基因工程高考真题无答案

1、基因工程高考真题1.2016全国卷I 某一质粒载体如图所示，外源 DNA插入到 Ampr或Tef中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨节青霉素抗性基 因，Tef表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamHI酶切后, 与用BamH I酶切获得的目的基因混合，加入 DNA连接酶进行连接 反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转 化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基 因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回 答下列问题：启动子(1)质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有 能自我复制，具有标记基因 臂出两点即可)，而作 为基因

2、表达载体，除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子。(2)如果用含有氨节青霉素的培养基进行筛选， 在上述四种大肠杆 菌细胞中，未被转化的和仅含环状目的基因的细胞是不能区分的，其 原因是 二者均不含有氨节青霉素抗性基因，在该培养基上均不生长 并且 含有质粒载体 和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞也是不能区分的，其原因是 二者均含有氨节青霉素抗性基因，在该培养 基上均能生长 在上述筛选的基础上，若要 筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌单菌落，还需使用含 有 四环素的固体培养基。(3)基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其 DNA复制所需的原料来自于受体细胞。2. 2016全国

3、卷田图（a）中的三个 DNA片段上依次表示出了 EcoR I、BamH I和Sau3A I三种限制性内切酶的识别序列与切割位 点，图（b）为某种表达载体的示意图（载体上的EcoR I Sau3Al的切 点是唯一的）。III（；AAT ICWC CT TA AC 一CCT AG G CTAG一 ttt图3 A I发制原点/%终止子w抗生素抗性基因图佝根据基因工程的有关知识，回答下列问题：（1）经BamH I酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被Sau3I酶切后的产物连接，理由是 两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端 （2）若某人利用图（b）所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目 的基因的

4、重组子，如图（c）所示。这三种重组子中，不能在宿主细胞中 表达目的基因产物的有甲和丙,不能表达的原因是 甲中目的基因插入在启动子的上游，丙种目的基因插入在终止子下游，二者 的 目 的 基 因 均 不 能 被 转 录。(3)DNA连接酶是将两个 DNA片段连接起来的酶，常见的有 E coliDNA连接酶 口T4DNA连接酶,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是 T4DNA连接酶。2016天津高考人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值，只 能从人血浆中制备。如图是以基因工程技术获取重组 HSA(rHSA)的 两条途径。(1)为获取HSA基因，首先需采集人的血液，提取 RNA 合成总cDNA,然

5、后以cDNA为模板，使用PCR技术扩增HSA基因。 图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向，请用箭头在方框 内标出另一条引物的位置及扩增方向。(2)启动子通常具有物种及组织特异性，构建在水稻胚乳细胞内特 异表达rHSA的载体，需要选择的启动子是 B(填写字母，单 选)。A.人血细胞启动子B.水稻胚乳细胞启动子C.大肠杆菌启动子D.农杆菌启动子(3)利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中，需添加酚类物质，其 目的是吸引农杆菌向水稻受体细胞，有利于目的基因的成功转化(4)人体合成的初始HSA多肽，需要经过膜系统加工形成正确空 间结构才有活性。与途径II相比，选择途径I获取 rHSA的优势是水稻是

6、真核生物具有月！系统，能对初始 rHSA多肽进行高效加工(5)为证明rHSA 具有医用价值，须确认rHSA 与HSA的生物学功能一致。2016江苏高考下表是几种限制酶识别序列及其切割位点， 图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶 不重复标注。请回答下列问题：限制酶 助加H | Bel Sau3 | Hmd |、44；1识另 I序列及 GGATCC TGATCAGATCAAGCTT切割位点CCTA3GACTAGTCTAGTTCGAAHind IIIEamH I引物甲 mHei 1 c*引物丙引物乙H的基基图2(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用 BclI和 Hin

7、dIII 两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过DNA连接_酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒，需 将其转入处于感受_态的大肠杆菌。(2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌， 应在筛选平板培养基 中添加 四环素，平板上长出的菌落，常用 PCR鉴定，所用的引物组成为图2中 引物甲和丙。(3)若BamH I酶切的DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接， 连接部位的6个碱基对序列为 TGATCCACTAGG ,对于该部位，这 两种酶 都不能(填“都能” “都不能”或“只有一种能” )切 开。(4)若用Sau3A I切图1质粒最多可能获得 7种大小不同的DNA片段。2015江苏高考胰

8、岛素A、B链分别表达法是生产胰岛素的方 法之一。图1是该方法所用的基因表达载体，图 2表示利用大肠杆菌 作为工程菌生产人胰岛素的基本流程(融合蛋白A、B分别表示(3半乳 糖甘酶与胰岛素A、B链融合的蛋白)。请回答下列问题：胰岛素 A或B链编码区抗性基因图1口半乳明代酮编码区(1)图1基因表达载体中没有标注出来的基本结构是 终止子O(2)图1中启动子是 RNA聚合酶 酶识别和结合的部位,有了它才能启动目的基因的表达；氨节青霉素抗性基因的作用是作为标记基因,将含有重组质粒的大肠杆菌筛选出来 (3)构建基因表达载体时必需的工具酶有 限制酶和DNA连 接酶(4)蜂乳糖甘酶与胰岛素 A链或B链融合表达，

9、可将胰岛素肽 链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部，其意义在于 防止胰岛素的 A,B链被大肠杆菌体内的蛋白酶降解 (5)澳化象能切断肽链中甲硫氨酸竣基端的肽键，用澳化富处理相应的融合蛋白能获得完整的 A链或B链，且(3半乳糖甘酶被切成多 个肽段，这是因为 (3-半乳糖甘酶中含多个甲硫氨酸，而胰岛素 A、B链中不含甲硫氨酸(6)根据图2中胰岛素的结构，请推测每个胰岛素分子中所含游离氨基的数量。你的推测结果是 至少2个，理由是W条肽链的一端各有一个游离的氨基，氨基酸R基团中 可 能 还 含 有 游 离 的 氨 基2015全国卷I HIV属于逆转录病毒，是艾滋病的病原体。 回答下列问题：(1)用基因工程方法制备 HIV的某蛋白(目的蛋白)时，可先提取 HIV中的 RNA,以其作为模板，在逆转录酶的作用下合成 cDNA,获取该目的蛋白的基因，构建重组表达载体，随后导入受体细胞。(2)从受体细胞中分离纯化出目的蛋白，该蛋白作为抗原注入机体 后，刺激机体产生的可与此蛋白结合的相应分泌蛋白是 目的蛋 白注入机体后相当于抗原 ，该分泌蛋白可用于检测受试者血清中 的 HIV ,