临床化学检验试剂

1、1 临床化学检验试剂2临床化学试剂.临床化学发展 临床 意义试剂盒性能评价1临床诊断试剂的现状3 临床生化试剂 试剂盒发展及现状 方法学：化学法酶法免疫法物理性状：液体型试剂（自配）冻干型试剂干(片)粉型试剂液体型试剂 组合方式：多剂型试剂单剂型试剂双剂型（多剂型）试剂操作方式：手工多步操作离心式生化仪分立式（双试剂功能）生化仪4生化试剂的临床意义:医院检验科分布临检室微生物室生化室免疫室血液室血常规小便常规大便常规肝功能肾功能血脂心肌酶谱电解质糖类脑脊液、体液常规肝炎类免疫项目肿瘤标志物肾炎类心肌损伤标志物性病类风湿类急性时相蛋白培养鉴定药敏骨髓涂片鉴别实验5临床生物试剂测定物分 类 名 称

2、 酶类-淀粉酶、-羟丁酸脱氢酶、-谷氨酰转移酶、丙氨酸氨基转移酶、肌酸激酶、肌酸激酶MB型同功酶、碱性磷酸酶、门冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶 糖类 葡萄糖、果糖胺 脂类 胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、甘油三脂、高密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白A-1/B 6分 类 名 称 肝功能 直接胆红素、总胆红素 蛋白质及代谢物白蛋白、总蛋白、尿素、肌酐 无机元素类 钙、氯、镁、无机磷 临床化学控制血清 续上表72 国内临床诊断试剂产业发展的前景（1）免疫诊断试剂将会逐渐取代临床化学试剂，成为诊断试剂发展的主流。（2）诊断技术正在向两极发展。一是高度集成、自动化的仪器诊断，另一种是简单、快速便于普及的快速诊断。8

3、（4）产品更新应用加快，由于遗传工程、基因重组以及单克隆抗体等现代生物技术的不断应用和发展，使这些精确的诊断试剂能迅速由研究阶段进入临床阶段，缩短了开发时间。（3）检验产品种类将快速扩大。9 3 化学试剂等级标准3.1 国产化学试剂 通用的化学试剂，共分为四个纯度。市售化学试剂在瓶子的标签上用不同的符号和颜色标明它的纯度等级。试剂的纯度不同，其适用范围不同。见下表 。10 国产化学试剂的品质规格级别 名称符号色标 说明 一级 优级纯 GR 绿色纯度高,适用于研究和配制标准液 二级 分析纯AR红色纯度较高,适用于定量分析 三级 化学纯CP蓝色纯度略低于二级试剂,用途与其相同四级 实 验试 剂LR

4、黄色质量较粗,用于一般定性试验 113.2 国外生产化学试剂 国外化学试剂规格种类繁多，颇不一致，和国产试剂规格对照, 见表。等级 规格符号 相当于国产试剂 规格 AR,GR,ACS,PA 一级品 CP,PUSS,LAB,Reinse 二级品 LR,EP,Pract,Rein 三级品 Pure 四级品 12 4 危险、有害化学品 4.1 爆炸品 注意避免撞击、摩擦、打火花和加热 爆炸性物质（E符号）134.2 氧化剂 能使易燃物质燃烧或使存在的火烧的更旺，使得救火更难。 注意：保持远离易燃物质氧化性物质（O符号）144.3 极度易燃物质 闪点在0OC以下的液体和沸点/开始沸点最大值为35OC的

5、液体。 注意：避免同所有的火源接触极易燃物质（F符号）15（3）对湿气敏感的物质，同水接触时易形成易燃烧气体的化学试剂。 注意：避免接触湿气或水（2）各种气体、气体混合物（还有液气体），在正常压力下同气体接触有着火范围。 注意：避免形成易燃气体混合物，保持远离火源（1）自发易燃的物质，在空气中易着火的化学试剂。 注意：避免接触空气4.4 高度易燃物质 易燃物质（F符号）16（5）在火源短期作用后，很易着火的固体物质。注意：避免同所有火源接触（4）闪点低于21OC的液体。 注意：保持远离开放火源、热源和发生火花处174.5 很毒、有毒物质 当吸入、吞入或同皮肤接触时对健康是很危险的，甚至可导致死

