建筑工学理学

1、.PAGE ：.；PAGE 25核桃粕发酵饮料预实验2一、顺利完成核桃粕发酵饮料的根本制造流程，发酵后的核桃乳放冰箱中冷藏，为测定目的待用二、经过预实验后工艺过程有所修正核桃粕挑选预处置磨打浆过滤前调配杀菌冷却接种发酵廓清、过滤后调配均质冷却灌装废品操作要点：1.挑选2.预处置：去皮：采用碱液去皮法，在90100，1%的NaOH溶液中烫漂2.53分钟后，立刻冷却，用清水反复漂洗并手工去皮。3.磨打浆：林业楼117搅拌机 之后 生物楼206高剪切乳化机 4.过滤：将磨浆后的浆液用100目的滤布过滤3至4次，进展浆渣分别，即制得核桃乳。5.前调配：白砂糖 7%，添加乳酸菌发酵糖源。6.杀菌：采用巴

2、氏灭菌法，将均质后的核桃乳在水浴锅中6065下灭菌3Omin，备用。7.发酵：杀菌后迅速冷却40左右，接种量3%，发酵温度发酵温度为40,发酵时间为8h,酸度到达778T时终止发酵。8.廓清、过滤：核桃粕中的脂肪含量过多，发酵过后脂肪上浮景象严重，也有未添加稳定剂和未均质的缘由。用廓清方式如何操作的？去除脂肪层，而后再过滤一次9.后调配：黄原胶009%，CMC-Na 009%，单甘酯020%，蔗糖酯010%与核桃乳混合搅拌均匀。10.均质：于20MPa30MPa下高压均质两次。由于实验室没有小型均质机，故不要这一步，可以由生物楼206高剪切乳化机替代。去实验室学习凯氏定氮法测蛋白质含量四、方案

3、确定根本测定目的后，用预实验样品联络测定法方法，以及分析测定数据。实验步骤写得很详细，很好！后面需求检测哪些活性目的，也可以列出来思索一下。 苗苗组 1.完成抗氧化实验剩余的部分，并作数据结果分析。见附录12.设计提取的正交实验见附录23. 完善论文更新内容见附录34. 抗血栓实验结果分析附录1 抗氧化实验数据结果Table 2 The relation of the concentration of Vitamin C/GLA and theratio of scavenging DPPH(Scavenging ratio=(Asample-Ablank)/Ablank*100%)Conce

4、ntration of VC(mg/L)Inhibition ratio(%) Concentration of GLA(mg/L)Inhibition ratio(%)10013.180.10.2220024.2811.4540058.96102.1260072.021003.4580091.3310004.46这几个表中的结果值都需求以mean SE表示。普通统计方法中都会说以下类似的话：Measurements were performed in triplicate 三次或多次and expressed as mean SD或 SE，即 standard deviation 或stan

5、dard error。也就是说，实验要反复严厉地说是多个样本分别检测，而不是同一个样本检测多次，结果值须以平均值规范差或规范误差表示，以表现出统计学意义。SE相对于SD来说更表现出检测手段的结果准确度The standard error of a method of measurement or estimation is the standard deviation of the sampling distribution associated with the estimation method.。Table 3 Hydroxyl radical scavenging activity o

6、f various concentrations(Inhibition ratio=As-Au/Au-Am*100%)Concentration of VC(mg/L)Inhibition ratio(%)Concentration of GLA(mg/L)Inhibition ratio(%)5013.840.0014.7210023.130.016.1920032.900.18.4740049.6719.4580063.68109.93Table 4 lipid peroxidation inhibitory activity of various concentrations(Inhib

7、ition ratio = ( Ac-As/Ac) x100%)Concentration of VC(mg/L)Inhibition ratio(%)Concentration of GLA(mg/L)Inhibition ratio(%)1023.610.0017.465028.360.0115.1310046.050.124.9350068.49136.11100081.731047.67Fig.4 The inhibition of 10mg/L GLA and 100mg/L VC in different situations附录2 单要素实验初筛结果物料比 (w/v)gla/DB

8、 (wt %)1:80.621:100.651:120.691:150.701:180.72提取时间 (min)gla/DB (wt %)溶料比 (w/v)300.651:12600.631:12900.691:121200.701:121500.721:12提取温度 ()gla/DB (wt %)物料比 (w/v)提取时间 (min)300.231:1290400.331:1290500.371:1290600.671:1290700.831:1290800.451:1290正交设计实验方案3要素3程度程度要素提取料溶比提取时间min提取温度ABC11:10606021:12907031:1

