分光光度法测定总黄酮含量-操作流程图-简易图解-李熙灿-Xican Li_第1页
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文档简介

1、分光光度法测定总黄酮含量:操作流程图2017.10【文献依据】XicanLi,DongfengChen,YingMai,BiWen,XiaozhenWang.ConcordancebetweenantioxidantactivitiesinvitroandchemicalcomponentsofRadixAstragali.NaturalProductResearch.2012;26:1050-1053.【简介】黄酮包括黄酮、异黄酮、黄酮醇、二氢黄酮醇、双黄酮等,他们大多同时存在于某一种中药及其他植物中。为了测定这些黄酮的总含量,便建立了总黄酮的检测方法。其原理是:黄酮中的处于相邻羰基、羟基可

2、以共同络合金属而显色。根据显色之深浅(即吸光度A值之大小),判断的总黄酮含量之高低。常用的显色剂是亚硝酸钠-硝酸铝,检测波长是508nm。采用分光光度计,并以某种标准品绘制工作曲线,依该曲线所建立的回归方程,计算其含量。井罟Emin加10%硝酸鬻沼猱U5nnLW36min【检测方法与实验流程图】样品涯O.SmLSOSnmV加收St副阪溶液亦L加落谁归.2mL(OfimLJES定曲.flft的印吕hi祥品莊的液糜而an总体积5mL砸備禺曲静特咖in反胡忽时Li.DonylengChen,.YingM肌BiWenBXiaeih-enWang,inviT&andcompaneHls$1adixA$;

3、iTgaliNarLraIProductResegrch.2012:?61D50-1053图1实验流程图【溶液配制】5%亚硝酸钠溶液配制:称取0.5g亚硝酸钠(NaNO2)固体,加蒸馏水至10mL,即得。10%硝酸铝溶液配制:称取1g硝酸铝固体,加蒸馏水至9mL,即得。4%氢氧化钠溶液配制:称取2g氢氧化钠固体,加蒸馏水至48mL,即得。芦丁标准液配制:精密称取芦丁10.4mg置25mL容量瓶中,加80%乙醇溶液溶解、定容。样品液配制:视样品的溶解性,可选用甲醇、乙醇、95乙醇、水作溶液。浓度尽量高,但要有精确的数值。【标准曲线绘制】(芦丁)精密量取0.0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0mL芦丁标准液,代替上图中的“样品液0.5mL”,依“实验流程图”,测A508nm值:量眩光Jt3D00D0O.M&32&.C-S50-7007O.OD5055G.DA30.她弟三袒0.01304o.sia&.9OHB7045畑AJBB0.3100低儆O.2A00.2938070.006807o.joaO.0338S0.3704.3M5.0D69M4翊&3MQ.wieeO.5U30.003330.00731B0.504

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