6、亡。非重复、重复或长期接触这些物质，可导致不可逆的损害。 注意：避免同人体接触，如有不适，立即看医生有毒物质（T符号）和极高毒性物质（T符号）18 吸入和食入或皮肤渗入这些物质对人的健康是有害的。非重复、重复或长期接触这些物质导致不可逆的损害。注意：避免同人体接触，包括吸入蒸汽，如有不适，立即看医生4.6 有害化学品 有害物质（Xn符号）194.7 腐蚀性化学品 生活组织以及仪器同这些化学品接触后会破坏。注意：不要吸入蒸汽，避免接触皮肤、眼及衣服腐蚀性物质（C符号）204.8 有刺激性化学品 注意：不要吸入蒸汽、避免同皮肤和眼接触刺激性物质（Xi符号）21 5 化学试剂的保管 化学实验所用药品

7、种类多，有些对人有毒害作用，另一些易燃、易爆或有剧毒性的，药品的管理要以安全、不变质为原则。化学试剂的保管应分类保管。 5.1 一般试剂的保管 （1）试剂必须按固体、液体分类并归类按需排列，无机物按单质(金属和非金属)，氧化物(碱性氧化物、酸性氧化物和两性氧化物)，碱，酸和盐 进行分类做好登记，贮存与阴凉、避光、通风、干燥处。22（2）密封 （3）避光（4）阴凉5.2 危险品的保管 凡是能发生燃烧、爆炸、中毒、灼烧等灾害的化学试剂都属于化学危险品。保存要严格遵守公安部门的使用规定。 23 贮存时应放在远离火源、阴凉、通风良好处，严密封固，还应与强氧化剂分开存放。对于易爆试剂可存放于冰箱中，贮存

8、室温应在30oC以下。 5.2.1 易燃和易爆试剂 5.2.2 腐蚀性试剂 在贮存和搬运时应避免撞击或强烈震动，否则会引起容器的破裂。最好选用耐腐蚀材料作架子。 245.2.3 剧毒试剂 凡生物试验半数致死量在50mg/Kg以下者均为剧毒药品，如氰化物、三氧化二砷、氯化汞等少量进入人体或接触皮肤即可造成中毒甚至死亡。应指定专人专柜加锁保管，严格登记请领制度。256 标准参考物质制备 标准参考物（标准品）的分级 三种方法和三个参考物质的概念，在每一等级的测定方法与参考物质间有对应的关系。6.1 方法的分级 6.1.1 决定性方法 （definitive method） （1）定义：26 是指准确

9、度最高，系统误差最小，经详细的研究，没有发现产生误差的原因或在某些方面不够明确的方法，测定结果为“确定值”，与“真值”最接近。 （2）用途 只用于发展及评价参考方法和一级标准品。国际上只有少数实验室进行研究，不能作为常规测定。（3）主要方法 重量分析法、中子活化法、同位素稀释-质谱分析法（ID-MS）276.1.2 参考方法（reference method） （1）定义 是指准确度与精密度已经充分证实的分析方法，干扰因素少，系统误差很小，与重复测定的随机误差相比可以忽略不计，有适当的灵敏度、特异性、直线性及较宽的分析范围。 （2）用途 在条件优越的实验室中应经常使用，主要应用于鉴定常规方法，

10、评价其误差大小，干扰因素，并决定其是否可以被接受。它也用于鉴定二级标准品，为质控血清定值，也可用于评价商品试剂盒等。28（3）主要方法 原子吸收分光光度法、火焰光度法、免疫化学法，离子交换层析法等296.1.3 常规方法（routine method） 方法的性能指标符合临床或其他目的的需要，有适当的分析范围，而且经济实用。其中有些方法准确度已经确定的方法。 常规方法在作出评价以后，经有关学术组织认可后可以作为推荐方法。用作服务性实验室的定量分析。30 临床化学方法的关系图 临床生化部分项目的三级方法 决定性方法 参考方法 常规方法钾 ID-MS 火焰光度法 离子选择电极钠 中子活化法 火焰光

11、度法 离子选择电极总蛋白 凯氏定氮法 双缩脲法肌酐 ID-MS 离子交换层析 苦味酸比色法葡萄糖 ID-MS 己糖激酶法 葡萄糖氧化酶法326.2 标准物质分级6.2.1 一级标准物质（原级参考物） （1）定义 是一种稳定而均一的物质，它的一种或多种理化性质已充分了解，它的数值已由决定性方法确定，或由高度准确的方法确定，所含杂质也已定量，一般有权威机构（如美国国家标准局，英国物理实验室等）提供，有证书。（2）用途 用于校正决定性方法，评价及校正参考方法以及为二级标准品定值。33（3）分类国家确认的参考物质： 由国家确认、其中成份含量在国家规定范围以内，并附有证书的参考物。如美国国家标准局（NB