9、512080料液比的间隔不能取成一样吗？利用正交表安排实验 4：正交表列数最多可安排的要素数3：要素的程度数9：正交表行数实验次数处置号ABC空GLA提取率%111112122231333421235223162312731328321393321附录3 论文intro部分这一部分改得很好，表达了逻辑思绪。结果和讨论部分类似，按照论述逻辑援用恰当的他人结果或论点来比较、支持本人的结果或论点。详细修正待他们最后论文一致、完善后从头修正。文中的援用及参考文献列表须严厉按照相应杂志要求撰写。-linolenic acid (GLA) is one of the essential polyunsat

10、urated fatty acids (PUFA) in human metabolism and a precursor of prostaglandin E1, which is not synthesized by humans but must be consumed in diet. According to the recent study of Yang-Yi FanYang-Yi Fan et al., 1998. Importance of Dietary Linolenic Acid in Human Health and Nutrition. The Journal of

11、 Nutrition. 128(9), 1411-1414 (1998), dietary GLA increased the content of its elongate products, such as dihomo-linolenic acid (DGLA) and arachidonic (AA), and then converted to one particular type of prostaglandin E1. Such processes are of signification because all these compounds possess many pha

12、rmacological applications. It has been reported that GLA has a special value for reduction of low-density lipoprotein in hyper-cholesterolemic patients by IshikawaIshikawa T, et al., 1989. Effects of gammalinolenic acid on plasma lipoproteins and apolipoproteins. Atherosclerosis 75:95104. in 1989. I

13、t also exhibited antiviral action studied by NaiduNaidu MRC, et al., 1992. Intratumoral gamma-linolenic acid therapy of human gliomas. Prostaglandins Leukot Essent Fatty Acids. 45:1814. qr Ziboh in 1992. Besides, other beneficial medical values such as anti-diabeticsCameron NE, et al., 1996. Compari

14、on of the effects of ascorbyl gamma-linolenic acid and gamma-linolenic acid in the correction of neurovascular deficits in diabetic rats. Diabetologia, 39: 1047-1054. (Cameron, et al., 1996), anti-lipid peroxidationZHAO Peng, et al., 2004. Experimental study on the effect of- linolenic acid in reduc

15、ing blood lipids in animals (in Chinese). China Tropical Medicine. 04(05): 722-728 (ZHAO Peng, et al., 2004), anti-thrombusKernoff, P.B.A., Willis, A. L., Stone, K. J., Davies, J. A. & McNicol, G. P. ,1977. Antithrombotic potential of dihomo-gamma-linolenic acid in man. British Medicine Journal. 2:

16、14411444. (Kernoff, et al., 1977) activities have also been asserted recent years. The traditional sources of GLA are many vegetable seeds such as evening primrose and borage oil. It also found in considerable quantities in algaeDe B.K, et al., 1999. Effect ofnitrogen sources on -linolenic acid accu

17、mulation in Spirulina platensi. Journal of the American Oil Chemists Society.76: 153-156. (De et al., 1999.) and Mucorales fungalGandhi S.R., Weete J.D. 1991. Production of the polyunsaturated fatty acids arachidonic acid and eicosapentaenoic acid by the fungus Pythium ultimum. Journal of Generaland

18、 AppliedMicrobiology, : 1825-1830. (Gandhi et al., 1991). Spirulina platensis (SP) has been well recognized as a healthy food universally for producing large variety of nutritional compositions, such as phycocyanin, vitamins and minerals. Particularly , as the only natural autotroph rich in polyunsa

19、turated fatty acids (Manabe, 1992Manabe E. -linolenic Acid Production by Microalgae. Onoda Kenkyu Hokoku,1992,44(1):15-2l.), the -linolenic acid (GLA) content in SP is up to 8%-25% of total fatty acid (Cohen, 1993Cohen Z. Production and Partial Purification of -linolenic Acid and some Pigmentsfrom i

20、rulina spltensis. Journal of Applied Phycology,1993,5(1):109-115.), which is far more than the traditional sources such as evening primrose, black currant and borage (James, 1995James C Phillips, Yung-sheng Huang. Natural sources and biosynthesis of linolenic acid: An overview(A). The United States

21、of America: AOCS Press,1995:1-6.). Besides, the Spirulina is revealed to be non-toxic and safe by Salazar et al. (1998)Salazar M., et al., 1998. Subchronic toxicity study in mice fed Spirulina. Journal of Ethnopharmacology, 62, 235-241., which contributed to SP to be a valuable source for much sough

