DNA提取试验报告0001

1、生物学大实验（二）实验名称：质粒扩增、提取和鉴定实验实验目的 通过对智力扩增、提取和鉴定试验的实验原理介绍和实际操作，加深对分子生物学基本技术的理解和掌握。实验仪器设备：电子天平、高压蒸汽灭菌锅、摇床、离心机、不同型号移液枪若干支、 磁力搅拌器、恒温水浴锅、电炉、制冰机、琼脂糖凝胶电泳仪、超净工作台等。实验原理：质粒主要存在于细菌、放线菌和真菌细胞中，通过对细菌、放线菌和真菌的培 养来实现对质粒的扩增。经过处理的线状dna在外界环境恢复正常的时候不能够复性而质粒dna可以复性，从而可以实现质粒 dna和染色体dna的分离。限制性内切酶能特意地结合于 一端被称为限制性酶识别系列的dna系列之内或

2、其附近的特异位点上，并切割dna。当对提取的质粒dna进行电泳时，同一质粒dna其超螺旋形式的泳动速度要比开环和线状分子的泳 动速度快.实验步骤：一质粒扩增（1 ）普通lb固体培养基制备：制备lb培养基，倒入火菌瓶中tWj压火菌，待完全冷却后，保存备用。（2）将大肠杆菌接种于lb培养基中，37 c振荡培养过夜（200转/分）二质粒dna的提取（碱法）1将菌液倒入1.5ml的微量离心管中，12000rpm离心一分30秒，弃去上清液，以得到较多的细菌沉淀；将微量离心管开口倒置在卫生纸上，使离心管底部的液体流尽。3、加入100dl用冰预冷的溶液i,剧烈振荡，将沉淀彻底悬浮，然后室温放置5分 钟。加入

3、200 dl现配的溶液ii ,盖紧管口，轻轻快速颠倒离心管（不要振荡，以避免dna断裂），使混合物混匀，冰浴510分钟.加入150dl预冷的溶液iii,盖紧管口，温和颠倒混匀，使粘稠地细菌裂解物均匀地分布于溶液iii 中，冰浴5分钟。取上部水相，移入新的离心管，加入2倍体积预冷的无水乙醇（也可同时加入1/10倍体积的醋酸钠），震荡混匀，室温放置10分钟沉淀双链dna,然后4C , 12000rpm 离心10min 。弃去上清液，将离心管倒置于卫生纸上，使离心管底部的液体流尽后，加入预冷的 1ml 70% 乙醇.弃去上清液，将离心管倒置于卫生纸上，使液体流尽，置dna干燥510分钟。吸除上清液，

4、将管口倒置于卫生纸上使液体流尽，真空干燥10分钟或室温干燥.将沉淀溶于34Wte缓冲液或灭菌水（ph8.0 ）中，储于-20 C冰箱中三dna酶切反应将洁净干燥并经灭菌的eppendorf 管(最好0.5ml )编号，用微量移液枪分别加入dna ( W)和相应的限制性内切酶反应10 X缓冲液2u 1,将管内溶液混匀后加入0.5 W酶液，用手指轻弹管壁使溶液混匀，也可以用微量离心机甩一下，使溶液集中在管底。此步操作是整个实验成败的关键，要防止错加，漏加。使用限制性内切酶时应尽量减少其离开冰箱的 时间，以免活性降低。混匀反应体系后，将eppendorf管置于适当的支持物上(如插在泡沫塑料板上)，3

5、7 c水浴锅保温2-3小时，使酶切反应完全。每管加入2u10.1mo1/1 edta (ph8.0),混匀，以停止反应，置于冰箱之保存备用。四dna的琼脂糖凝胶电泳取5Xtbe缓冲液100ml加蒸储水至1000ml ,配成0。5Xtbe稀释缓冲液，待 用。胶液的制备：称取3g琼脂糖置于1000ml锥形瓶中，加入300ml 0 。 5Xtbe稀 释缓冲液，加入微波炉里加热至琼脂糖全部融化 ，取出摇匀，此为1%琼脂糖凝胶液。加热过程 中要不时摇动，使其附于瓶盖上的琼脂糖颗粒进入溶液。加热时应盖上封口膜，以减少水分蒸发。胶版的制备：想冷却至50 -60 C的琼脂糖胶液中加入澳化乙锭 (eb)溶液使其

