《微生物检验基础知识》课件

1、课程内容第一单元 微生物学基础知识第三单元 培养基及器皿准备第二单元 消毒、灭菌方式第四单元 微生物检验基本方法1第1页，共68页。 第一单元 微生物学基础知识微生物在生物界地位一微生物定义及特点二微生物分类三影响微生物生长繁殖的因素四2工厂需要控制的微生物五第2页，共68页。生物分类系统病毒界原核生物界真菌界(真核)真核原生界动物界植物界病毒细菌酵母菌霉菌藻类原生动物微生物微生物并非生物分类学上的名词， 所有个体微小的低等生物通称微生物在生物界地位3地位最低第3页，共68页。微生物小简低微生物定义及特点 个体 结构 进化4第4页，共68页。微生物定义及特点微生物分布广、种类多代谢强、繁殖快体

2、积小、面积大适应强、易变异5第5页，共68页。1974年第8版：2000种1994年第9版4500种分类单位：界、门、纲、目、科、属、种伯杰氏细菌鉴定手册微生物分类6第6页，共68页。微生物非细胞形态细胞形态病毒原核生物真核生物细菌、支原体、衣原体蓝细菌藻类原生动物微生物分类霉菌、酵母菌7第7页，共68页。细 菌1、细菌特点2、细菌分类3、细菌形态4、细菌结构-染色5、菌落形态9、细菌繁殖6、影响菌落因素8、细菌芽孢7、细菌结构10、细菌生长周期第8页，共68页。 原核生物：呈单细胞无核膜二分裂方式繁殖 9细菌特点第9页，共68页。细菌呼吸类型分代谢类型分细胞结构（染色）分形态分球状、杆状、螺

3、旋状自养型 、异养型需氧、厌氧、兼性厌氧G+、G-革兰氏染色是鉴别细菌种类的重要方法细菌分类10第10页，共68页。11球状弧形或螺旋形杆状 细菌形态11第11页，共68页。G+G-细菌结构（染色）12第12页，共68页。 单个细菌 显微镜观察细菌菌落单个细胞繁殖肉眼可见细菌与菌落13第13页，共68页。a.大小：b.形态：c.隆起度：d.菌落边缘：e.表面性状：f.表面光泽：g.颜色透明度：细菌的菌落形态14第14页，共68页。同种菌落特征相似生长环境邻近菌落细胞空间位置不同影响菌落特征的因素：影响菌落形态因素15第15页，共68页。基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、核质特殊结构：荚膜、鞭毛

4、、菌毛、芽孢细菌结构16第16页，共68页。芽 孢原因条件恶劣营养损失过程17第17页，共68页。一个细菌 一个芽孢 一个芽孢 一个营养体芽孢特点：壁厚密，折光强，不易着色，耐热，耐杀菌剂，不易杀灭，在高酸中不易萌发芽 孢18第18页，共68页。小测试灭菌是否彻底判定标准？化验室灭菌条件？芽孢是否被杀灭湿热 121 、20-30分干热 160 、 2小时19第19页，共68页。20Nt = N0 x 2nn = 繁殖代数t = 培养时间N0 = 细菌起始数Nt = 细菌生长 t时间后数量 细菌繁殖个细菌分钟繁殖代，小时后有几个？20第20页，共68页。微生物数量 时间衰亡期稳定期对数生长期延缓

5、期细菌生长周期细菌能否无限繁殖下去？21第21页，共68页。2、霉菌菌体结构 3、 霉菌生长繁殖4、霉菌菌落形态霉菌1、霉菌个体形态霉菌第22页，共68页。霉菌个体形态、结构丝状真菌，一般多细胞，由营养体与繁殖体构成结构：个体形态：23细胞质第23页，共68页。24无性繁殖 （为主） 有性繁殖厚垣孢子分生孢子胞囊孢子接合孢子子囊孢子担孢子TM-00027:36霉菌繁殖24第24页，共68页。霉菌菌落菌落形态：大，疏松，绒毛状，絮状，蜘蛛网状，初期无色，后期产生孢子有颜色25第25页，共68页。2、酵母菌菌体结构 3、酵母菌生长繁殖4、酵母菌菌落形态酵母菌1、酵母菌个体形态酵母菌第26页，共68

6、页。个体形态：多数单细胞，卵圆、球形、椭圆形酵母菌个体形态、结构27第27页，共68页。有性繁殖：产生子囊和子囊孢子无性繁殖（为主）酵母菌繁殖生长周期同细菌芽殖（普遍） 裂殖28第28页，共68页。酵母菌菌落菌落：大而厚，湿润、粘稠、易被挑起，多呈乳白色，少数为红色（如红酵母）29第29页，共68页。小结定义特点分类细菌微生物形态结构繁殖30第30页，共68页。因素营养温度pH渗透压其他水份 影响微生物生长繁殖的因素31第31页，共68页。营 养32第32页，共68页。0 0.6 0.7 0.8 0.9 1.0aw:不腐败霉菌和酵母球菌G-G+干燥食品火腿等熟奶酪酱牛奶、饮料浓缩奶蕃茄酱甜炼乳

7、蕃茄酱水 份aw0.9，大部分细菌受到抑制霉菌、酵母菌的孢子和芽孢菌强G+ G- cb33第33页，共68页。34aw用来衡量有多少水分可以用来生长aw =pp0p = 实际水蒸气压p0= 纯水蒸气压0 aw 1水 份34第34页，共68页。种类 最低 最佳 最高嗜热菌 4045 5575 6090嗜温菌 515 3045 3547低温菌 -55 2530 3035 嗜冷菌 -55 1215 1520 对温度适应能力分温 度35第35页，共68页。36酸度(pH值)4.6pH0 2 4 6 7 9 14原料奶、纯牛奶细菌霉菌酵母TM-00027:54PH4.6 高酸产品PH4.6 低酸产品酸性

