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1、目的:丛枝菌根真菌对白三叶幼苗耐盐性的影响。毕业论文完整性声明我声明所提交的毕业论文是在导师指导下的研究工作和成果。论文中他人引用的文件、数据、图表、资料已明确标注。论文中的结论和成果是真实可靠的,不包括农业大学或其他教育机构的学位或证书所使用的他人成果和资料。我的同志们对这个研究所作出的任何贡献,在论文中都有明确的解释和表述。论文作者签名:日期:年、月、日毕业论文授权书本毕业论文作者同意学校保存并向国家有关部门或机构寄送论文复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权农业大学将本毕业论文的全部或部分内容编入相关数据库进行检索,并以影印、缩印或扫描的方式保存和编辑本毕业论文。本人离校后发表或

2、使用本毕业论文或与本论文直接相关的学术论文或成果时,单位署名为农业大学。作者签名:日期:年、月、日。教员签名:日期:年、月、日目录.摘要. TOC o 1-3 u 1前言一个1.1丛枝菌根对植物生长的影响11.2丛枝菌根对植物耐盐性的影响11.3本研究的目的和意义2材料和方法22.1实验材料22.2实验方法22.3项目确定三2.3.1菌根感染率和菌根依赖性的测量三2.3.2确定生长指标三2.3.3根参数的确定三2.3.4确定生理指标三2.3.5耐盐系数的测定三2.4数据分析四3结果和分析四3.1真菌对白三叶根系感染率和菌根依赖性的影响四3.2 AM真菌对白三叶生长的影响3.3真菌对白三叶根系的

3、影响53.4盐胁迫下AM真菌对白三叶叶绿素含量的影响6盐胁迫下3.5 AM真菌对白三叶细胞透性的影响六3.6 AM真菌对白三叶耐盐系数的影响七4讨论八参考10致谢12丛枝菌根真菌对植物耐盐性的影响导师摘要:为了探讨丛枝菌根真菌对白车轴草耐盐性的影响,我们以苔藓球囊霉为材料,研究了单一接种和混合接种对盐胁迫下白车轴草生长和生理的影响。结果表明,接种能促进根系生长,增加叶绿素的吸收,降低丙二醛、电导率的积累,提高植物的耐盐性。白三叶的生长和外观质量评分有了很大的提高。混合接种的菌根侵染率最高,藓类次之,根内菌根最低。混合接种可以产生更好的影响。关键词:AM真菌,白三叶,盐胁迫,园林绿化1前言盐碱地

4、是植物生长发育过程中最常见的逆境之一。据统计,世界上盐渍土约占陆地面积的三分之一1。目前盐碱地的绿化技术主要是换土和排盐。这两种方法投资和人工都很大,而且容易造成次生盐渍化,效果也不长。在自然生态系统中,80%以上的维管束植物具有丛枝菌根。丛枝菌根真菌接种技术作为一种能形成良好生态循环的新技术,在改善植物营养、促进植物生长、增强植物抗盐性方面具有优势,预示着其在盐碱地园林绿化中的美好前景,对盐碱地绿化具有深远意义。1.1丛枝菌根对植物生长的影响大量研究表明,菌根真菌的生长发育与宿主植物的生长发育密切相关,菌根真菌参与植物的许多生理过程。菌根的主要作用之一是改善植物的矿质营养,被誉为“生物肥料”

5、2。菌根促进植物生长,增加植物生物量或干重,与其增强植物叶片的光合作用和碳营养有关。接种AM真菌显著提高绿豆和玉米叶片蒸腾速率,显著增加叶绿素含量、净光合速率、光照和效率,增加植物生物量3-4。AM真菌在正常供水条件下可以提高植物的水分生成,这一点已经在洋葱、苹果等作物中得到证明4。Dakessian等人4发现AM真菌可以利用土壤结合水促进植物生长。这说明菌根真菌能够充分利用土壤水分,尤其是植物根系不能利用的束缚水和毛细水。目前,对AM真菌应用的研究大多集中在果树、蔬菜和农作物上,对园林植物的研究较少。1.2丛枝菌根对植物耐盐性的影响在盐胁迫下,AM真菌可以侵染植物根系形成菌根,促进植物生长,