12、S）的参考物质属此类。生物源性参考物质： 通常此类参考物质与测定标本完全是同类，也就是用混合人血清将其中成份用决定性方法测定后进行定值。34 另一种拟似测定标本的生物源性参考物（其性质与病人标本很接近），其成份浓度必须用决定性方法或几种不同类型的高准确的方法进行定值，已知干扰或可能干扰的物质须有说明。 生物源性参考物质常用于评价方法的可靠程度或用它证实干扰物质对参考方法或常规方法的偏差，以及了解决定性方法、参考方法和常规方法三种结果之间的相互关系。如定值的参考血清属于此类。356.2.2 二级标准物质（次级参考物） （1）定义 包括用于常规分析的标准液。这类标准品可有实验室自己配制或为商品，它

13、的示值必须用一级标准品和参考方法，并由训练有素、能熟练掌握参考方法的操作者确定。 （2）用途 主要用于常规方法的评价或为控制物定值和常规测定的结果计算。 36（3）分类 纯物质（通常用水溶液或有机溶剂溶液）和生物源性介质（如透析后血清）中含参考物质的成份的制品。 纯物质本身就是第一标准物质或具有第一标准物质定值的物质。 生物源性介质配制的所含各种被测成份须经参考方法定值。自制定值参考血清即属此类。376.2.3 质控物质 是用生物源性介质制成（如人或动物血清），基本应用于常规室内或室间质量控制。有冻干与液体两种。6.2.4 标准物质与测定方法的关系 见下页38决定性方法 用途：评价参考方法及一

14、级参考物一级标准用途：发展及评价参考方法，校正决定方法及参考方法，生产二级标准物质参考方法 用途：为二级标准定值、评价常规方法（准确性、偏差、干扰因素）二级标准用途：常规方法的工作标准及为质控定值常规方法 用途：服务性实验室的定量分析质控用途：质量控制396.3 标准物应具备的条件 6.3.1 必备的主要条件 纯度高；定值准确可靠；稳定性好，在保管、使用有效期内其示值误差不超出证书的许可范围；均一性好，任何一份分装的小样品都具备整个标准物质的特性指标。406.3.2 附加条件 摩尔质量尽量大；具有符合使用目的的反应特性；制造简便，价格低廉，购买方便；标准物质的组成发生变化（吸潮）时，可采用重新

15、干燥（恒重）等措施是其复原。 一级标准物是由美国国家标准局等有权威机构提供，不属于常规生产，只介绍常用临床化学标准液的生产。416.3.3 标准液配制 标准液属于二级标准物质，其示值的准确性对检验质量有重大影响，必须在标准物质选择、恒重方法程序、基质（包括水）的质量、最优化的配方和制备工艺上都要严格要求 。6.3.4 一般注意事项 （1）试剂规格要求 （2）对水的要求 （3）合理选用衡器和量器 42 固体试剂恒重后准确称量 液体试剂取量时选择合适的量器准确吸取要求的体积 试剂配制的溶剂一般为蒸馏水或去离子水，应注意对蒸馏水的要求，若需其他溶剂则需注明清楚。 各类试剂分别溶解后按要求顺序混合，最

16、后稀释至刻度。 配制好的试剂应在其容器上注明名称、浓度以及配制时间。 注意事项：436.3.5 配制方法 方法：直接法与间接法 （1）直接法 用固体溶质配制试剂 一般采用称重法 用液体溶质配制试剂 采用容量法 （2）间接法 对于易失恒重或含量不准的液体试剂可采用间接配制法 44钾钠标准液的配置 81.83g干燥氯化钠（基准试剂）和2.982g氯化钾，用水稀释后，加入30.0ml分析纯硝酸，再用水稀释至10 000ml。以氯化钾为内标准，用火焰比色法测定其浓度，要求钾的浓度为4.0 0.1mmol/L,钠的浓度为140 2mmol/L。总蛋白标准液 以人血清白蛋白为原料，其蛋白氮与非蛋白氮值比大

