按上述色谱条件

8、测定，计算回收率。平均回收率为99.15%，RSD=2.53%。结果说明，本方法具有良好的回收率。2.8结果统计与分析结果统计见表24。从方差分析表和正交试验结果可以看到，三因素中，对干膏量的影响大小依次为BA，且321；B3B2B1；A3A2A1，其中仅因素对干膏量有显著影响F=72.1055。三因素对干膏中芍药苷总量的影响大小依次为BA，且321；B2B3B1；A3A2A1，其中仅因素对芍药苷总量有显著影响F=104.67。应选定A、因素的程度为A3、3，对于B因素，在给定的程度条件下，虽无显著影响，但从节省能源、有效成分尽量提取充分的角度考虑，拟选定B因素的程度为B2。因此，从实际出发，

9、综合考虑，选择的最正确提取工艺为A3B23。即10倍水，煎煮3次，1h/次。表2赤芍、海藻水提正交实验安排及结果略表3干膏量的方差分析略表4芍药苷含量的方差分析略2.9验证实验按最正确工艺验证4批，所得药液同前法处理，测定，取4批的平均值，得干膏量12.7901g，芍药苷总量为0.6930g，有效成分的转移率为80.10%。其干膏收率、干浸膏中芍药苷的含量根本稳定，说明工艺较稳定。3讨论3.1赤芍、海藻药材的吸水量实验按处方比例，称取赤芍和海藻混合生药10g加水浸泡过夜，倒出水液，药渣放于滤纸上至滤纸不出现明显水迹时称重，得22.4g，即10g赤芍和海藻生药吸水12.4g，吸水率为124%。3.2赤芍、海藻生药浸泡时间实验取10g生药浸泡30in后，赤芍药材饮片外周已润但中心未透，继续观察1h左右润透。3.3加水量、煎煮次数的验证因为正交结果加水量、煎煮次数均为最大值，为了考察正交设计的严密性，将药渣再行提取1次，第4次的转移率为1.4