6、终 浓度为0.5 u lg/ml。倒胶时的温度不可太低，否则凝固不均匀，速度也不可太快，否则溶液 出现气泡，待胶完全凝固后，拔出梳子注意不要损伤梳底部的凝胶，然后向槽内加入0。5 u x tbe稀释缓冲液至页面恰好没过胶板上表面加样：取20 u 1的酶解液与2u l10 X载样液混匀，用微量移液枪小心加入样品槽中，每加完一个样品要更换tip 头以防止互相污染，注意上样时要小心操做，避免损坏凝胶或将样品槽底部的凝胶刺穿电泳：加完样后合上电泳槽盖，立即接通电源，控制电压保持在60 -80V,电流在40ma以上，当澳酚蓝条带移动到距凝胶前沿2cm时停止电泳观察和拍照五实验结果六实验结论通过本次试验加

7、深了对分子生物学以及基因工程的深入了解，右上第三第四根亮柱是我的结果。结果显示，第三条中酶切效果良好，rna被降解的很完全，第四根没有被酶切，质粒 dna跟rna同时存在，出现了两条亮带，质粒dna跟rna分离效果较好。本实验需要细致认真的完成，所以特别在凝胶电泳中要十分注意以下事项：(1)取出梳子之前，一定要耐心等待琼脂糖凝胶的凝固，拔梳子是一定要手稳，而且垂直拔出；(2)点样要细心，枪头不要碰到凝胶，以免点样枪刺破凝胶；(3 ) 电泳时，电极一定要连接正确(4)染色剂澳化乙锭是强诱变剂，有致癌性和强毒性，使用时一定要带一次性手套，使用后废液不可不可随意丢弃.生物科学071班 姓名：刘欢 学

8、号：20073305 篇二：dna的提取和电泳实验报 告基因组dna的提取和电泳(实验五)实验报告一、实验目的了解dna提取的方法，以及琼脂糖凝胶电泳分析dna技术。二、器材和试剂器材水平琼脂糖电泳仪，离心机，水浴锅，研钵，离心管、移液枪、水稻幼苗等试齐IJ1mol/l tris.cl(ph8.0)的配制：称取 12.11g 的 tris,置于 80 ml 的ddh20,加入浓盐酸(约4.2 ml )，调节ph值至8.0 ,定容至100 ml 。0.5 mol/l edta (ph8。 0)的配制：18。61g na2edta - 2h2o ,力口入 80 ml的ddh2o ,用naoh颗粒调

9、ph值至8。0 (约需2 g ),定容至100 ml 。提取缓冲液的配制 ：100 mmol/l tris 。 cl(ph8.0 ) , 20 mmol/ledta,500 mmol/l nacl,1.5 % sds4。80/4/16 氯仿：异戊醇：乙醇5. 6? loading buffer : 0.15 % 澳酚蓝，0.15 %二甲苯青 ff,5 mmol/ledta,50% 甘油三、实验步骤在15ml的离心管中加入 5ml的提取缓冲液,60 C水浴预热。植物叶1-2g,剪碎，在钵体中加入石英砂，加入预热的提取缓冲液，磨成粉末状，60 C水浴彳呆温20 min ,其间不时缓慢摇动。5000

10、 rpm 离心5分钟，仔细吸取上清液至另一离心管中，加入5 ml氯仿/戊醇/乙醇溶液，颠倒混匀(需带手套，防止皮肤损伤)，室温下 静置5 T0分钟，使水相和有机相混匀。室温下离心 5000 rpm 离心5分钟。仔细吸取上清液至另一离心管中，加入一倍体积异丙醇，混匀，室温下放置片刻即出现絮状沉淀.离心5000 rpm ,离心5 min ,弃去异丙醇，室温晾干.视沉淀多少，加入1ml左右ddh2o溶解，可在60 c水浴中放置15分钟以上助溶取dna样品51,加入1科16 ? loading buffer, 混匀，加入0。7%的琼脂糖 凝胶加样孔中，电泳，检测dna的分子大小。4、实验结果和讨论实验

