各种缓冲液的配制方法-

1、各种缓冲液的配制方法Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液Na2HPO4。2H2O，分子量=178.05 0.2mol/L溶液含35.61g/L柠檬酸. H2O，分子量=210.14 0.1mol/L溶液含21.01g/L柠檬酸. H2O，分子量=210.14 0.1mol/L溶液含21.01g/L柠檬酸钠. 2H2O，分子量=294.12；0.1mol/L溶液含29.4 g/LNaAC.3 H2O盐,分子量=136.09盐0.2m盐ol/L溶液含27.22盐g/L（1）醋酸盐溶液的盐配制：醋酸醋酸钠缓冲液圆(pH3.6)圆取醋酸钠5.1g,加冰醋圆酸20ml，再加水稀释至圆250ml,即得。 酗 醋

2、酸醋酗酸钠缓冲液(pH3.7)酗 取无水醋酸钠20幼g,加水300ml溶解后幼，加溴酚蓝指示液1ml及幼冰醋酸6080ml，至幼溶液从蓝色转变为纯绿色，幼再加水稀释至1000ml幼，即得。 醋酸醋酸钠缓职冲液(pH3.8)体取2mol/L醋酸钠溶体液13ml与2mol/L泪醋酸溶液87ml,加每1泪ml含铜1mg的硫酸铜溶泪液0.5ml,再加水稀释泪至1000ml，即得。醋泪酸醋酸钠缓冲液(pH4呸.5)取醋呸酸钠18g,加冰醋酸9.呸8ml,再加水稀释至10呸00ml,即得。 呸醋酸醋酸钠缓冲液(p勿H4.6) 勿取醋酸钠5.4g,加水勿50ml使溶解，用冰醋酸勿调节pH值至4.6，再加悯水

3、稀释至100ml，即得悯。 醋酸醋酸钠悯缓冲液(pH6.0)螺取醋酸钠54.6螺g，加1mol/L醋酸溶螺液20ml溶解后，加水稀螺释至500ml，即得。用螺醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶螺液的PH=PKa+lg乔C(NaAc)/C(HA乔c)（在此，C(HAc乔)指醋酸的浓度，C(Na乔Ac)指醋酸钠的浓度,K乔a是醋酸的解离常数=1.乔8*10-5（1.8乘1乔0的-5次方），PKa=夕-lgKa=4.75，将夕PH=5.5代入，可得C夕(NaAc)/C(HAc夕)=5.6通常我们配制夕时会使C(HAc)=0.夕1mol/L，或是C(H夕Ac)=0.2mol/L夕等。若是配制C(HAc)斡=0.

4、1mol/L，则C斡(NaAc)=0.56m斡ol/L称量醋酸钠固体斡质量为82*0.56=4斡6克 量取冰醋酸体积为0斡.1*1000/17.5斡=5.7mL。 将称好的妹醋酸钠和量好的冰醋酸加入妹1000mL水中溶解、搅妹拌均匀即可。 当然若想配妹制其它的浓度，也可照公式妹计算即可，通常缓冲溶液不妹能配的太稀，否则缓冲能力妹要下降，太浓的话又浪费试妹剂。0.2mol/L苯二妹甲酸氢钾溶液：称取在硫酸淆干燥器中干燥过24小时的淆苯二甲酸氢钾20.44g淆溶于水中，稀释至500m淆l。Na2HPO4 .2淆 H2O ,分子量=17淆8.05，0.郁2mol/L溶液含35.郁61g/LNaH2P

5、O4郁 . 2 H2O ,分子郁量=156.03，郁0.2mol/L溶液含郁31.21g/LNaH2蛰PO4 . H2O,分子蛰量=138.03，蛰0.2mol/L溶蛰液含27.6g/LNa2蛰HPO4 .12 H2O眩,分子量=358.22眩，0.2mol/L眩溶液含71.64g/L磷眩酸盐缓冲液（PBS）配制眩方法0.01M PBS 135 mM2.7 mM1.5 mM8 mM眩PBS (NaCl,淹 KCl, KH2PO淹4, andK2HP淹O4，pH 7.2)PB淹S缓冲液（pH7.27淹.4）：NaCl 137淹mmol/L，KCl 2淹.7mmol/L，Na2运HPO4 4.3m

6、mol运/L，KH2PO4 1运.4mmol/L7.9g0.2g0.24g1.44g1.8g1 L4称Na运Cl， KCl，KH2运PO4(orNa2H运PO4)和K2HPO4影，溶于800 ml 蒸馏影水中，用HCl调节溶液的影pH值至7.4，最后加蒸影馏水定容至。保存于冰箱中影即可。0.01 M需要注意的是，通常影所说的浓度 指的是缓冲溶院液中所有的磷酸根浓度，而院非Na 离子或K 离子的院浓度，Na 离子和K 离院子只是用来调节渗透压的。院母液的配制： 0.2M71.6gNa2H择PO4：称取 Na2H择PO4-12H2O，溶于裔 1000ml 水0.2M31.2gNa裔H2PO4：称取

7、 Na裔H2PO4-2H2O，溶裔于1000ml 水各种浓裔度PB(pH=7.4)的裔配制：0.2M先配 PB (p憎H=7.4，100ml)憎：取19ml 0.2mo憎l/L的NaH2PO4憎，81ml 0.2mo憎l/L的Na2HPO憎4,即可。0.2M然后 只需将需PB (pH=7.4)需按相应比例适当稀释 即可需，如：0.1M0.2M PB（PH=7.需4） ：取500ml需 PB，加水稀释至10需00ml即可。0.01M0.2MPB皱（PH=7.4）：取50皱ml PB，加水稀释至皱 1000ml 即可。0.02M0.2 M皱PB（PH=7.4）：皱取100ml PB，加皱水稀释至1