17、于200，用生理盐水作溶剂，用滤膜进行除菌过滤，以凯氏定氮法测定其含量。要求其含量为50.0 0.5g/L。45血红蛋白标准液 血红蛋白溶液提纯 以正常的新鲜人红细胞为原料，用氯化钠溶液洗涤红细胞几次（现用9g/L，后用12g/L氯化钠溶液），离心除去上清液。加蒸馏水破碎红细胞，在加入1/5体积的甲苯提取。最后用离心法去除甲苯，并用玻璃砂心漏斗过滤。 配制 将提取的血红蛋白溶液用氯化钾高铁氰化钾溶液稀释251倍，该溶液的配方为：K3Fe(CN)30.607mmol/L(0.2g/L)，KCN0.768mol/L ( 0.05g/L) ，H2PO41.029mmol/L(0.14.g/L)，Tr

18、ixonX-100 1.0mmol/L,pH7.0-7.4。46检定 纯度检定： 吸光度比值A540nm/A504nm=1.61 0.02 A700nm 0.002含量测定: 在1cm光径比色杯中测定溶液在A540nm的吸光度A，样品中血红蛋白的含量Cmg/L=367.7 A540nm47葡萄糖标准溶液的制备 将分析纯葡萄糖于80OC烘至恒重，易于干燥器中保存，然后称取10 000g干燥葡萄糖，溶于2g/L的苯甲酸溶液至10 000ml，用葡萄糖氧化酶的方法测定其含量，要求为1.000.02mg/L。48说明：（1）对多数原料配制时，需先烘干，烘干的温度因物而已，多为105110OC，烘干的标

19、准是恒重，要置于干燥器冷却后方能称重，配制标准液所用的水质要求较高；（2）从理论上讲，作为临床生化测定标准液最好采用与被测物质相近的介质-血清作为介质，但因现在不能制备一级标准血清，故一般还采用水溶液作介质。从发展的方向看，水溶液样品必将被标准血清所取代。496.4 酶校准物6.4.1 酶校准物的使用方法 使用酶校准物的方法就是用公认的酶校准物使一种或多种常规方法测定的结果与标准方法相同。也就是利用标准物作为载体，使测定结果数值在标准方法和常规方法见传递。这样使用标准的校准物，就是可能统一测定结果。506.4.2 公认酶校准物的来源 有关公认的酶校准物的来源目前已有几个国家和国际组织发表了测定

20、酶催化活性的参考方法。欧洲标准局（BCR）和美国国家标准技术研究院（NIST）已经研制出了某些酶的一级标准物（有证参考物，certified referense material CRM或standard reference material SRM）。51 推出的部分酶有证参考物（CRM）名 称 代 码 来源类型 GGTCRM319猪肾ALPCRM371猪肾肝、骨、ALTCMR426猪心脏胞浆CKCRM299人胎盘LDCRM410人前列腺*保存条件为-20526.4.3 制备 温度标准：以镓的熔点（29.77OC）作为30OC标准。 测定方法：以国际临床生化学会（IFCC）推荐法为准。 制备

21、参考物：规定酶必须来源于人体或实验证明于人体的酶极为相似的动物，并纯化达到一定要求。介质必须是血清，最好是人血清。 536.5 脂类标准品胆固醇标准参考物质的制备6.5.1 制备 1.血清采集：采集健康人血液（胆固醇水平适当，即在5.2mmol/L），在无菌条件下分离血清，剔除溶血和乳靡血清。2.大量血清的混合： 6.5.2 定值 546.6 质控血清的制备 质量控制血清的名称来自英文control serum 。6.6.1 基础物的选择 人血清最理想，但大量制备时血源有困难。国内应用较多的为猪血清。 要求：清澈、无肉眼可见的溶血；无肝炎和支原体的健康牛的血清，并测定布氏杆菌凝集试验为阴性。5

22、56.6.2 收集血清和分离血清 血清的收集 采血可用静脉放血或屠宰动物时接血两种方法。 分离血清方法 （1）搅动血液直到血块出现，用手拉出凝块，弃去纤维蛋白。可使血清及红细胞成游离状态，离心沉淀时分离快；但注意不能过分搅动，要避免溶血可使血钾含量升高。（2）待血液自然凝固后划成小块，使血清尽快自行析出。 56 收集血清置大型离心机沉淀两次，要除净红细胞等有形成分。操作过程尽量采用无菌技术并避免溶血。 将血清置于-20 -50OC的低温条件下冰冻24小时以上，取出在室温中融化，增加冻融次数可减轻血清的浊度（7次）。 另一方法是化学沉淀法。576.6.3 加入及调节各成分 （1）水溶性成分的加入