6、减少盐害造成的产量损失5-10,对植物在盐环境中的生存具有重要作用。Jahromi等研究表明,在盐胁迫下,接种根内球囊霉的生菜的地上干重高于未接种的生菜11。何忠群等12利用盆栽试验研究了接种AM真菌对0.50%和1.00% NaCl胁迫下番茄渗透调节物质的影响,发现接种促进了叶片和根中可溶性糖的积累。AM真菌还可以促进辣椒(辣椒)和大豆(大豆)的耐盐性,并增加其产量13-14。1.3本研究的目的和意义不同的丛枝菌根真菌对植物有不同的影响。利用AM真菌作为生物肥料和生物农药,可以增强山地、旱地、薄地寄主植物的抗旱性和抗逆性,促进植物生长,有利于水土保持。白三叶具有很强的水土保持、降尘和美化环境

7、的功能,是目前城市绿化美化的理想草种。此外,白三叶高度依赖AM真菌,这可以明显增加其生长和养分吸收15-16。然而,AM真菌对白三叶耐盐性的影响却鲜有报道。本研究旨在探讨AM真菌对白三叶耐盐性的影响,为AM真菌生物技术在盐碱地绿化中的应用提供理论依据。材料和方法2.1测试材料供试菌株为苔藓球囊霉(G. m)和根内球囊霉(G. i ),以三叶草根部的孢子、菌根根段和菌丝作为AM菌剂。试验草种为白三叶;基质壤土(pH 7.96,有机质含量1.68%,全氮7.39%,有效磷43mgkg-1,有效钾495mgkg-1,含盐量0.06%)灭菌(121,2h);盐溶液是NaCl溶液。2.2测试方法接种处理

8、:白三叶(Trifolium repens L .)种子用10%双氧水消毒10分钟,于2014年2月28日种植。育苗容器为圆形塑料花盆(顶径30 cm,底径22 cm,高15 cm)。播种时,分别接种大约5000个潜在接种单位17的G.M .、G.I .和G. m+ G. i .,而对照(CK)加入相同量的灭菌接种物和接种物滤液。盐胁迫处理:2014年4月25日进行盐胁迫处理。每个处理有4个盐浓度(0.00%、0.80%、1.20%、1.60%),共16个处理,每个处理5盆,重复3次,随机排列。盐胁迫前几天控水有利于栽培土壤中盐水的快速扩散。在盐胁迫处理过程中,为了避免盐的冲击作用,每天增加盐

9、浓度至预定浓度,然后每隔2-3天浇水一次(与霍格兰德营养液混合),连续30天,直到每次流出约2/3的溶液,以冲洗刮出物中的盐,并保持盐浓度恒定。2.3项目确定在盐胁迫前(2014年4月24日)测定菌根感染率,在盐胁迫第30天(5月24日)测定菌根感染率等指标。2.3.1菌根感染率和菌根依赖性的测量根据金润和应龙14描述的方法,确定菌根感染率和菌根依赖性。菌根感染率(%) =菌根依赖性(%) =2.3.2确定生长指标盐胁迫后测定株高、鲜重和干重。植物高度是从培养土的裸露部分到植物的最高点。冲洗植物,吸收表面水分,然后将其放入105的烘箱中10 min,在80下干燥至恒重,并称量干重。草坪质量通过

10、目测来评价。根据美国NTEP标准18,采用9分制评价草坪质量。评分因素考虑草坪颜色、质地、密度、均匀性和整体质量。9代表一片草坪能得到的最高评价,1代表完全枯死或休眠的草坪。6级是可接受的正常草坪质量。2.3.3根参数的确定根系参数(根尖数、平均直径、根长、总根表面积和总根体积等。)用root analyzer (WinRHIZO)测定。2.3.4确定生理指标叶绿素的相对含量用SPAD-502手持式叶绿素仪测定。随机选择10株植物,在每株植物中测量3片叶子。测量白三叶最顶端完全展开的叶子的中间部分,避开叶脉。取平均值作为处理叶片叶绿素含量的相对值,测量时间为当天10:00 11:00(紫外线在

11、一天的正常值内)。相对电导率和丙二醛(MDA)含量参考合生素法19。2.3.5耐盐系数的测定盐处理后,每天观察,进行日常维护管理,以幼苗叶片黄叶为盐害症状,耐盐系数为在不同浓度NaCl中生长的天数之和乘以出现盐害症状前的百分比浓度20。2.4数据分析测量数据用DPSv7.5软件进行统计分析,用LSD法进行多重比较。3结果和分析3.1真菌对白三叶根系感染率和菌根依赖性的影响随着盐浓度的增加,不同接种处理的白三叶菌根感染率降低。在相同的NaCl胁迫下,接种混合真菌的侵染率和菌根依赖性最高,其次是接种莫氏酵母,接种发根酵母最低,且三种接种处理的侵染率差异显著,接种混合真菌和接种发根酵母的菌根依赖性差