22、t after GLA. The current methods of extracting unsaturated fatty acid from alga include organic solvent, supercritical fluid extraction (SCE), urea inclusion and fractional distillation. Supercritical is favored by producing solvent-free extractions; however, the yield of GLA from SP with SCE alone

23、was lower compared to using ethanol as a co-solvent (M.G. Sajilata, 2007M.G. Sajilata, et al., 2007. Supercritical CO2 extration of linoenic acid(GLA) from Spirulina platensis ARM 740 using response surface methodology. Journal of Food Engineering. 84: 321-326). The urea inclusion method is easily t

24、o have urea remaining, which could form a carcinogenic substance named carcinogen ethyl carbamate (Alkio, et al., 2000Alkio M, et al., 2000. Purification of polyunsaturated fatty acids esters from Tuna with supercritical fluid J. Chromatography. Journal of the American Oil Chemists Society. 77(3): 3

25、15-321.). Fractional distillation is new technology supposed to be avoiding the degradation of thermally labile components but demanding highly for the equipment, which is not suitable for industrial production (Chen Fang, et al., 2005Chen Fang, et al., 2005. Effect of Pocess Parameters on the refin

26、ing of higher fatty alcohol extracts during molecular distillation (in Chinese). Transactions of the CSAE. 21(9):189-191.). Thus, to satisfy the increasing need and consumption of -linolenic acid and to improve the exploitation and utilization of SP, optimizing solvent extraction parameters and appl

27、ying to practical production is worthy and urgent. Our present study is aiming at carrying out extraction process of GLA from SP with organic solvent and assessing the effect of parameters such as the sample-solvent ratio, extraction temperature and time. Subsequently optimize the extraction process

28、. Meanwhile, we conduct two studies evaluating the anti-oxidative and the anti-thrombotic activities in order to investigate the bioactivities of -linolenic acid in vitro further more.附录 4 抗血栓结果加分析上图中的结果需求以mean SE表示。下面的讨论参考简介部分意见以及前几次在他们论文中的修正意见，多参考英文文献，比较、分析、讨论讨论：国外学者研讨这是普通中文文章的援用方法，英文论文中防止运用，需客观、平

29、等地援用他人结果或观念，加以论述，GLA可明显抑制体内血小板的凝集和血栓素A2：(TXA2)合成。TXA2：是最剧烈的内源性血小板聚集剂和血管收缩剂，而前列腺素是最剧烈的血管扩张剂这些定性的论述需求有现实和数据加以支持，即讨论中的援用不能仅有泛泛的推论，也就是言之有据。二者都来源于AA，一旦两者失去平衡，TXA2的合成增多，前列腺素生成减少，那么血小板的聚集作用便加强。GLA作为前列腺素的前体，一方面经过直接产生前列腺素抑制血小板的聚集，另一方面经过衍生成DGLA减少AA产生，抑制血小板TXA，合成酶的活性，调整TXA2：和前列腺素的比值以改善心脑血管情况。本实验结果阐明GLA在ADP的诱导下

30、对体外血小板聚集有抑制造用，并且随着GLA浓度的添加，其对血小板聚集的抑制造用更加明显，由上图知。该实验是对GLA抑制体内血小板聚集作用的补充，完善了其抗血栓功能，也为今后的抗凝血研讨提供更丰富的资源。 王菲 小鼠急性毒性实验1、0.1ml0.9ml/只 鸡冠花籽油毒性预实验。雄10只，雌10只，进展标号。日期4月12号13号14号15/16/17号编号雄1雄2雄3雄4雄5雌1雌2一切灌胃鼠灌胃量0.10.20.40.80.90.80.90形状正常正常正常正常正常正常正常正常灌胃当天察看三小时，都正常。小鼠灌胃最大量0.9时，小鼠都正常，那么进展长期毒性实验。2、 0.8ml灌胃量长期毒性实验

31、日期18号19号20号雄8/9/10号0.80.80.8 雌8/9/10号0.80.80.8 新买10只雄0.800 新买10只雌0.800 好的。 张琨 查阅文献：富油微藻的挑选与培育富油微藻光生物反响器1.1 光生物反响器的类型1.1.1 开放式反响器工业级实验室运用的各种封锁式反响器，比开放式反响器具有更好的海藻培育和控制条件。封锁式反响器可以使藻细胞的密度提高6-12倍，总体积相对减少，分别本钱大大降低，各种生长参数及工艺采用自动化、集约化控制和管理，提高了消费效率和产质量量可防止受其它生物和非生物物质的污染。1.1.2 封锁式光生物反响器1.1.2.1 封锁式光生物反响器构造引见光生

