甾体激素类药物的基本结构和分析

1、甾体激素类药物的基本结构和分析 第一节 基本结构与分类 一、分类 二、结构分析 甾体激素的基本骨架ABCD1. 肾上腺皮质激素 A2. 雄性激素和蛋白同化激素 3. 孕激素4. 雌激素 A环为苯环，C3位有酚羟基C3位有酚羟基 A环为苯环口服避孕药第二节 鉴别试验 一、化学鉴别法 1. 与强酸的呈色反应 母核反应常用与硫酸的呈色反应 醋酸泼尼松 （2005）【鉴别】（2）取本品约 5mg，加硫酸 1ml使溶解，放置 5分钟，即显橙色；将此溶液倾入 10ml水中，即变成黄色，渐渐变为蓝绿色。2. 官能团的反应 （1）酮基的呈色反应黄体酮 （2005）【鉴别】 取本品约，置小试管中，加异烟肼约1m

2、g与甲醇1ml溶解后，加稀盐酸1滴，即显黄色。（2）C17位 醇酮基的反应 还原性 肾上腺皮质激素+碱性酒石酸铜 Cu2O（红色）醋酸泼尼松 （2005）【鉴别】（1） 取本品约1mg，加乙醇2ml使溶解，加10%氢氧化钠溶液2滴与氯化三苯四氮唑试液1ml，即显红色。醋酸去氧皮质酮 （2005）【鉴别】 （1）取本品约5mg，加乙醇溶解后，加氨制硝酸银试液，即生成黑色沉淀。倍他米松 （2005） 【鉴别】（1）取本品约10mg，加甲醇1ml，微热溶解后，加热的碱性洒石酸铜试液1ml，生成砖红色沉淀。（4）酚羟基的呈色反应（3）甲酮基的呈色反应雌激素重氮苯磺酸红色（5）炔基的沉淀反应白色炔银（6

3、）卤素的反应地塞米松磷酸钠 （2005）【鉴别】（3）本品显有机氟化物的鉴别反应（附录）醋酸酯醋酸 乙酸乙酯（香气）戊酸酯戊酸（臭气）己酸酯己酸（臭气）（7）酯的反应水解产物的反应醋酸地塞米松 （2005） 【鉴别】（2）取本品50mg，加乙醇制氢氧化钾试液2ml，置水浴中加热5分钟，放冷，加硫酸溶液（12）2ml，缓缓煮沸1分钟，即发生乙酸乙酯的香气。己酸羟孕酮 （2000）【鉴别】（2）取本品约50mg，加醇制氢氧化钾试液2ml，置水浴中加热 5分钟，加水3ml，蒸去乙醇，放冷，加硫酸溶液（110）2ml，置水浴中加热，即发生己酸的特臭.（二）制备衍生物测定熔点（四）UV（五）IR（六）T

4、LC（七）HPLC 第三节 特殊杂质检查 一、有关物质（其他甾体）的检查 甾体激素类药物多由其他甾体化合物经结构改造而来，易引入与标示甾体激素药物结构不同、生理活性不同的其他甾体化合物称为“有关物质” ，包括原料、中间体、异构体、降解产物等1. HPLC （2005） 一般采用不加校正因子的主成分自身对照法 2. TLC （2000） 高低浓度对比法二、游离磷酸盐的检查 地塞米松磷酸钠 分光光度法三、有机溶剂残留量的检查 GC 地塞米松磷酸钠检查甲醇和丙酮 以正丙醇为内标物质，规定含丙酮不得过5.0%，且不得出现甲醇峰。四、硒的检查第四节 含量测定 一、HPLC 90%以上的本类药物用此法 反

5、相高效液相色谱法，内标法或外标法定量二、紫外分光光度法 具有43酮基的肾上腺皮质激素、雄性激素和蛋白同化激素、孕激素在240nm附近有最大吸收。 具有苯环的雌激素在280nm附近有最大吸收。 原料、注射剂用一定的溶剂溶解或稀释后直接测定； 片剂用一定的溶剂提取、滤过，取续滤液测定。 若有“其他甾体”的干扰，可用色谱法（柱色谱和薄层色谱）分离后再行紫外法测定（2005） 醋酸泼尼松龙片 取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于醋酸泼尼松龙20mg），置100ml量瓶中，加无水乙醇约60ml，振摇15分钟使醋酸泼尼松龙溶解，加无水乙醇至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置另一10

6、0ml量瓶中，再用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法（附录A），在243nm的波长处测定吸光度，按C23H30O6的吸收系数为370计算，即得。三、四氮唑比色法 1. 原理 皮质激素C17-醇酮基具有还原性，在强碱性溶液中能将四氮唑盐定量地还原为有色的产物。生成的颜色随所用试剂和条件的不同而不同。 2. 常用的四氮唑盐 （1）氯化三苯四氮唑（TTC）即红四氮唑（RT） （2）蓝四氮唑（BT）3. 测定方法 醋酸去氧皮质酮 （2005）【含量测定】取本品适量，精密称定，加无醛乙醇溶解并定量稀释制成每1ml中约含35mg的溶液，精密量取10ml，置25ml量瓶中，加氯化三苯四氮唑试液

7、2ml，在氮气流下，迅速加入氢氧化四甲基铵试液2ml，通氮气后，密塞，摇匀，于30水浴中放置1小时，迅速冷却。用无醛乙醇稀释至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法（附录 A），在485nm的波长处分别测定吸光度；另取醋酸去氧皮质酮对照品适量，精密称定，同法测定，计算，即得。4. 讨论（1）基团的影响（2）溶剂和水分的影响 无醛无水乙醇作溶剂（3）碱的种类及加入顺序的影响 先加四氮唑盐溶液，后加氢氧化四甲基铵溶液（4）空气中氧及光线的影响（5）温度与时间的影响四、异烟肼比色法 1. 原理 具有43酮基的肾上腺皮质激素、雄性激素和蛋白同化激素、孕激素在酸性条件下与羰基试剂异烟肼缩合成异烟腙，在一定波

8、长下具有最大吸收 2. 测定方法倍他米松磷酸钠 （2005）【含量测定】取本品适量（约相当于倍他米松20mg），精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀（必要时过滤），作为供试品溶液；另取倍他米松磷酸钠对照品适量（约相当于倍他米松20mg），精密称定，加甲醇溶解并稀释制成每1ml中约含倍他米松0.4mg的溶液，作为对照品溶液。精密量取供试品溶液和对照品溶液各1ml，分别置25ml量瓶中，各精密加异烟肼溶液（异烟肼75mg，盐酸，加甲醇溶解并稀释至100ml）20ml，摇匀，置60水浴中保温1小时，冷却，加甲醇稀释至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法(附录 A)，在420nm的波长处分别测定吸光度，计算，即得。3. 讨论（1）溶剂的选择 无水甲醇或无水乙醇（2）酸的种类 HCl、H2SO4、HAc均可，且酸与异烟肼的摩尔比为2:1时可获得最大吸收。（3）水分、温度、光线和氧的影响 水分使反应逆转，温度使反应加快，具塞玻管中反应，光线和氧不影响。（4）关于反应专属性 在一定的反应条件下，只有C3-酮基起反应，故本法对4-3-酮甾体具有专属性。五、Kober反应比色法 Kober反应是指雌激素与硫酸-乙醇反应呈色，在515nm附近有最大吸收。可用于雌激素的比色法测定。 复方炔诺孕酮滴丸 （20