11、分析：本次实验由于种种原因我是和植保102班的同学一起做的，我们组3人，实验过程比较严谨，受到了老师的表扬，实验结果也很令人满意。下面是实验过程中的注意点：1、研磨不能太久太用力，会导致dna片段断掉。2、实验室的某些试剂，如氯仿，有毒性，应带手套进行。电泳的时候不知是时间的原因还是都做得不错，结果相差不是很远（如上图），第五组和第六组是我们的，第六组是我自己加的。实验过程中要耐心细心，这样才能得到满意的结 果。园艺101石颖20100107011篇三：浙大生化实验报告 dna的提取实验报告课程名称：生化实验甲指导老师：成绩： 实验名称：植物基因组dna的提取实验类型：生化定性实验 同组学生姓

12、名：及纯度与含量的测定一、实验目的和要求 （必填） 二、实验内容和原理（必填）三、实验材料与试剂（必填）四、实验器材与仪器（必填）五、操作方法和实验步骤（必填）六、实验数据记录和处理七、实验结果与分析（必填）八、讨论、心得 一、实验目的和要求1、学习并掌握植物基因组dna的提取原理和方法；2、了解琼脂糖凝胶电泳检测核酸的原理和操作；3、学习并掌握对电泳检测基因组dna结果的初步分析；4、学习紫外吸收法测定核酸基本原理和方法；5、学习并掌握紫外吸收法测定基因组dna纯度与含量的方法。二、实验基本原理 植物基因组dna的提取方法就其提取原理主要有二种：十六烷基三乙基澳化镂（ctab）法、十二烷基硫

13、酸钠（sds ）法。十六烷基三甲基澳化镂和十二烷基硫酸钠等离子型表面活性剂，能溶解细胞膜和核膜蛋白，使核蛋白解聚，从而使dna得以游离出来。再加入苯酚和氯仿等有机溶剂，能使蛋白质变性，并使抽提液分相，因核酸（dna、rna ）水溶性很强，经离心后即可从抽提液中除去细胞碎片和大部分蛋白质。上清液中加入无水乙醇使dna沉淀，沉淀dna溶于te溶液中，即得植物基因组dna溶液.由于植物中的次生代谢产物一多酚类化合物可介导 dna降解，而多糖的污染也是影响植物核酸纯度最常见的问题，这些多糖能抑制限制酶、连接酶及dna聚合酶等分子生物学酶类 的生物活性。传统的ctab -dna提取法步骤多，较烦琐,dn

14、a产率低,而且由于酚很难完全去 除，容易影响以后的酶切等工作的效率。sds法操作简单，温和，也可提取到较高分子量dna,但所得产物含糖类杂质较多，这将直接影响dna的限制性核酸内切酶酶切效果。由于植 物细胞匀浆含有多种酶类（尤其是氧化酶类）对dna的抽提产生不利的影响，在抽提缓冲液中 需加入抗氧化剂或强还原剂（如疏基乙醇）以降低这些酶类的活性.本实验采用十二烷基硫酸钠（sds ）法提取植物基因组 dna ,基因组dna提取后，通过琼脂糖凝胶电泳鉴定基因组 dna分子量大小、纯度；用紫外吸收法测定基因组 dna纯 度与含量.dna的琼脂糖凝胶电泳鉴定：dna分子在琼脂糖凝胶中有电荷效应和分子筛效

15、应。dna分子在高于等电点的溶液中带负电荷，它在电场中向正极移动.在一定的电场强度下,dna分子的迁移速度取决于分子筛效 应，即具有不同的相对分子量的dna片段泳动速度不同。dna片断在凝胶中当用低浓度的荧光嵌入染料澳化乙锭（eb ）染色后，在紫外光下可见橙红色带 ，并可确定dna片断在凝胶中 的位置。紫外吸收法测定基因组dna纯度与含量核酸-dna和rna所含碱基的苯环结构（喋吟环和喀咤环）的共轲双键具有紫外吸收的性质，它们在260nm处有最大的吸收峰。因此，可以用260nm波长进行核酸含量的测定 。波长为260nm时，dna或rna的光密度的大小不仅与总含量有关，也与它们的不同构型而有差异

16、。对标准样品来说，浓度为1g / ml 时，dna钠盐的od260 =0。02 .当od260 = 1时，双链dna含量名勺为50科g / ml单链dna含量名勺为37g / mlrna含量名勺为40科g / ml寡核甘酸含量约为 30 dg / ml（由于底物不同有差异）1、核酸样品dna、rna含量的测定：如用1cm光径石英比色皿，用h2o稀释dna或rna样品n倍并以h2o为空白对照， 根据此时读出的od260值即可计算出本品稀释前dna的含量：dna （ g/ wD =50Xod260 读数 x dna 样品稀释倍数 /1000rna（科g/ ） =40 x od260 读数x rna