32、物反响器生长系统单元，是由相对独立的反响器安装组合而成的培育海藻的根本单元。要在反响器管道内培育海藻必需配有储存适宜海藻生长的各种物质和对海藻各种生长参数进展检测和控制的安装。1.1.2.1.1 营养液储罐系统营养液控制参数主要有H3PO4、CO2、NaOH、氨水、NaHCO3、盐度和导电率等。在储罐需求配制营养液时。控制系统根据已确定的配料参数，控制原料添加安装自动定量添加液料和粉料，同时定量保送水到储罐并启动搅拌安装。1.1.2.1.2 混合藻液储罐系统为了提高富集反响器的效率，当反响器生长单元的海藻密度到达收获密度时。将反响器生长单元中20-30的藻液定量泵入藻液过滤器，过滤器滤掉大部分

33、藻液将过滤后的海藻送入反响器富集单元。由于要将过滤后的藻液送回生长反响器，因此一个海藻生长系统模块需求一个混合藻液储罐。1.1.2.1.3 富集液储罐系统一个富集液储罐向反响器生长系统内的一切反响器富集单元保送配制好的不含氮源的富集液，由于每次向富集反响器参与的富集液为富集反响器总容积的8090。所需富集液数量很大，为减少储罐容积，配制的富集液采用浓缩液，经富集液稀释安装稀释后经过恒压安装保送到各富集反响器。经过控制阀门开启时间，控制保送量。1.1.2.1.4 pH值调理液储罐系统一个pH值调理液储罐向一切生长系统中的混合藻液储罐和反响器保送配制好的pH值调理液。混合藻液储罐、生长反响器和富集

34、反响器对pH调理液输入量的要求是不同的。经过控制pH调理液储罐管道阀门的开启时间控制保送量。1.1.2.1.5 光生物反响器检测、控制系统反响器主要控制参数：pH、PO2、CO2、CO2流通率、密度、藻液传导率、O2、盐度、温度、管道内混合气体压力等。每个生长系统模块为一个控制单元，检测控制系统可对一切模块进展自动检测和控制。就整个消费海藻和藻油萃取系统而言需求检测和控制的参数不多，技术上实现不复杂。1.1.2.2 封锁式光生物反响器的分类1.1.2.2.1 垂直式光生物反响器美国亚利桑那州立大学研制的气升垂直式反响器，由32个丙烯酸制造的圆柱体管子组成每个反响器管柱内径为15.24 cm，高

35、18288 cm。整个安装分为4排，每排有8个反响器管，每个管容积为32 L，反响器总容积超越1000 L。采用这种设计，反响器系统的扩展性是有限的。由于当反响器管柱彼此接近时，管柱产生的投影会相互影响。除反响器管柱相互之间需求有较大的间距以防止“自我阴影外，还需求处理每个管柱的内壁自动清洗问题在技术实施上非常困难，维护上也不方便。目前尚无海藻生物柴油公司采用这种设计。1.1.2.2.2 程度式多层管道光生物反响器添加程度式管道光生物反响器的层数，使单位面积内反响器容积和反响器受光面积分别到达最大，是研讨人员常会思索到的设计方案。如德国Astaxa公司采用程度式多层管道反响器进展海藻培育研讨；

36、以色列Algatech公司在阿拉瓦沙漠建造了管道总长度为150000 km程度式多层反响器进展实验；德国BBI公司建造了有效容积为700 m3，管道总长度为500000 km的程度式多层反响器进展研讨实验。此外，美国的Jacobs大学和德国Salata等多个公司也都研讨过类似的多层管道反响器目前。全球采用封锁式光生物反响器的生物燃料公司，均没有采用小内径多层管道构造的反响器作为消费海藻的安装。1.1.2.2.3 程度式管道光生物反响器户外管道式光生物反响器用玻璃或塑料管建造，被以为是最适宜于进展户外大规模的海藻培育，反响器与泵组合构成培育海藻的循环系统。藻液在反响器内循环流动，使大部分海藻可以

