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实验五、血糖含量的测定一、目的要求掌握邻甲苯胺法测定血糖的原理和方法1二、实验原理 血液中所含的葡萄糖,称为血糖。它是糖在体内的运输形式。 本实验采用邻甲苯胺法测定血糖。其原理是葡萄糖在酸性介质中加热脱水反应生成5羟甲基2呋喃甲醛,分子中的醛基与邻甲苯胺缩合成青色的薛夫氏碱,通过比色可以定量。2三、试剂和器材 试剂邻甲苯胺试剂:称取硫脲1.5溶于750L冰醋酸中, 加邻甲苯胺150L及饱和硼酸40L, 混匀后加冰醋酸至1000L, 置棕色瓶中,冰箱保存。葡萄糖标准溶液:0.1mg/mL。3 材料 动物血清 器材 具塞试管1.515cm(8);分光光度计。4四、操作方法 1.制作标准曲线 取6支试管编号后,按下表顺序加入试剂: 加毕,温和混匀,于沸水浴中煮沸4min取下,冷却,放置30min,用1cm比色杯,试剂空白为参比,测定630nm 处吸光值,绘制标准曲线。 562、样品测定取3支试管编号后,分别加入试剂,与标准曲线同时作比色测定:7 加毕,温和混匀,于沸水浴中煮沸4min取下,冷却,放置30min,用1cm比色杯,试剂空白为参比,测定630nm 处吸光值,从标准曲线中可查出样品中血糖含量。8五、注意事项 该法一般在浓酸高温条件下发生反应, 在做血糖测定时
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