17、 样品稀释倍数/1000若样品不纯，则比值发生变化，此时无法用分光光度法对核酸进行定量，可使用澳化乙锭法或其他方法进行估算。当dna样品中含有蛋白质、酚或其他小分子污染物时，会影响dna吸光度的准确测定。 由于dna在260nm处有最大的吸收峰，蛋白质在280nm处有最大的吸收峰，盐和小分子则 集中在230nm处。所以，一般情况下同时检测同一样品的od260、od280和od230 ,计算它们的比值来判断核酸样品的纯度.2、核酸样品纯度判断的一般标准：dna 纯度：od260/od280 弋d 8,表示为纯的 dna;od260/od2801.9,表示有 rna 污染；od260/od2801

18、。6,表示有蛋白质、酚等?亏染. rna 纯度:1 。 7 od260/od2802.0时，表示可能有异硫鼠酸残存 .od230/od260 的比值应在0。4-0。5之间，若比值较高说明有残余的盐和小分子 如核甘酸、氨基酸、酚等的存在。若样品不纯，则比值发生变化，此时无法用分光光度法对核酸进行定量；同时也会影响酶切和pcr的效果。三、实验材料与试剂1、实验材料：植物幼嫩叶子2、实验试剂(1 )基因组dna提取缓冲液(2)氯仿：异戊醇：乙醇抽提液(3) te缓冲液(4 )平衡酚：(5) rna 酶 a(6)酚/氯仿(7)氯仿/异戊醇(8 )异丙醇、无水乙醇、70 %乙醇.(9 ) 3mol/l

19、naac5 xtbe缓冲液(11 ) 6 x电泳上样缓冲液1。0 %琼脂糖凝胶ebdna 分子量 markers:125,564, 2027 , 2322 , 4361 , 6557 ,9416,23130bp。ddh2o ;四、实验器材与仪器1、研体2、离心机、离心管（7ml、5ml ）及离心管架；3、微量移液器10ul、200ul、1000ul 及枪头；4、恒温水浴箱65 C5、制冰机；6、冰箱；7、恒温水浴箱37 C ;8、微波炉；9、电泳仪及电泳槽；10、紫外检测仪。11、紫外分光光度计；12、石英比色皿 （0。5cm光径）或1cm光径的微量石英比色皿（50ul、100ul ）。（二）

20、琼脂糖凝胶电泳检测基因组dna1、制胶（1 %琼脂糖凝胶）（此步骤由实验室老师准备）在胶模上架好梳子。称取01g琼脂糖，置于250ml锥形并S中，加100ml 0.5 x tbe电 泳缓冲液，加热熔化至无颗粒状琼脂糖，待其冷却至5060 c后，加入eb ,使其终浓度为0.5mg/l,摇匀后立即倒入准备好的胶模中，待胶凝固后，放入电泳槽中，倒入适量0。5xtbe （刚好淹过胶面），拔去梳子备用。（注:eb为诱变剂、致癌物，接触凝胶必须戴手套 操作）2、加样取5ul纯化的dna原溶液样品，与1ul 6 x电泳加样缓冲液混匀，用微量移液枪小心加 入样品槽中（注：勿划破或戳穿加样孔，勿带入气泡）。若d

21、na含量偏低，则可依上述比例增 加上样量，但总体积不可超过样品槽容量。每加完一个样品要换枪头以防互相污染。注意上样时要小心操作，避免损坏凝胶或将样品槽底部凝胶刺穿。3、电泳加完样后，盖上电泳槽盖，立即接通电源，使电压调到100v,恒压电泳。当澳酚蓝条带 移动到距凝胶前缘约 2cm时，停止电泳（约需3060min）.4、观察和拍照取出胶块置于紫外灯下观察 ，dna存在处可显示出肉眼可辨的橘红色荧光带，再用成像仪进行拍照，以便于分析。（注：紫外光对眼睛有害，观察时戴上防护镜或眼镜，或隔着玻璃 或有机玻璃观察）.紫外吸收法测定基因组 dna纯度与含量将提取的植物基因组dna样品吸取20ul,加到新的