37、有效吸收阳光进展光协作用，光协作用产生的氧气在藻液循环过程中气液分别。美国Diversified公司反响器设计原理和AlgaeLink公司根本一样，采用程度式管道反响器。使反响器受光面积最大。思索到未来技术的开展，管道式光生物反响器培育海藻的效率会大幅度提高，管道内径在20-35 cm较为适宜。1.1.2.2.4 软管式反响器目前。世界上运用软管式反响器消费海藻的公司主要有美国的Solix Biofuels公司、Vertigro process公司、GreenFuel Technology公司、A2BE Carbon Capture公司和德国的Phytolutions公司等。海藻极易附生在反响

38、器内壁上附壁海藻密度添加，光线穿透才干降低，长期运用均存在塑料软管老化破裂问题。因此必需定时改换塑料软管耗费大量的人力和时间，呵斥管理本钱增高。1.1.2.2.5 罐式反响器美国OriginOil公司的罐式反响器，采用沉浸式螺旋式灯管作为光源，罐的内壁和灯管也会产生海藻附壁问题。罐式反响器缺陷：海藻极易附生在灯管壁上，必需定时取出灯管进展清洗；人工光源耗能高；控制系统复杂。1.1.2.2.6 其他几种光生物反响器平板式光生物反响器、浮式薄膜袋光生物反响器、环形管式反响器和螺旋环绕管式反响器等是在实验室和小试中常用的反响器，将这类反响器用于工业化消费，同样存在清洗反响器内壁技术上的难题。1.1.

39、2.2.7 美国宇航局开发出藻类生物反响器用作可继续能源来源美国宇航局(NASA)科学家发明了一种微藻光生物反响器，它可使藻类在城市污水中生长，以消费生物燃料和其他各种产品。该生物反响器是一种用于藻类生长的海上膜附件(OMEGA)，这将不与农田生长的农作物、化肥或新颖水相竞争。OMEGA系统由带有前行运动反浸透膜的大型塑料袋构成，反浸透膜可使废水被处置，微藻藉助新颖水经过光合成作用生长。利用太阳能源，海藻吸收大气中的CO2，以及废水的营养物质而产生生物质和O2。随着藻类的生长，营养物被包含在外壳中，而被净化的新颖水，经过前行运动的反浸透膜被释放到周围的海洋中。美国航天局胜利开发的这项技术将有助

40、于支撑新的藻类基生物燃料工业和废水处置的商业化开发。1.2. 生物反响器消费厂家及其产品1.2.1 新奥科技开展1.2.1.1 光生物反响器该光生物反响器包括缓冲/搜集系统、检测安装、反响区域以及气体交换安装，所述缓冲/搜集系统为锥形底部的透明圆通，衔接两条管路分别用于循环培育和藻体搜集，检测安装从缓冲/搜集系统上部接入；所述反响区域由多根圆形透明光反响管构成，气体交换安装接于反响区域内部。该光生物反响器经过蠕动泵实现培育体系的循环，经过气泵和多个气阀调理各个光反响管的通气量，操作简便、传质效率高，非常适于微藻快速大量培育。1.2.1.2. 微藻培育的光生物反响器一种微藻培育的光生物反响器，包

41、括固定在架子上的光生物反响系统、通气安装、检测安装。光生物反响系统为环形管状，在环形管顶部伸出几个接口，通气安装和检测安装与光生物反响系统顶部接口衔接。经过气体流动调理培育液流动，并且没有死角。该环形管式光生物反响器构造简单、光利用率高，反响条件易控制，适于培育微藻。1.2.1.3 一种光生物反响器一种光生物反响器，包括曝气系统，用于控制所述箱体中培育液的温度的控温系统，反响器控制系统和至少一个反响器单元；其反响器单元包括箱体及其支撑框架；箱体顶部是开放式开口，内腔整体贯穿，至少一个长侧面是透明的，横向相对的两端侧面和底面为圆弧形面；支撑框架成梯形，垂直地面，两支撑框架立柱间固夹箱体。这种光生

42、物反响器有效处理了存在的死角问题，且便于整体收获，从培育到收获的过程中不需求一切培育液的泵出，从而大大降低了过程能耗，实现了延续培育。用本发明的光生物反响器培育小球藻，培育基为：NaNO3 0.25g、K2HPO43H2O 0.075g、MgSO47H2O 0.075g、CaCl22H2O 0.025g，KH2PO4 0.015g、NaCl 0.025g、FeCl36H2O 0.005g，接种量为10%，温度控制在25，曝气气速为1m3/h，延续培育20天，经过进展整体贯穿打捞式收获，不比循环培育液，产量到达18g/(m2d)。1.2.1.4 一种微藻培育方法及其光生物反响器系统一种培育微藻的

