标准解读

GB 31655-2021食品安全国家标准《哺乳动物体内碱性彗星试验》为评估食品及其成分在哺乳动物体内引起的DNA损伤提供了一套标准化方法。该标准详细规定了试验原理、试验材料、试验步骤、结果判定及数据处理等方面的要求，旨在确保测试结果的准确性和可比性，进而评价食品的安全性。

试验原理：

碱性彗星试验是一种灵敏的生物检测技术，用于检测单个细胞水平上的DNA断裂情况。通过将细胞暴露于电场中，受损的DNA形成彗星状尾巴，其长度和形状反映了DNA损伤的程度。本标准采用哺乳动物（如大鼠、小鼠）作为试验模型，评估食品或食品成分潜在的遗传毒性。

试验材料：

  • 试验动物：需符合特定的健康与年龄条件。
  • 细胞样本：通常取自肝脏、肾脏等靶器官。
  • 试验样品：待检测的食品或食品成分需按一定浓度准备。

试验步骤：

  1. 样品处理：将试验动物暴露于待测样品，确定合适的剂量和暴露时间。
  2. 组织采集：收集指定器官的细胞样本。
  3. 细胞铺片：将细胞均匀铺展于载玻片上。
  4. 细胞裂解与碱性处理：去除蛋白质，使DNA暴露。
  5. 电泳：在电场作用下，受损DNA向阳极迁移形成彗星。
  6. 染色与分析：对形成的彗星进行染色，通过显微镜观察并拍照记录。
  7. 图像分析：利用专业软件测量彗星尾部长度等参数，评估DNA损伤程度。

结果判定与数据处理：

  • 根据彗星尾部的长度和/或其他形态学参数，量化DNA损伤水平。
  • 设定阴性对照组和阳性对照组，用以校验试验的有效性和可靠性。
  • 应对多组数据进行统计分析，判断样品是否引起显著的DNA损伤。

该标准强调了实验操作的规范性和数据分析的严谨性，为食品安全评估提供了科学依据，有助于监管机构、科研单位及生产厂商评估食品的遗传毒性风险，保障公众健康。


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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2021-02-22 颁布
  • 2021-08-22 实施
©正版授权
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文档简介

中华人民共和国国家标准

GB31655—2021

食品安全国家标准

哺乳动物体内碱性彗星试验

2021-02-22发布2021-08-22实施

中华人民共和国国家卫生健康委员会发布

国家市场监督管理总局

GB31655—2021

食品安全国家标准

哺乳动物体内碱性彗星试验

1范围

本标准规定了哺乳动物体内碱性彗星试验的基本试验方法和技术要求

。

本标准适用于评价受试物对哺乳动物组织细胞的损伤作用

DNA。

2术语和定义

21彗星

.

受损片段受到电场作用后产生的拖尾现象在显微图像下形似彗星彗星头是核

DNA,“”。DNA,

彗星尾由在电场中迁移出核的受损片段组成

DNA。

22可评分细胞

.

有清晰轮廓的彗星头尾且未受邻近细胞干扰的细胞

、,。

23刺猬状细胞

.“”

显微图像下由小或模糊不清的头以及大的弥漫性尾组成的细胞

。

24尾部DNA百分比

.

彗星尾部含量相对于总含量头尾之和的比值它反映了损伤的相对程度

DNADNA(、)。DNA,

以百分比表示

。

25关键变量

.

小的改变会对试验结果产生较大影响的试验参数包括取材时间裂解条件电泳时间等关键变

,、、。

量可以是组织特异性的

。

3试验目的和原理

哺乳动物体内碱性彗星试验可用于检测强碱性条件下单链和双链的断裂包括受

(pH≥13)DNA,

试物直接作用引起的链断裂碱性不稳定性位点引起的链断裂和切割修复所引起的

DNA、DNADNA

瞬时链断裂动物通过适当的途径给予受试物在实验终点解剖分离靶组织制备单细胞细

DNA。。,,/

胞核悬浮液嵌入软琼脂并固定在载玻片上除去细胞膜和或核膜后暴露在强碱性条件下使

,/(pH≥13),

解旋并释放游离的环和片段核进行琼脂糖凝胶电泳未损伤的保留在琼脂

DNADNA。DNA。DNA

糖凝胶的原位置形成彗星头部彗头由链断裂造成的损伤片段和游离的环向阳极

(),DNADNA

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