22、5ml离心管中，再加一定量的ddh2o 或te缓冲液（ph 8 。 0）稀释100倍，用0.5cm 光径石英比色皿（约需1.6ml样品溶液）或微量石英比色皿在紫外分光光度计上测定230nm、260nm、280nm处的吸光度。计算植物基因组 dna样品溶液的dna的含量以及dna样品的纯度。六、结果与分析（一）这是电泳后得到的照片，其中从右往左数第七条带为我所做样品的基因组（二）紫外吸收法测定基因组 dna纯度与含量1、植物基因组dna样品溶液的dna的含量：dna （科 g/ “）=959.328ng/ul2、植物基因组dna样品溶液的dna的纯度：od260/od280= 1.973、样品纯

23、度判断 od260/od280 od260/od280 od260/od280od230/od260= 2。078,表示为纯的dna;1.9 ,表示有rna 污染；线斗犬dna 开环dna 胶浓度的影响：浓度越低，相同核酸分子迁移越快，一般常用的凝胶浓度为1%2%;（4）电场强度的影响：电场强度愈大，带点颗粒的泳动越快。但凝胶的有效分离范围随着 电压增大而减小，所以电泳时一般采用低电压，（一般5v/cm）（电场强度）。而对于大片段电泳，甚至用0.51。0v/cm 电泳过夜。进行高压电泳时，只能使用聚丙烯酰胺凝胶 。eb的影响：澳化乙锭（eb）插入双链dna造成其负电荷减少、刚性和长度增加. 电

24、泳缓冲液的影响：核酸电泳常采用tae、tbe、tpe三种缓冲系统，但它们各有利 弊。tae价格低廉，但缓冲能力低，必须进行两极缓冲液的循环 。tpe在进行dna回收时， 会使dna污染磷酸盐，影响后续反应。所以多采用tbe缓冲液。在缓冲液中加入 edta ,可 以鳌合二价离子，抑制dnase,保护dna。缓冲液ph常偏碱性或中性，此时核酸分子带负电， 向正极移动. 碱基组成与电泳温度的影响：一般影响不大在dna提取过程中必须始终注意以下几个关键问题：（1）dna的二级结构和双链易受多种因素（如强酸、强碱、加热、低盐浓度、有机溶剂、酰胺类、尿素等）的影响引起双链解开，即变性”，因此抽提时避免使用

25、变性的条件.（2 ）抑制内外源dnase的活力。dnase就象一把刀，它能把大分子的dna切成碎片， 所以要加以杜绝，现可以通过多种途径来做到这一点：a、低温操作；b、调节ph,使偏碱（ph8。0） ;c、抽提液中加表面活性剂；d、加螯合剂（edta ）除去酶的铺助因子 （mg2+）,使酶活性丧失。（3）防止化学降解。如过酸或过碱以及其它化学因素，会使dna降解，一般综合考虑，取ph8.0 左右为宜。（4）防止物理因素降解.如温度太高或机械张力剪切等 ,dna分子特别大，极易被机械 张力拉断，甚至在细管中稍急一些的流动也会使 dna断裂，所以在抽提过程中要特别注意这一 点，操作过程要尽量简便、

26、温和、减少搅拌次数，也不要剧烈摇动。（5）植物的次生代谢物 （主要是胞质内的多酚类或色素类化合物 ）对核酸提取有干扰作 用。因此，一般尽可能选幼嫩的、代谢旺盛的新生组织作为提取 dna的材料，这是因幼嫩的 新生组织次生代谢物较少，dna含量高，且易于破碎，植物材料最好是新鲜的。由结果可知，在加入rna酶的时候可适当多加一点，以免造成得到的dna样品含较多 rna杂质。篇四:dna 提取实验报告注：1、报告内的项目或内容设置，可根据实际情况加以调整和补充.2、学生提交实验报告时间为实验后10日内。篇五：dna提取及pcr扩增实验报告pcr扩增及dna琼脂糖凝胶电泳刘琳1131428 环境科学一、

27、实验目的.学习并掌握pcr扩增的基本原理与实验技术。.对扩增后的dna进行琼脂糖凝胶电泳试验，并分析相应结果。 二、实验原理pcr扩增多聚酶链反应 （pcr ）技术的原理类似于 dna的天然复制过程。在微量离心管中加入适 量缓冲液，加入微量模板dna、四种脱氧核甘酸 （dntp ）、耐热taq聚合酶及两个合成 dna 的引物，而后加热使模板dna在高温下（94C）变性，双链解链，这是所谓变性阶段。降低溶 液温度，使合成引物在低温（55 C ）与模板dna互补退火形成部分双链，这是所谓退火阶段。溶液反应温度升至中温（72C）,在tap酶作用下，用四种dntp为原料，引物为复制起点，模板dna的一