23、： 无机盐及水溶性有机化合物（尿素、肌酐、葡萄糖、胆红素、尿酸等物质）的加入、钙和磷应加入盐类的浓溶液以调节其血清中相应成分的含量。58上述各成分混入后，在混合血清内加入血清内适当的盐酸液以恢复其原来的pH。（2）酶的加入 加入的酶纯度对质控血清并不必要，可自行制备，不需纯化。 596.6.4 过滤（1）血清最好装在瓶内，用氮气加压，通过滤板。注意血清比水溶液滤过慢；有些成分（如胆红素）可吸附于滤板，在过滤时有轻度的丢失。（2）有的资料介绍经调节分析成分、并经校正浓度后，血清通过0.22滤器过滤，储存于4OC。分装前需再经0.22滤器过滤一次。（3）如受条件限制，即可经离心沉淀，用消毒棉花或纱

24、布过滤。 60 WHO材料介绍要进行微生物检定。将除菌后所得的血清，1滴加入巯基乙酸盐培养基中，置37OC；1滴加入胰酶水解大豆肉汤中，置25OC，1滴于血液琼脂平板上划线，置37OC。均经48小时孵育，检查有无细菌生长。 8.6.5 液体血清的保存 最好将血清置-20OC以下保存，不加防腐剂 。61 6.6.6 分装 1、可用青霉素小空瓶作为容器，使用安瓿做容器的缺点示若冻干物附在安瓿尖上，易丢失影响可靠性。盛放冻干质控血清的小瓶的容量应比加入的血清量大2.5倍，即用25ml瓶盛10ml血清，最好是棕色瓶。小瓶以干热180OC消毒3小时，橡胶塞用高压锅30分钟灭菌。两者均应在灭菌后48小时内

25、使用。 2、每批的全部血清要在分装前充分混匀，保留一定量的血清为测定各成分的浓度用。62 3、冻干处理 分装血清的加入量都要保证精密度良好，加量好可保证准确度的水平。 冻干 加盖及封口 6.6.7 贴瓶签 636.6.8 储存 1.液体血清应保存在-20OC或更低的深冻冰箱暗处。2.冷冻干燥血清可保存于2OC，在-20OC可保证长期稳定。 6.6.9 鉴定 1.瓶间变异测定，规定从冻干机不同放置部位抽样检察。采用测定方法精度好的及成分易改变的2项以上的测定，如钠、葡萄糖等。2.各成分的测定，防止有的成分在制备过程中变质，成分改变到不合格的程度。643.无菌检察。4.含水量测定。6.6.10 单

26、项质控血清的制备 高脂质控血清 656.6.11 对质控血清的要求 （1）均匀一致，瓶间差异小，不大于均数的0.5%，一般不致明显影响分析的精密度。（2）稳定，在有效期内控制成分应稳定不变或改变很小，不影响质控的使用。（3）质控成分应有一个适合的浓度，最好有三种不同浓度（低值、正常值、病理性高值）的质控血清，且高浓度、低浓度分别应达到该项目分析范围的上限和下限。用3种浓度的血清更容易发现分析范围线性的变化，更准确的判断系统误差的性质和大小。如仅有一种浓度时，应采用生理参考值上限偏高为宜。66（4）一种控制血清的“控制”项目应包括常做的所有实验项目。67 数量上，至少2个 人血清基质，分布均匀；

27、 无传染性； 添加剂和调制物的数量少； 瓶间变异小； 若为冻干品复溶后稳定； 到实验室后的有效期应在1年以上。 操作：与病人标本一起检测。68 7. 临床化学试剂盒 节约了试剂、时间和劳动力，提高了实验室的工作效率;保证实验室结果的可靠;节约实验时间。 试剂盒： 两种或两种以上的临床或普通实验室使用的材料（不包括复溶物质），有时还带有其他操作所需的组份组合成的包装，并附有所明书。 优点: 69 使用方便即方便性、低干扰、质量和结果的可靠性及成本低 存在一个平衡关系，研制试剂盒时就要找到一个尽可能好的平衡点。 试剂盒的效期要求一般在半年以上。 试剂盒的生产必须考虑到:70 配套试剂 校准品试剂仪

