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文档简介
1、关于血糖的测定及激素对血糖浓度的影响第一张,PPT共十三页,创作于2022年6月一 实验目的掌握GOD-POD法测定血糖的原理及方法。 观察胰岛素,肾上腺素对血糖浓度的影响。了解动物实验的基本知识和兔耳缘静脉取血的方法。第二张,PPT共十三页,创作于2022年6月二 原理(2) 激素对血糖浓度的影响 葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下生成葡萄糖酸,并产生过氧化氢,过氧化氢被过氧化物酶(POD)催化释放初生态氧,氧又对与色原性氧受体4氨基安替比林偶联的酚氧化,并与4氨基安替比林结合生成红色醌类化合物。第三张,PPT共十三页,创作于2022年6月二 原理(2) 显色原理 葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下生成
2、葡萄糖酸,并产生过氧化氢,过氧化氢被过氧化物酶(POD)催化释放初生态氧,氧又对与色原性氧受体4氨基安替比林偶联的酚氧化,并与4氨基安替比林结合生成红色醌类化合物。第四张,PPT共十三页,创作于2022年6月 葡萄糖O2+H2O GOD 葡萄糖酸H2O2 4氨基安替比林酚H2O2 POD 红色醌类化合物 +4H2O 葡萄糖越多,生成的醌类物质就越多,颜色就越深,通过所讲过的比色法,求出它的葡萄糖含量,即血糖浓度。(标准管法)第五张,PPT共十三页,创作于2022年6月三 操作1准备抗凝试管:首先放入试管一小勺抗凝剂(草酸钠)。2分组。称重:Kg,共有四只兔子,两只注射胰岛素,两只注射肾上腺素。
3、兔子抓取方法:一手抓取颈部皮肤,另一只手托臀部,把它放在天平上称重。第六张,PPT共十三页,创作于2022年6月 操作3. 注射前取血:一般多以心脏取血的方式进行。第七张,PPT共十三页,创作于2022年6月 操作4注射激素:抓住兔子,肚皮朝上,在腹部的皮下注射,注意要抓紧兔耳以免被咬住,方法是掂起皮肤,刺入皮下有落空感,然后缓慢注入激素。首先注射胰岛素0.75 mg/kg(注意记录时间)然后注入肾上腺素0.5 mg/kg,并记录时间。5制备无蛋白血虑液:这是注射前的血液,在胰岛素等待一个小时,肾上腺素等待半个小时期间制备注射前无蛋白血虑液。方法:蛋白沉淀剂4ml全血0.2ml混匀,室温放置7
4、分钟后,在漏斗上过滤,这时标记为注射前无蛋白血滤液。第八张,PPT共十三页,创作于2022年6月 操作6注射后再次取血7再制备无蛋白血虑液:标记为注射后8比色:最后我们用标准管法来测定血糖浓度, 按表操作:第九张,PPT共十三页,创作于2022年6月 混匀,置37水浴15分钟调波长为505nm,以空白管调零,分别读取A测A标,根据标准管法求测定管血糖浓度。 加入物(ml) 测定管(注射前) 测定管(注射后) 标准管 空白管去蛋白血滤液 0.5 0.5 处理后的葡萄糖 0.5标准应用液 蛋白沉淀剂 0.5酶酚混合试剂 3 3 3 3第十张,PPT共十三页,创作于2022年6月四 结果与计算C测(mmol/l)= (A测/A标)5 mmol/L (5为葡萄糖标准应用液浓度值) 通过计算比较一下家兔注射前后血糖浓度的变化情况。第十一张,PPT共十三页,创作于2022年6月五 分析 (1) 对家兔而言血糖正常值:2.85.2 mmol/L,验证是否在此范围。 (2) 从实验结果来验证胰岛素
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