28、条双链在解链和退火之后延伸为两条双链，这是延伸阶段。如此反复，在同一反应体系中可重复高温变性、低温退火和dna合成这一循环，使产物dna重复合成，并在重复过程中，前一循环的产物dna可作为后一循环的模板dna而参与dna的合成，使产物dna的量按指数方式扩增。经过3040个循环，dna扩增即可完成。dna琼脂糖凝胶电泳实验dna分子在高于其等电点的溶液中带负电，在电场中向阳极移动。在一定的电场强度下，dna分子的迁移速度取决于分子筛效应，即分子本身的大小和构型是主要的影响因素。dna分子的迁移速度与其相对分子量成反比。不同构型的dna分子的迁移速度不同。该电泳方法以琼脂凝胶作为支持物，利用dn

29、a分子在泳动时的电荷效应和分子筛效应，达到分离混合物的目的。三、实验材料仪器：pcr扩增仪、0.2ul薄壁管、1。5ml离心管、移液枪、枪头、微波炉、电泳 仪、水平电泳槽、制胶版、紫外透射仪。试齐ij : tapdna聚合酶、dntp、buffer 、两种引物、16s全长dna样本、无菌ddh2o、模板dna 、tbe、琼脂糖、eb、显色齐U。四、实验步骤pcr扩增本次试验选择细菌16s rdna v3区片段进行扩增。根据计算，首先取1。5ml离心管按照2。5ul 10 x buffer 、1 ul dntp 、 0.5 ul 341gc、0。5 ul 534、0.125 ul taq 、19

30、.375u ddh2o 的比例配置足量的pcr反应体系。分别向9个薄壁管中分别加入 24 ul的反应体系，并分别添加8种不同白模版， 并于第9个薄壁管中加入无菌 ddh2o作为阴性对照。将薄壁管放入pcr扩增仪中，按照预定程序进行 pcr扩增。其中循环过程需要达到3040次。程序如下：预变性：94 3min循环：94 C 变性30s55 C退火30s72 C延伸30s末次延伸:72 C 5minpcr扩增完成后，将样品取出并保存于15 C环境中。dna琼脂糖凝胶电泳实验1称取0。2g琼脂糖粉末，放到一锥形瓶中，加入适量的0。5Xtbe电泳缓冲液。然后置微波炉加热至完全溶化，溶液透明。摇匀，待冷

31、却至60 C左右，在胶液内加入适量的eb。取有机玻璃制胶板槽，在一端插好梳子，在槽内缓慢倒入已冷至60 C左右的胶液，使之形成均匀水平的胶面. TOC o 1-5 h z 待胶凝固后，小心拔起梳子，使加样孔端置阴极段放进电泳槽内。在槽内加入0.5 xtbe电泳缓冲液，至液面覆盖过胶面。取1科1缓冲?和5dl待测 dna样品混合后，用移液枪滴加至凝胶的加样孔中。接通电泳仪和电泳槽，并接通电源，调节稳压输出，电压最高不超过 5v/cm,开始电泳。点样端放阴极端.根据经验调节电压使分带清晰.观察澳酚兰的带（蓝色）的移动。当其移动至距胶板前沿约1cm处，可停止电泳.7在紫外透视仪的样品台上重新铺上一张

32、保鲜膜，赶去气泡平铺，然后把凝胶放在上面。关上样品室外门，打开紫外灯，通过观察孔进行观察.五、实验结果与讨论如图所示：从左至右，分别是模版1-8号，第9列为阴性对照。前8列均有明显的条带出现，而阴性对照无显示，说明扩增整体效果很好。图中有上下两条线，上面一条线所覆盖的条带基本可以代表扩增的产生的片段位置，参照图可以看出扩增片段在200bp左右.在第9个阴性对照的第二条线处可以看到较为模糊的条带，并非是出现假阴性，而是由于二聚物而产生的条带.通过该条带与最右侧的marker 对比可知该片段出现在 100bp左右，并非由于实验操作等问题而产生的污染。实验的照片显示实验结果有拖尾现象，但是并不影响后续实验.在实验过程中由于有些试剂加到了管壁上面，并没有完全加入，可能会出现一些误差.另外在第1列