43、新式的光生物反响器系统，以及用所述光生物反响器系统培育微藻的方法。在培育微藻的不同阶段用不同的光生物反响器，每一阶段反响器的设计都合理地思索到了该阶段的微藻最正确培育条件，以实现微藻的高密度培育和产品快速积累，从而为微藻的规模化养殖提供新的工艺和安装。对三步培育法和氮胁迫在牟氏角毛藻培育中的运用进展了详尽的引见。1.2.1.5 工业级光生物反响器远程监测控制系统一种工业级光生物反响器远程监测控制系统。该远程监测控制系统包括探测器、在线pH分析仪、在线溶解氧分析仪、在线二氧化碳分析仪等检测分析终端以及远程控制平台，各个检测分析终端经过通讯网络与远程控制平台通讯。所述远程检测控制系统的各检测分析终

44、端安装在工业级光生物反响器内，经过检测分析终端与远程控制平台之间的通讯，在培育环境发生改动时，由远程控制平台对各项理化目的进展远程调理，实现了光生物反响器和远程控制平台之间的双向互动。1.2.2. 上海大祺环保工程1.2.2.1 曝气式光生物反响器及其运用方法涉及微藻培育工程领域，详细地说是一种培育微藻的曝气式光生物反器及其运用方法，包括环状浅水池、进液总管、环状补液管、雾化喷嘴、热水盘管、进气总管、环状进气干管、布气支管、曝气安装，其特征在于曝气安装曝气产生的微小气泡与周围藻液的密度差，促使气泡上浮以及藻液下降，由此环状浅水池内产生无数个气液上下循环流动，使上下层藻液进展混合，而起泡的上浮强

45、化了藻液中溶氧的解吸，氧气被起泡带至液面而释放，并且二氧化碳气体经曝气后也同时溶解在藻液中，为微藻的生长提供碳源。结合开放式与封锁式光生物反响器各自优点，构成一种能以二氧化碳气体为碳源，低本钱、大规模培育微藻的新型封锁式光生物反响器。1.2.3 云南爱尔发生物技术1.2.3.1 一种系统化培育微藻的光生物反响器一种系统化培育微藻的光生物反响器。它包含并联平行管道组、控制阀、pH值传感器、温度传感器、光照传感器、水雾喷淋器、液位报警器、管道泵、冷热交换器等。将管道组、阀门有效闭合衔接在一同，处理了微藻培育过程中体积增大的同时比外表积也可增大，占地面积小，有效利用立体空间，气体交换更充分，利用率添

46、加，在培育过程中温度、pH值、培育液浓度、光照强度等参数能实时调控，给微藻生长代谢提供最正确适宜条件，能有效缩短养殖时间，防止外界敌害生物的危害，降低消费本钱，可用于延续或半延续微藻细胞培育，消费微藻蛋白、生物柴油或水产饵料等产品。1.2.4 英国埃维斯通格列佛提供了用于培育光养微生物的封锁光生物反器的操作方法。光生物反响器包含培育液，部分或完全被水体的水围绕。在培育液与周围的水之间提供密度差，以便控制光生物反响器在水体中的位置。1.2.5 大连汇新海洋科技开展(专利号：ZL022838279)实例：整套设备包括培育器、水处置器、温控系统、CO2充气系统及人工光源等。容积为350 L，采用自然

47、光和人工光(外置)延续照明，光照强度为15008000 Ix，水温1620 。国内外高产油藻种信息根据初步的调查，富油微藻的种类主要是有以下几种：布朗葡萄藻油脂含量高达75%，微绿球藻油脂含量高达68%1，其中颗粒微绿球藻、盐生微绿球藻和海洋微绿球藻的总脂含量分别为(57.57.3)、(60.046.5)和(58.542.2)4，金藻油脂含量45%2，莱茵衣藻油脂含量37.73。参考文献1 CHISTI Y. Biodiesel from microalgaeJ. Biotechnology Advances,2007,25:294-306.2 孙珊. 富油微藻挑选及油脂组分与影响要素研讨D.