8、000ml皱即可。 若需要NaCl贞的话，加入 NaCl 至贞0.9%（g/100ml贞）即可。0.2M另：其它各种另贞PH值的 PB（100贞ml)配方 ：0.2M0.2MpH雨NaH2PO4雨（ml）雨 Na2HPO4（ml雨）5.7 93.5 6.55.8 92 8 5.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 77

9、7.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 90.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.7 0.01M雨雨雨墟墟墟墟墟墟墟墟墟墟墟墟噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎噎蓄蓄蓄蓄蓄蓄蓄蓄蓄蓄蓄蓄夜夜夜夜夜夜夜夜夜夜夜夜樱樱樱樱樱樱樱蝇曳曳曳曳曳曳曳曳曳曳曳油油油油油油油油油油油油盐盐盐盐盐盐盐盐盐盐盐盐咽帐帐帐帐磷酸盐缓冲液（帐PBS）配制方法8g0.2g1.44g0.24g1L4称取N帐aCl、 KCl、Na帐2HPO4和KH2PO渝4,溶于800ml蒸馏水渝中，用HCl调节溶液的p渝H值至7.4，最后加蒸馏渝水定容至即可。在15lb渝f/in

10、2(10341渝05Pa)高压下蒸气灭菌渝（至少20分钟），保存存友于室温或冰箱中。0.01M需要注意墟的是，通常所说的浓度 指墟的是缓冲溶液中所有的磷酸墟根浓度，而非Na 离子或墟K 离子的浓度，Na 离墟子和K 离子只是用来调节墟渗透压的。如果是用于免疫墟组化的话，则需要在配置的以时候分别加入100 u/以ml青霉素和链霉素之后再以调PH、定容、灭菌消毒。以 PH以7.6以7.4以7.2 7以.0H2O眩1000 10眩00 1000眩1000NaC眩l 8.眩5 8.5眩8.5眩8.5Na眩2HPO4 2.2眩2.2询2.2控2.2NaH2PO4控0.1 0.控2 0.3控0.4根控据经

11、验来看，新鲜配置的P控BS搅匀后其PH值约在7控.2-7.4之间，可是在寂温度的影响下，尤其在夏天寂，其电离常数发生了改变，寂在经过昼夜的时间后，PH寂值会明显改变（我亲自测过寂偏酸）。所以做实验的同学寂可要注意了，PH值可能会寂影响实验结果，甚至可能导寂致阴性。所以务必记得这个寂时候和天气，要加强实验条寂件控制问题。每次使用前最逛好用试纸测一下过夜了的P逛BS，如果发生偏酸或偏碱逛，注意重新换新液。 PB逛S缓冲液 8g0.2g3.63g0.24g1L称取NaCl逛，KCl ，Na2HPO逛4?12H2O, KH逛2PO4，溶于900m姑l双蒸水中，用盐酸调pH姑值至7.4，加水定容至，姑常

12、温保存备用。PBST缓姑冲液 取300l Tw姑een-20加入PBS姑100ml中，混匀后即舅刻使用。现用现配。 如果舅是把所有固体加大十倍，配舅置为浓缩液，工作时候十倍舅稀释，那么，在刚配好浓缩舅液时，PH在6.5左右，舅明显偏酸。不能用盐酸调。舅虽然可以用氢氧化钠颗粒调舅，但是有更方便的方法。舅十倍稀释以后，PH自动升伙高到所需要的值。不需要其伙它任何处理。这个可以先取伙少量试一试，配好之后再测伙一次 PH8.0的伙PBS配方详细1. Na伙Cl 137mmol/L伙，KCl 2.7mmol绘/L，Na2HPO4 4绘.3mmol/L，KH绘2PO4 1.4mmol绘/L2. 向烧杯中加

13、入绘约800 ml的去离子水绘，充分搅拌溶解。1 L3. 滴绘加浓盐酸将pH值调节至8乏.0，然后加入去离子水将乏溶液定容至。4. 高温高乏压灭菌后，室温保存。1 mM0.5 mM注意浇：上述PBS Buffe浇r中无二价阳离子，如需要浇，可在配方中补充CaC浇l2和 MgCl2。 0浇.05mol/L PBS鼻(磷酸缓冲液Phosph鼻ate Buffer S鼻olution，PBS)鼻的配制：9.465g7.099g 甲液：0鼻.05mol/L Na2鼻HPO4溶液 ：称取磷酸鼻氢二钠 ,加蒸 馏水至1膊000ml ;9.07g6.803g1000m 乙膊液：0.05mol/L膊KH2P0

14、4溶液: 称取膊磷酸二氢钾, ,加蒸馏膊水至1。 4 将甲乙膊液分装在棕色瓶内，于冰箱揪中保存，用时甲、乙两液各揪按不同比例混合，即可得所揪需pH的缓冲液,见下表:揪pH 甲液ml揪乙液mI 5.29 2.5 97.5 5.59 5.0 95.0 5.91 10.0 90.0 6.24 20.0 80.0 6.47 30.0 70.0 6.64 40.0 60.0 6.81 50.0 50.0 6.98 60.0 40.0 7.17 70.0 30.0 7.38 80.0 20.0 7.73 90.0 10.0 8.04 95.0 5.0 揪揪疽胯胯胯胯胯胯胯胯胯胯胯胯饥饥饥饥饥饥你要配制p饥H=6.8的PBS，可用饥甲、乙液各50ml混合即饥可。硼砂Na2B4O7.创10H2O,分子量=38创1.43,0.05mol创/L溶液=0.2mol/创L硼砂含19.07g/L创硼酸，分子量=61.84创,0.2mol/L溶液含创12.37g/L硼砂易失适去结晶水，必须在带塞