实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉课件

1、 实验四 白细胞计数、网织红细胞计数及血沉测定目的 1掌握显微镜白细胞计数的方法。 2掌握网织红细胞手工计数的方法。 3血沉测定（示教）。惹杆撕殉翁梧蛰怀堡奥蹭妙沼黔名翅背偶糜痴百学尸锋烯剿考眶漳寞酸屉实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉一、显微镜白细胞计数（临检指导P32） 1. 概述 人外周血白细胞 单核细胞 白细胞 淋巴细胞 中性分叶核粒细胞 粒细胞 中性杆状核粒细胞 嗜酸性粒细胞 嗜碱性粒细胞糜节沈辣写史粤应芝戳捻档酮灵秒隆瀑脆邢倪菜宁苯远笛栗钳赤阔佑擂刷实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉实验四福医大白细胞计数、网织红

2、细胞+计数、血沉一、显微镜白细胞计数2原理 用白细胞计数稀释液（2%冰醋酸加入1%美蓝或结晶紫数滴）0.38ml，将血液（20l）稀释20倍，在破坏成熟红细胞的同时固定白细胞，后充入改良牛鲍计数板，在低倍镜下计数四角4个大方格内的白细胞数，经换算求得每升血液中白细胞数。瓦示沟顾攀沪画飞返塞恐狼纳衡三骨涡好哨左基警遥亢帐酱卞缺汗享赵延实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉一、显微镜白细胞计数 3.操作步骤 （1）加稀释液 ：白细胞稀释液0.38ml（2）稀释血液：末梢采血20l，加入稀释液中混匀（3）溶血 ：混匀后静置，待液体变为棕褐色（4）

3、充池：同红细胞计数 （5）计数：低倍镜下计数四角4个大方格内白细胞总数。 夫浑禹凶贯耸犯盼薄伪丧浚萤疵斜租搭帧拓揩砷掷北帧探硒梧援煤噪躺围实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉洲癌述兔烦墙虱荐增斩裸臣湾滞棒螺碗烫区硫寞池察莱蛇扦韩锥沏进展炯实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉一、显微镜白细胞计数4.计算WBC=N/41020106=N/20109/L5.参考值 成人： （410）109/L 初生儿： （1520）109/L 6月2岁： （1112）109/L塌矫挥嗡冗朋偿走椽恃捆稚枕奶

4、速看磅瑟奄滩啪极担彩淮速细瘦遵镣凹微实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉 6.注意事项 （1）器材：微量吸管及牛鲍计数板的校正（2）标本采集和稀释应准确（3）加盖玻片方式： WHO推荐“推式”法 （4）充液的影响：同红细胞计数 （5）计数原则 一、显微镜白细胞计数壕冶荔倚客蜘婉货通段噪凌哈带斗陡偶杨鄂比桨附恢迎仍网导惩荧涨矽蒋实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉（6）计数室内的细胞分布要均匀：各大方格间细胞 数相差不超过10%，否则应重新重池。（7）调整计数白细胞的数量或稀释倍数:细

5、胞数量过 少，可扩大计数域(计8或9个大方格)或加大取 血量；细胞数量过多，可增加稀释液至0.79ml 或仅加血10l。（8）去除有核红细胞的影响 ： 实际白细胞数/L=100校正前白细胞数/ （100+有核红细胞）抽昭吊赊爷馅剧瘩贸楞襟桐砾租肝森巴幻滥孺绒酝榨田杜悼罕扯梆床怎履实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉 7.方法学评价 显微镜计数法是传统的白细胞计数法，并可用 于校准血细胞分析仪，但其精密度和重复性欠佳。 用于校准血液分析仪时应在严格规范的条件下进行。 而校准的血液分析仪在严格规范的条件下，精密度和 准确性较高。一、显微镜白细

6、胞计数笺潘疤宛辩剁黔逻待稼姆蹈改榨周逝笑爸彼疮恤幽盗隅晒缄慑师羌管尼忧实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉 血液分析仪检测速度快，适合大规模健康人群普查，但需特殊仪器，当某些人为或病理情况（如外周血有核红细胞、巨大血小板和血小板凝集等）可干扰白细胞计数。胚求骆莲凄赤趾睹汞祈浇茵喀局荷彦赣展嘛旧栅钨称虹随昼杰钡戌虑矿旬实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉一、显微镜白细胞计数8.临床意义 白细胞在生理或病理情况下均可有差异。多数与中性粒细胞数量变化一致。崖蒙剪耘檄医乒威腺右篓恐缅裸菌宝岗

7、捂诊岭炎殖捂试拔入准碎嘱肇链帮实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉二、网织红细胞计数（临检指导P26）1.原理 网织红细胞（Ret）是晚幼红细胞脱核后到完全成熟的红细胞间的过渡细胞。其胞质中残存核糖核酸等嗜碱性物质，故经煌焦油蓝/新亚甲蓝染液活体染色后，可见有蓝绿色点状、线状、颗粒状或网状结构，故名网织红细胞。 稠殆摹产订挑床戌馋挑椒蝉正息语聚骗殆慑炳肋肾入书床乓沫鸟未耙攻部实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉二、网织红细胞计数 2.操作步骤（玻片法）（1）加染液：于载玻片的中央滴加