48、 田黎: 青岛科技大学,2021.3 薛飞燕，张栩，罗晖，谭天伟. 四种微生物油脂的比较研讨. 会议 全国工业生物技术在资源与能源领域运用开展研讨及成果交流会工业生物技术在资源与能源领域运用开展研讨及成果交流会论文集 4 李秀波，徐旭东，孔任秋. 五种微绿球藻产油和产多不饱和脂肪酸的研讨J. 水生生物学报,2021,34(5):893-897.葡萄藻的培育方法最初的Chul0培育液，在组成和稀释度上，可以同富营养的湖水相比，适宜多种浮游藻类生长，但生长率较慢。至20世纪80年代，用Chu13培育液胜利促进了葡萄藻的生长繁衍。如今改良Chu13(medified Chu13)培育基是葡萄藻培育的

49、常用培育基。 1葡萄藻培育方法一： 不同无机碳源的摇瓶培育：将Chu13x2培育基分装到3个250 ml三角瓶中，每瓶100 ml，各接入l0 ml藻种液，使培育初期OD680在0.1左右，一瓶用可透过无菌空气的封口膜包扎；一瓶通入含1()CO2的加富空气，通气量为 20 ml/min；另一瓶培育基中参与200 mg/L NaHCO3，用封口膜包扎。3瓶均置于HZQ-QG旋转式摇床进展培育，培育条件为：温度25，光强2.5 mW/cm2继续光照)，转速120 /min。培育过程中定期取样测定细胞生长和光合活性。2葡萄藻培育方法二：选定的培育基为ChulO，Chul3，Chul32，Chul32

50、+200mgL的NaHC03。在4个500 ml三角瓶中，分别装入上述培育基160ml，各接入40 ml预培育藻种，使培育初期0D680在025左右，用灭菌后的纱布包扎瓶口，置于往复式摇床进展培育。培育条件为：光强为3000LUX(24h继续光照)，温度25，转速120 rmin。培育过程中定期取样，测定细胞生长和生物量，在第22d测烃含量。3葡萄藻培育方法比较结果： 研讨了布朗葡萄藻(Botryococcus braunii) 764株和765株在3种培育基Chu10、Chu132和SE中的生长效应。结果阐明：(1)B.braunii 764在Chu10中的细胞密度、生物量、总脂含量和总烃含

51、量均高于Chu132和SE；B.braunii 765在Chu10中的细胞密度、生物量和总脂含量高于Chu132和SE，而总烃含量在Chu132中较高。(2) B.braunii 764 的总脂和总烃含量分别为19.4、23.4，显著高于B.braunii 765。4几种葡萄藻培育基的配方：1、CHU13 Modified CHU13 Medium, one liter 3Compoundmg/LKNO3 400K2HPO4 80CaCl2 2H2O 107MgSO4 7H2O 200Ferric Citrate 柠檬酸铁20Citric acid 柠檬酸100CoCl2 0.02H3BO3

52、5.72MnCl2 4H2O 3.62ZnSO4 7H2O 0.44CuSO4 5H2O 0.16Na2MoO4 0.072 N H2SO4 0.0841 drop2、Chus #10 Medium ModifiedCa(NO3)24H2O0.232 gK2HPO40.01 gMgSO47H2O0.025 gNa2CO30.02 gNa2SiO35H2O0.044 gFerric citrate3.5 mgCitric acid3.5 mgAgar15.0 gMetal Solution1.0 mlDistilled water1.0 LMetal Solution:H3BO32.4 gMnC

53、l24H2O1.4 gZnCl20.4 gCoCl26H2O0.02 gCuCl22H2O0.1 mgDistilled water to1.0 L3、Chus #10 Medium ATCC Medium 341Ca(NO3)24H2O0.232 gK2HPO40.01 gMgSO47H2O0.025 gNa2CO30.02 gNa2SiO35H2O0.044 gFerric citrate3.5 mgCitric acid3.5 mgAgar15.0 gDistilled water1.0 L参考文献1 马梅王，朋云. 布朗葡萄藻培育方面的研讨概略J. 现代农业科技，2021，15：35-

54、38.2 王军，杨素玲，丛威等营养条件对产烃葡萄藻生长的影响J. 过程工程学报，2003，3(2)：141-1453 谢仁荣. 丛粒藻的摇床培育和固定化尝试D. 庄惠如：福建师范大学.4 胡章喜，徐宁，李爱芬等.布朗葡萄藻在不同培育基中的生长效应J.生态科学，2007，,26(4):332-336.小球藻的培育方法培育方法一1：watanabe培育基的根本成分：KH2PO4 1.25 g/L，MgSO47H2O 1.25 g/L，Fe2SO47H2O 20mg/L，A5微量元素液 1 mg/L。在氮源充足的培育条件下，根据实验设计往watanabe 培育基中参与适量浓度的葡萄糖和KNO3，在氮