28、器校准标准程序测试 得到可溯源性结果71按物理性状分：固体型（片剂型或干粉型，冻干型）；液体型；干片型按组合方式： 单剂型；双剂型；多剂型交叉组合分类：冻干单剂型；冻干双剂型；液体单剂型；液体双剂型 7.1 试剂盒分类72试剂种类介绍液体试剂干粉试剂单试剂t双试剂(R1/R2)单试剂双试剂(R1/R2)试剂737.1.1 液体型试剂和粉（片）剂型试剂 1. 液体型试剂 为主要剂型。优点：试剂组分高度均一，瓶间差异小，测定重复性好和使用方便；无需加入任何辅助试剂及蒸馏水，避免了外源性水质对试剂的影响，性能较稳定，测定结果较为准确。缺点：液体型试剂（尤其是酶试剂）保存时间较短，不便于运输。74（1

29、）液体单试剂 何谓液体单试剂 是将某种生化检测项目所用到的试剂科学的混合在一起，组成一种试剂。 特点： 应用方便，操作简便快速，测定结果可靠；但抗干扰能力差给测定结果带来相当大的分析误差。75（2）液体双试剂 何谓液体双试剂 将某些生化检测项目所用到的试剂，按用途科学地分成两类，分别配成两种试剂，通常第一试剂加入后可起到全部或部分消除某些内源性干扰的作用，第二种试剂为启动被检测物质反应的试剂，两种试剂混合后才能共同完成被检测项目的生化反应，然后用适当的方法检测结果。 76 特点： 具有单试剂的优点同时增强了试剂抗干扰能力，扣除样本空白的影响（R1多为缓冲液，R2多为启动试剂），去除内源性干扰物

30、质（R1含与内源性干扰物质反应的物质，R2为启动试剂）；组分高度均一；稳定性良好；试剂更科学合理；提高了测定的准确性；使用方便，不易造成浪费；代表诊断试剂盒的主要发展方向。772. 粉（片）剂型试剂粉剂型试剂及片剂型试剂 将试剂的各组分用球磨技术粉碎成粉剂或混合后压成片剂，使用前再加入指定的溶液复成液体试剂。试剂存在的问题 ： （1）要使试剂各组分混合的非常均匀，技术难度很大； （2）分装过程中的称量误差及复溶时加水量的准确性 影响试剂的瓶间差； （3）水质优劣对试剂的稳定性和测定的可靠性有相当大的影响。78液体试剂与干粉试剂的比较797.1.2 其他类型的试剂盒 1. 快速反应试剂盒 2.

31、一步试剂盒3. 多项同测组合试剂盒 4. 卡式试剂盒 5. 浓缩试剂盒 80801.快速反应试剂盒 快速反应试剂盒主要是为了适应生化分析的技术进步，缩短反应时间，提高工作效率。 如:血液葡萄糖快速测定试剂盒。同一般葡萄糖氧化酶法试剂相比是明显增加了葡萄糖氧化酶及过氧化物酶用量，更主要是增加了变构酶，可使反应加快，34分钟后即生成最终颜色。 快速胆固醇试剂盒，样品与试剂比例是1:100。37反应2分钟即可完成反应。它加大胆固醇酯酶和胆固醇氧化酶等效应酶用量，从而使反应加速。目前要求这种快速反应的试剂用户还不多，但它是一种发展趋势。81812.一步法试剂盒 这是随着方法学的改进，特别是免疫技术的进

32、步，利用特异性抗体参与反应的新型试剂。 如高密度脂蛋白（HDL）测定。以往多采用超速离心法和沉淀法使HDL从其他脂蛋白中分离后再测定HDL中胆固醇，沉淀法操作繁琐，必须预先处理才能用生化分析仪分析。 近年来采用抗低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白血清预先抑制LDL及VLDL，然后再测定HDL，这样就减少沉淀预处理，直接测定出高密度胆固醇。类似的试剂盒还有肌酸激酶（CK）及其同工酶CK-MB的测定。8282 3.多项同测组合试剂盒 这类型试剂主要是用于三点双项同测终点法、三点双项同测连续监测法和三点双项同测终点速率法测定的试剂盒。 方法是在同一比色杯中，先后加入两种试剂与检品中的两种被检物发生反应，在

