2022年体验制备细胞膜的方法教学设计

1、体验制备细胞膜的方法教学设计背景资料生物膜的争论进展快速；要争论生物膜的组成、结构及功能, 第一必需分别出纯洁的细胞膜；分别得到的哺乳动物的红细胞膜,一般称为“ 血影” ；哺乳动物成熟的红细胞中没有一般真核细胞所具有的细胞核和细胞器,简洁用它制备纯洁的细胞膜；此外,哺乳动物的血液也比较简洁获得,因而是争论细胞膜的抱负材料；从哺乳动物的红细胞中分别细胞膜,第一步是将血液收集在加有抗凝剂的容器内,用低速离心的方法从血液中分别出红细胞,然后用等渗缓冲液反复洗涤,经多次离心,去除血浆；其次步是在红细胞中加入低渗缓冲液,由于低渗溶液的作用,大量水分进入细胞,使红细胞胀破而溶血；第三步是将溶血的红细胞反复

2、而充分地高速离心、洗涤,去除血红蛋白和其他的细胞内含物,最终获得比较纯洁的红细胞膜；1材料 新奇的哺乳动物血液2用具 离心机,离心管,滴管,显微镜,载玻片,盖玻片,吸水纸,小烧杯；3试剂 柠檬酸钠或肝素（抗凝剂）,生理盐水（质量分数为 09%的 NaCl 溶液）,蒸馏水或清水；4操作要点老师在试验前做以下预备工作；预备肯定量的新奇的哺乳动物血液,如羊血或猪血,在冰箱中静置一昼夜；用滴管将上清液吸去；再吸取1 mL 的沉淀物,放入离心管中,加入生理盐水 2 mL ,在 2 000 r/min 条件下离心 5 min ；去除上清液,在沉淀中再加入生理盐水 2 mL,再离心一次,去除上清液,留沉淀备

3、用；以上操作的目的是洗去血浆成分,防止血浆对血细胞的缓冲作用,从而使红细胞的溶血现象更加明显；同学的试验操作如下；（1）取一个 5 mL 的小烧杯,加入生理盐水 23 mL；（2）用滴管在沉淀的下层吸取一小滴血细胞,滴入小烧杯的生理盐水中,以达到稀释红细胞的目的,以免观看时,由于细胞密度太大,影响观看成效；（3）取另一个滴管,在小烧杯中轻轻搅拌,然后吸取少量的血细胞稀释液,在载玻片的中心滴很小的一滴,加盖玻片；（4）先在低倍镜下观看红细胞的正常形状,可见其边缘完整发亮；（5）在盖玻片的一侧加一滴蒸馏水或清水,在另一侧特别当心地用吸水纸渐渐地吸引,防止把红细胞全部吸入吸水纸中而影响观看；边加水边

4、观看,留意红细胞的形状变化；红细胞会随着水流向一侧漂移,观看时留意移动玻片；红细胞体积逐步变大,变得特别鼓胀,在视野中可以找到少数胀破的红细胞,它们已失去完整发亮的边缘,变成弥散状；5需要留意的几个问题（1）制作暂时装片时,红细胞必需稀释,而且取红细胞的量要少；（2）在高倍镜下观看,待观看清楚时,在盖玻片的一侧滴加蒸馏水,同时在另一侧用吸水纸吸引；上述操作均在载物台上进行,并随时调整镜筒高度,连续观看细胞的变化；在盖玻片一侧滴加蒸馏水的量要少,不能让盖玻片处于漂浮状态；同时在另一侧用吸水纸吸引时要当心,不要将血细胞吸走；（3）要想取得好的观看成效,所用显微镜的放大倍数应在 400 倍以上；（4

5、）操作中要仔细观看才能看到连续的变化过程；详细教学步骤1分析试验原理【提问引入】科学家要争论细胞膜,第一要解决的问题,是获得相应的试验材料,比较合适呢？为什么？【请同学争论】；即细胞膜； 用哪种细胞来制备细胞膜依据同学回答的情形,加以归纳总结；科学家发觉,哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核,而且细胞质的结构也比其他真核细胞简洁得多,是制备细胞膜的抱负材料；【进一步提问】怎样才能获得纯洁的细胞膜呢？直接剥离可以吗？有没有间接的方法？依据同学的回答,确定溶血的方法；再进一步提问,如何将细胞膜与细胞其他成分分别开？引导同学明白离心技术的应用；由于细胞膜特别薄,通常要在 5 000 r/min 及 9

6、000 r/min 条件下反复离心多次,才能得到纯洁的细胞膜；由于时间和条件的限制,我们在课上只用显微镜来观看红细胞溶血前后细胞边界的变化,以此来体验细胞膜的存在,并对细胞膜的制备方法有一个初步的体验；2明晰试验步骤让同学争论,设计详细的实施步骤；老师对同学设计的步骤进行补充完善；详细实施步骤参见“ 操作指南” ；关于操作要点和难点,可以提出以下问题引发同学摸索；例如, 在载玻片上滴加的血细胞多些好仍是少些好？在盖玻片另一侧用吸水纸吸引时,要留意什么？如何把握观看溶血后的红细胞的最好时机？老师针对问题,指出操作要点并讲明缘由；3分组试验同学进行分组试验,老师赐予详细的指导和评判；4展现和争论试验结果可以把教材中红细胞溶血前后的照片在投影上展现；依据同学分组试验的情形,老师作讲解；试验反思1本试验中可以考查同学的基本试验技能有：暂时装片的制作,显微镜的使用等；2关于试验结果的评判；假如试验胜利,可以看到近水部分的部分红细胞体积增大,很快会看到红细胞 的边缘变得不清楚,呈弥散状；3影响试验结果的因素可能有以下几个方面；（1）红细胞发生溶血的比例与操作是否得当有关；（2）显微镜使用是否娴熟；（3）是否仔细、连续地观看；教学反思（1）老师在进行试验原理