组织工程总结

1、组织工程总结（简略）一、组织工程三要素：种子细胞（干细胞）、支架材料、生长因子二、干细胞特性：增殖分化潜能未分化自我更新能力（self-renewable）分化形成各种体细胞类型十分稀有三、干细胞分类：Totti-protent （受精卵）、Pluri-protent（ES、EG）、Multi-protent（MSCs、HSCs）、Uni-protent （肌卫星细胞）四、胚胎干细胞（ES）源于发育5-7天囊胚的内细胞团，具有：A.self-renewable分化潜能可分化成三胚层的细胞五、成体干细胞（somatic cells）与胚胎干细胞（ES）比较ES 细胞（Pluri-）Somatic

2、 （ Multi-）细胞类型Pluri-Multi-增值能力强有限来源非自体自体伦理问题有无或少致癌性有（归巢现象）？六、成体干细胞可塑性：正常情况下仅形成该胚层来源细胞，但其人具有跨胚层分化能力七、HSCs特性：具有自我更新及增殖分化能力Surface marker 包括 CD34+和 CD45+分化形成髓系各祖细胞，产生所有血细胞产生特异性的生长因子受体八、基因治疗方法，包括inviro、exvitro，优缺点比较：In vitroEx vitro优点操作简单没有免疫排斥干细胞存在“归巢“现象，回输能准确定位有效将目的基因整合到靶细胞基因中缺点不能保证目的基因有效整合到细胞基 因组里，目的

3、基因可能整合到错误的位 置，或者未整合而随细胞分裂缺失载体病毒可能对机体造成损害。.目的基因没有正确定位到靶组织、器官操作复杂难分离纯化体外难以实现生长环境体外培养易突变九、支架材料选择标准（八个特性）:生物相容性理化性质（粘附、增殖）降解吸收良好机械强度多孔性无免疫原性6.不引起感染H.性质稳定十、支架作用：为种子细胞的粘附、迁移、增殖分化以及分泌细胞外基质提供框架种子细胞在支架材料上生长形成完整的组织以后，支架材料通过生物降解被吸收作为屏障保护新生组织，防止周围组织向新生组织渗透，从而利于新生组织的再生十一、天然与合成材料比较天然合成优点细胞识别，利于种子细胞粘附可自然降解批次间差异小，具

4、有统一性可根据需要人工塑性缺点免疫排斥批次间存在差异生物相容性未知可降解性未知十二、正常干细胞和肿瘤干细胞的共同特性：不对称分裂：-自我更新组织特异性干细胞必须正常自我更新的动物整个生命周期，以维持特定器官癌症干细胞进行自我更新，以维持肿瘤生长-分化为成熟的细胞类型不同表型引起形成器官或者肿瘤的细胞异染色质的增加，但缺乏无限增值的能力（分层排列的细胞）由相似的通路调控-调控正常干细胞自我更新的通路不对肿瘤干细胞进行调控十三、肿瘤干细胞标准：富有致瘤性能在裸鼠体内培养重新形成表型多样性十四、识别肿瘤干细胞的实体瘤：FACS流式细胞术enrichment of side populations侧群

5、Prospective purification using cell surface markers followed by tumorigenic assays十五、肿瘤干细胞微环境：能营养干细胞和维持组织稳态的微环境下的细胞An appropriate spatiotemporal dialog occurs between stem and niche cells in order to fulfull lifelong demands for differentiated cells.Niche cells provide a sheltering庇护environment that

6、 sequesters stem cells from differentiation stimuli, apoptotic调亡stimuli, and other stimuli that would challenge stem cell reserves储备.The niche also safeguards against excessive过度stem cell production that could lead to cancer.Maintaining a balance of stem cell quiescence and activity is a hallmark of

7、 a functional niche.十六、组织工程血管化需要满足：种子细胞包括：间充质干细胞、造血干细胞、前体细胞、血管内皮细胞、胚胎干细胞支架材料材料必须适合血管内皮细胞生长人工血管含有一定的孔隙是关键必须有促血管生成因子存在血管移植物的组织顺应性及其同宿主血管的口径匹配时重要因素血管移植物是否保持通畅与血管本身理化性质及宿主血流动态学状态密切相关血管新生过程必须得到有效控制III .生长因子（促血管生成因子）包括：血管内皮生长因子（VEGF）、成纤维细胞生长因子（FGF）、肝细胞生长因子（HGF）、血小 板衍生生长因子（PDGF）、转化生长因子-8 （TGF-p）、AngIV.四种可行

8、方案：将生长因子的cDNA转染入CHO细胞，再将这种细胞用微胶囊包被，加入到支架材料中将含有促血管生长因子的表达载体复合到组织工程产品中将内皮细胞整合到新形成的组织中将构建的“组织”埋在血管丰富的地方十七、如何构建组织工程学的产品？传统的人工器官（如人工肾、肝）不具备生物功能（代谢、合成），只能作为辅助治疗 装置使用，研究具有生物功能的组织工程人工器官已在全世界引起广泛重视。构建组织工程 人工器官需要三个要素，即种子细胞、支架材料、细胞生长因子。最近，由于干细胞具有 分化能力强的特点，将其用作种子细胞进行构建人工器官成为热点。组织工程学已经在人 工皮肤、人工软骨、人工神经、人工肝等方面取得了一

9、些突破性成果，展现出美好的应用前 景。用生物技术与化学合成方法相结合，可以得到一些单纯用化学或生物的方法无法得到的 或用化学合成制造成本过高的新材料，特别是一些具有特殊性能的材料，如生物相容性、生 物降解性、光学活性、压电性、导电性和材料的高稳定性等。组织工程的核心就是建立细胞与生物材料的三维空间复合体，即具有生命力的活体组 织，用以对病损组织进行形态、结构和功能的重建并达到永久性替代。仅以组织工程骨的构建例说明：骨组织构建构建组织工程骨的方式有几种：支架材料与成骨细胞；支架材料与生长因子；支 架材料与成骨细胞加生长因子。种子细胞：以成骨细胞为主选用支架材料的特点是：机械强度高（耐磨、耐疲功、不变形等，生物惰性（耐酸碱、耐老化、不降解）；一定生物活性可诱导细胞生长、分化，并可被人体降解吸收；给细胞提供三维生长空间，其本身具有生活性，可诱导细胞分化生长和血管的长入。生长因子：成纤维细胞生长因子（FGF）、转化生长因子（TGF