33、各反应达到平衡期时分别测定，整个测定过程进行三次比色，测定两个项目，称为三点双项同测终点法。 8383例:甘油三脂、胆固醇同时测定法第一试剂 Tris缓冲液，含胆固醇酯酶、ATP、MgCl2、过氧化物酶、磷酸甘油氧化酶、甘油激酶、脂肪酶、4-氨基安替吡啉、2-羟3.5-氯苯磺酸钠、Triton-X等第二试剂 Tris缓冲液，含胆固醇氧化酶。当血清或标准液与第一试剂混合后立即进行第一次比色（510nm）得空白吸光度。37作用5分钟后进行第二次比色，为甘油三酯与酶试剂反应终点的吸光度，又是胆固醇测定的空白吸光度。然后加入第二试剂，37作用510分钟，进行第三次比色，为胆固醇与酶试剂反应终点的吸光度

34、。8484 甘油三酯浓度=A2（样品）-AB（样品）/A2（TG标准）-AB（TG标准）甘油三酯标准的浓度 总胆固醇浓度=A3（样品）-A2（样品）/A3（TC标准）-A2（TC标准）胆固醇标准的浓度8585 4.卡式试剂盒 试剂首先装入试剂瓶，瓶上充分使用编码技术，而后根据编码启动调配、使用及更换储存。其特点是： 卡式试剂瓶上条码令使用者可快捷准确地输入试剂数据，如测试数量、批号、有效期，保证正确识别试剂。 试剂装载后能自动调配，可消除潜在误差，并节省操作时间。 持续不断地监察仪器上已装载的试剂存量，并在供应量不足时通知使用者。试剂装载使用时间可长达一个月。 8686 所有卡式试剂盒大小划一

35、，有利储存。卡式试剂设计较独特，可防止试剂蒸发及降解，能确保试剂装载后的稳定性更长，从而节省成本。 标签根据测试类别以颜色编码，便于使用者识别。8787 5.浓缩试剂盒 卡式试剂盒就是采用的浓缩试剂，使用时自动完成稀释，而后用于测定。 浓缩试剂便于工作、储存、运输、装载等优越性是很明显的，浓缩试剂便于监控、减少校正次数、提高工作质量。 在浓缩试剂基础上又组成双试剂及多项同测组合试剂，又体现出它们所具有的特点及优越性。 以后这种浓缩试剂及其各种组合，将成为一种时尚，成为人们乐于使用的新型试剂盒。887.2 临床生化试剂盒的质量控制 试剂盒性能指标：试剂性能评价 灵敏度 稳定性 稳定性的指标有三个

36、 （1）原包装试剂的稳定性 （2）复溶后试剂的稳定性 （3）不同温度下保存期 正常参考范围幻灯片 8189试剂性能评价ABCDE5. 稳定性4. 抗干扰能力1. 准确度2. 精密度3. 线性范围90 7.3 常用临床化学试剂盒配置 所用的水均为二级交换水，化学试剂除特殊指定的外均为分析纯，配制温度为室温，试剂在分装前均需用2号沙芯漏斗过滤，除去不溶物质。 总蛋白测定试剂 150g干燥CuSO4H2O溶于25 000ml水中，加450g酒石酸钾钠，250g碘化钠，待完全溶解后，在加入6mol/L氢氧化钠5000ml，用水稀释至50 000ml,分装于250ml塑料瓶中。91 胆固醇测定试剂盒 酶

37、液 将Na2HPO42H2O 231g及NaH2PO42H2O 265.56g配成pH6.7磷酸缓冲液，然后在10 000ml缓冲液中，加入40g 胆酸钠，5g 4-氨基安替比林，62ml TritonX-100,1.5g NaN3, 77 500U过氧化物酶，1 860U胆固醇氧化酶，再加入5500ml乙二醇，混匀后分装与150ml塑料瓶中。 稀释液 用同样的pH6.7磷酸缓冲液配制，在15 500ml中含重蒸苯酚，分装每瓶150ml。927.4 试剂盒性能的评价 7.4.1说明书审查 说明书是用户了解和正确使用试剂盒的指南，内容包括： 试剂名称；用途；测定原理和技术要求； 试剂盒内的包装内容；适用仪器；标本要求；测定步骤及注意事项；贮存的条件及有效期；性能特征，包括准确度、精确度、特异性、受干扰的程度、线性范围、参考范围； 生产单位名称、地址、邮编及电话。937.4.2 理学检验与评价 外包装应完整牢固，封口严密，标签清晰；有详细的用户说明书，卫生部批准的文号， 生产日期，有效期和保存条件；粉剂型应均匀无凝块，不粘附瓶壁；液体型试剂应无沉淀，无混浊，无渗漏；复溶后或液体试剂的pH应符合标准规定。94 8.试剂级水 8.1 自来水中污染物8.2