55、源缺失培育条件下，根据实验设计只改动培育基中的KNO3含量。培育方法：在进展高压灭菌前，将pH值调到6.0，并在120下灭菌20min。在超净台上将种子液接种于新颖培育液中，于(231) 、4000 lx、150 r/min的条件下进展摇瓶培育。将C.pyrenoidosa在以上优化的watanabe培育基中培育，其营养成分为：KNO3， 1.50g/L、KH2PO4 1.25 g/L、MgS047H20 1.25g/L、FeS047H20 20mg/L、A5微量元素液 1 mg/L、葡萄糖 20g/L。培育方法：在(231) 、4000 lx、150 r/min的培育条件下进展培育。培育方法

56、二2：保种培育基: 采用f/2 液体培育基。根本成分：Na2EDTA 4.16gFeCl36H2O 3.15gCuS045H20 0.01gZnS047H20 0.022gCoCl26H2O 0.01gMnCl24H2O 0.18gNa2MoO42H2O 0.006g维生素混合：VB12 0.0005gVB1 0.1g生物素 0.0005g每升水：NaNO3:0.075g,NaH2PO42H2O:0.00565g,根本成分1.0ml，维生素混合：1.0ml，用1MNaOH或HCl调理pH8.0，高压蒸汽灭菌15min。摇瓶培育基: 采用f/2液体培育基。实验培育基: 海盐,KH2PO4, Na

57、2EDTA, KNO3, FeSO47H2O。培育方法：摇瓶培育: 将对数期藻种细胞接种到250 ml三角瓶, 接种量为10% (V /V), 150 r/min, 30, 2000 lx下培育。将摇瓶培育对数期藻细胞作为生物反响器培育的藻种。生物反响器培育:培育周期为10天。反响器为本实验室自主设计的气升式生物反响器, 反响器规格有两种: 体积为2 L( 培育液体积为1. 5 L )和体积为10 L( 培育液体积为7. 5 L )；外置光源(日光灯, 光/暗: 12/12h), 供气采用纯CO2 钢瓶与纯N2 钢瓶, CO2 和N2 混合用气体混合器来实现, 通气量为0.3 vvm。整个培育

58、过程在相对密闭的房间中进展, 温度由温度控制器控制。呼应面实验在2 L气升式生物反响器中进展, 产油条件优化后在10 L 气升式生物反响器中放大培育。分析确定了影响产油主要要素的最正确条件为: KNO3浓度0.31g /L, 温度26.5 , CO2 浓度6. 80% , 最高产油量到达0.42 g/L, 比优化前提高了近2倍。优化后, 在10 L气升式生物反响器中进展了扩展培育。培育方法三3：培育基：实验所用的培育基根据BG-11(见表1)培育基进展改良和A5溶液配方(见表2)配制，以上的A5溶液配方的(1)(5)各自定容、灭菌。把A5溶液配方(1)一(5)在无菌条件下倒入500 mL锥形瓶

59、内摇匀，备用C N-1比为412：1，pH值范围为7475之间。培育温度为15，P浓度为0204 mmolL-1，Fe浓度为004 mmolL-1，以自养生长型式培育而培育基成份根据BGll培育基作为根底进展改良改良结果：Na2SO3浓度0.0190g/L，MnCl24H20浓度12.7 mg/L，KNO3浓度0 g/L，MgCl2浓度0.014g/L，此时脂肪比率最高为64.59%。微调pH值至7.4-7.5范围内，初始OD680值为0.20.3接种后写上标签，放入光照培育箱中光照培育。培育温度为(15士1)，每天摇瓶3次培育16 d培育方法四4：最适培育基组成为(g/L)：葡萄糖:20，甘

60、氨酸:0.08，MgS047H2O: 0.4，K2HP04:1.0，FeS047H2O:0.004；适宜的培育温度，初始pH、摇床转速和光照强度分别为28、6.0、130 r/min和650 Lux。在上述优化条件下培育7 d，Chlorella pyrenoidosa NO.2的生物量和油脂含量分别由优化前的3.73 g/L和40.15提高到6.56 g/L和59.90。参考文献1 黄冠华，陈峰，魏东.两步培育法提高蛋白核小球藻的油脂含量J. 华南理工大学学报自然科学版, 2021,36(12):97-1012 郑洪立,高振,黄和.呼应面法优化自养小球藻产生物柴油油脂J 中国生物工程, 20