8、乳饮料36第36页，共68页。厌氧菌好氧菌兼性厌氧菌微氧菌 气 体37第37页，共68页。 渗透压等渗压高渗压代谢活动正常进行代谢活动呈抑制状态甚至死亡低渗压细胞吸水过分膨大破裂38第38页，共68页。原奶微生物39控制产品无微生物 细菌总数：耐热芽孢嗜冷菌实际需要控制的微生物第39页，共68页。细菌总数主要：G+球菌（微球菌、链球菌）危害：加快产酸；蛋白不稳定；货架缩短来源：牛体、挤奶用具、盛乳容器第40页，共68页。耐热芽孢主要：G+杆菌 （蜡状、枯草、梭状、棒状）危害：质量缺陷；有致病性；食物中毒来源：土壤、水、尘埃、饲料第41页，共68页。嗜冷菌42主要： G-杆菌 （假单胞菌占50%

9、）危害：释放蛋白酶、脂肪酶；产生苦味；变质来源：挤奶、储奶设备；运输、加工、储藏污染；巴氏杀菌后污染第42页，共68页。控制措施奶站车间卫生好，清洗消毒要做到巴氏杀菌不能少，超高温处要有效净化处理很主要，过滤能够除芽孢 巴氏消毒：杀灭90细菌、全部病原菌高压蒸汽灭菌：杀灭全部微生物 管路严密无死角，产品质量绝对高第43页，共68页。回顾 微生物学基本知识微生物定义微生物特点微生物分类联系实际影响因素44第44页，共68页。 消毒、灭菌概念一 热力灭菌二 化学消毒三第二单元 消毒、灭菌方式45第45页，共68页。消毒、灭菌概念概念杀死所有微生物包括芽孢和繁殖体杀死病原微生物阻止或抑制微生物生长繁

10、殖无活的微生物灭菌消毒防腐无菌46第46页，共68页。灭菌和消毒前提条件：清洗干净!消毒、灭菌清洗47第47页，共68页。灭菌（消毒）类型温度与时间杀菌范围灭菌物品干热灭菌火焰灭菌火焰灼烧全部微生物耐热物品、接种环、试管口等热空气灭菌160 2 h玻璃器皿、金属用具、等耐热物品湿热灭菌高压蒸汽灭菌法12115-30min培养基、生理盐水、玻璃器皿等11515-20min热力灭菌48第48页，共68页。微生物蛋白变性代谢故障死亡高温热力灭菌原理49第49页，共68页。湿热灭菌优点水蒸汽穿透力强蒸汽凝结成水，放出潜热，提高物体温度湿热灭菌比干热效果好菌体蛋白质吸收水分易凝固50第50页，共68页。

11、类别名称常用浓度应用范围作用机理醇类乙醇70-75皮肤、体温计、器械消毒脱水、蛋白质变性表面活性剂新洁尔灭0.05-1皮肤、器械消毒破坏细胞膜、改变通透性酸类乳酸0.33-1mol/L空气消毒 /氧化剂过氧乙酸0.2-0.5%（需严格控制浓度）塑料、玻璃、纺织原料及人造纤维制品；也适用于食品表面消毒（水果、蔬菜、蛋类）和环境地面消毒与蛋白质活性基团反应，酶失活氯制剂漂白粉（次氯酸钙）0.5-1.2%饮用水、厂房和用具，澄清溶液可用水果和蔬菜消毒杀死细菌芽孢卤素氯气0.2-1ppm饮用水消毒同上酚类来苏尔1-2手、皮肤消毒同上3-5器械、地面消毒化学消毒51第51页，共68页。病原微生物蛋白酶类

12、细胞破裂溶解变性沉淀系统破坏破坏细胞膜杀死对非病原微生物不能全部杀死消毒防腐剂作用原理52第52页，共68页。紫外线消毒原理菌体吸收紫外线损坏核酸中DNA致死空气紫外线照射产生臭氧杀死菌体53第53页，共68页。回顾 消毒、灭菌方式概念种类选用54第54页，共68页。 玻璃器皿清洗、包扎 培养基分类及制备一二第三单元 培养基及器皿准备55第55页，共68页。新器皿未污染 已污染 有油圬 用过的载玻片玻璃器皿清洗、包扎清洗包扎56第56页，共68页。培养基化学成分用途物理状态半固体液体固体增殖鉴别选择半合成合成天然基础加富厌氧特殊 培养基分类及制备57第57页，共68页。容器选择状态观察pH验证灭菌存放注意事项 培养基制备58第58页，共68页。回顾玻璃器皿清洗培养基分类及制备培养基及器皿准备59第59页，共68页。 接种、培养一生化反应实验四 血清学实验五动物实验六第四单元 微生物检验基本方法 制片、染色、观察二 增菌实验三60第60页，共68页。一个亲代细胞 一个菌落检样 培养基接种和培养接种纯培养分离培养纯培养过程61第61页，共68页。获得单个菌落倾注涂布划线1.斜线法 2.曲线法 3.方格法 4.放射法 5.四格法62第62页，共68页。染色、制片、镜检染色方法单染法复染法苯胺黑美兰染色革兰氏染色63第63页，共68页。染色原理革兰氏染色色差增大，