8、煌焦油蓝乙醇溶液，自 然干燥后备用。（2）加血液：取血1滴，滴在染料上，用推片角轻轻将血 滴与染料混匀，然后用另一载玻片垂直盖在此玻片上 （尽量不留气泡），室温下静置1520min。（3）制备涂片。（4）油镜下计数1000个红细胞中的网织红细胞数（一般 连续计数3个视野即可）。喀社础滔账剿忧俄攫灸溶绘熊精谤依婴速蒙乳筐涅著把糕橡搅舵熙瘴寿隆实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉（5）也可用米勒氏窥盘（Miller oculordisc）置入接目镜内 进行计数（如下图）。 具体方法是以窥盘的A区计数红细胞，B区计数网织 红细胞，由于B区的面积

9、为A区的9倍，故计算如下： 网织红细胞（%）=B区网织红细胞数/ A区红细胞数 9 100%通键绸蠢毅眠券划健糟硷瓷煞飞萄温冉芬箩烁吵熟曙官则返盗磅瞩金枢攘实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉斋簿珠瘦歼色毒坞渍鸟荚腹患浦斤瞧蔷以哮僧吩油迢洼翟学惰迸屿编釜枷实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉二、网织红细胞计数 3.计算 网织红细胞分数数=计数的网织红细胞数/1000 网织红细胞绝对数=红细胞数/L网织红细胞分数数 4.参考值 正常成人： 0.5%1.5% 新生儿： 2%6% 成人网织

10、红细胞绝对值： （2484）109/L洽邱椭进肛瓣德象娠岳叮坝寅炎卯撮啃均井陷抉孺脚惹处秧汰颜哎祖丸哩实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉5.注意事项（1）只有活体染色后才能看到网织红细胞，故必须将新鲜 血滴与染液相混合，染液与血液之比一般约为1：1， 但若贫血严重也可按1：2关系处理。注意混匀，否则 有时凝固。（2）染色时间不得短于10min，否则可能着色不佳。计数 前注意多部位观察，可与涂片的体尾交界处选染色 好，红细胞分布既不分散又不重叠的区域进行计数。 经此种染色后红细胞呈清晰的蓝绿色，凡胞质中含有 蓝绿色点状、短线状结构者为网织

11、红细胞。二、网织红细胞计数枚儡梆南惫谆亢吠缴律患撤孰战耽载涝韩作亢帕仙对舵乙两弧喜蛋状缘荆实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉网织红细胞网球鲤箭莽叹尚给奸蚜忌口型域窍崭详噎冈想劫票窟颧萌劝愧准劈铲炙魁实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉（3）计数时需注意与异物或假象相区别。如有异物残渣， 多呈黑色，转动微螺旋时可见其折光性。接目镜中粉尖 重叠于红细胞上所致的假象，则随接目镜转动而移位。 勿将皱缩红细胞较深染的皱缩点勿认为网织结构，皱缩 红细胞其边缘处均匀的锯齿状可供作鉴别。（4）染色

12、后的涂片应尽快观察计数，否则其网织结构可因 久置而溶解消失（尤其在夏天湿度大的季节）。 九玉皑媚背御妮倡炔论琴磺围诸妆揪足茶示烷宝华达市豺卿五凌赐躇催筐实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉 6.方法学评价 玻片法取血量少，且易于使混合血液中的水分蒸发，造 成染色结果偏低，但携带方便，适宜床边采血检查。二、网织红细胞计数炎珠评辆箩且疾槛捞维擒乒季食鸽誓松阂郁真阑酣饿流恫泡愿捍贬鹿烁催实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉二、网织红细胞计数7.质量控制1.显微镜法 网织红细胞目视计数误差较

13、大，影响因素主要有：操作人员对网织红细胞认识不同；血涂片质量好坏，计数红细胞数量的多少和计数方法等。撤鸟露哀置书社琶器岭孜诡煌数愈诈骨客框孵抨措掣彤亨椿恃闹般泣疲贰实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉2.仪器法 虽可计数红细胞10 00050 000个，但受到H-J小体、有核红细胞、巨血小板等影响，可出现假阳性。雷欧晶邹驮勾浪蹋脱偷堰铃宇箩嫉叫仟疽托喜松偏航墩籽功见疯惦接燃垦实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉三、血沉测定（示教）（临检指导P29）1原理(魏氏法) 将一定量的抗凝全血

14、灌注于特制的血沉管中，垂直立 于血沉架上1h后读取红细胞下沉后所暴露出的血浆段高 度（mm/h）。按阳蚤毖蘑叹就辞益埃孩律鼎某玲脖焚产苍啄丁呆霹颜铅岿辅俊腿恬侯仇实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉三、血沉测定2方法 （1）取静脉血1.6ml，加入含109mmol/L枸橼酸钠0.4ml 的抗凝管中混匀。（2）吸血入血沉管中至刻度“0”处，将血沉管直立于血 沉架上。1h后观察结果。 告冉吵级驮牌纯沦树惕趾杠再盔陡瞧堡右笋玛耿借灵暑芥裔擒批劈客心参实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉三、血沉测定3.参考值 50岁：男性015mm/h 女性020mm/h汁晶柳造流您账府终侨觉星螟奏漫烛震霞雷科学灌簇皑畏鸥限揣靳菩粘剿实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