12、异显著。在0.80%NaCl胁迫下,白三叶对混合真菌的菌根依赖性最大,而在1.60%NaCl胁迫下,白三叶对发根球囊霉的菌根依赖性最小(表1)。表1 AM真菌对根系感染率和菌根依赖性的影响NaCl浓度(%)AM真菌治疗菌根感染率(%)菌根依赖性(%)盐胁迫第0天盐胁迫的第30天0.00通用汽车36.4 b公元前39.7年178.3ab特种部队32.2c35.0分贝公元前155.6年通用汽车+通用汽车44.3a49.6a192.9a0.80通用汽车36.4b31.3英制179.0ab特种部队32.2c27.7fg137.4编码通用汽车+通用汽车44.3a43.4b195.3a1.20通用汽车36

13、.4b26.7加仑169.6ab特种部队32.2c22.8ij127.7德通用汽车+通用汽车44.3a36.3厘米182.9ab1.60通用汽车36.4b23.7嗨公元前160.4年特种部队32.2c19.5j114.5e通用汽车+通用汽车44.3a30.1fg173.5磅3.2 AM真菌对白三叶生长的影响随着盐浓度的增加,不同接种处理的白三叶生长量呈下降趋势。在相同的NaCl胁迫下,接种处理的生长指数高于对照,接种混合真菌的生长指数最高,其次是接种莫氏球囊霉,接种发根球囊霉的生长指数最低。接种混合真菌的白三叶植株的干重、鲜重和株高显著高于对照。随着盐胁迫浓度增加到1.60%,混合真菌、莫氏球

14、囊霉和发根球囊霉的干重分别增加了75.00%、62.50%和12.50%(表2)。0.80%NaCl胁迫下,白三叶的外观品质与非盐胁迫下有显著差异。所有处理的白三叶外观品质下降到3分以下,大部分死亡。接种AM真菌的白三叶植株的视觉质量显著高于对照,接种混合真菌的处理最高,其次是接种莫氏球囊霉,接种发根球囊霉的处理最低。从1.20%开始,所有处理的白色三叶草的视觉质量下降到1,此时所有的白色三叶草死亡(表2)。盐胁迫下AM真菌对白三叶生长的影响NaCl浓度(%)AM真菌治疗植物高度(厘米)根长(厘米)重量(克)重量(克)外观质量分数0.00CK品牌公元前22.0011.83德0.88德0.15英

15、寸8.2b通用汽车25.76a16.37b1.34ab0.26ab8.6a特种部队23.20b公元前14.56年公元前1.23年0.23c8.5a通用汽车+通用汽车27.17a18.64a1.54a0.28a8.7a0.80CK品牌18.27efg9.09磅0.47英尺高0.13华氏度1.5f通用汽车20.65cde12.07德国1.03厘米0.23c2.1d特种部队20.32码13.28cd0.78英寸0.17天1.8e通用汽车+通用汽车公元前21.02年公元前14.49年0.87德公元前0.25年2.4c1.20CK品牌15.24小时8.81fg0.24小时0.10高1.0克通用汽车19.

16、05def11.12e0.85德0.16德1.0克特种部队18.56defg11.46德国0.54fg0.12fg1.0克通用汽车+通用汽车19.52cdef13.23厘米0.93码0.18d1.0克1.60CK品牌14.35i7.69克0.17升0.08小时1.0克通用汽车17.50英尺高10.37英制0.69efg0.13fg1.0克特种部队16.27吉10.44英制0.40吉0.09小时1.0克通用汽车+通用汽车18.40efg12.23德0.86德0.14ef1.0克3.3 AM真菌对白三叶根系的影响接种AM真菌增加了白三叶根尖的数量、长度和直径,增加了白三叶根系的总表面积和体积,促进

17、了白三叶根系的生长。接种AM真菌的白三叶根尖数高于对照。在1.60%NaCl胁迫下,接种混合真菌、莫氏球囊霉和发根球囊霉的白三叶根尖数分别比对照高117.70%、85.00%和64.60%,差异显著,其中混合真菌处理效果最好。接种AM真菌对白三叶平均直径的影响与对根尖数的影响相似,接种混合真菌的效果优于其他处理。在1.60%NaCl胁迫下,白三叶的平均直径比对照增加了50.00%。接种AM真菌的白三叶根长显著高于对照,随着盐浓度的增加,根长增加到1.60%。接种混合真菌、莫氏球囊霉和发根球囊霉的白三叶总根长分别比对照增加54.30%、29.20%和9.10%。接种AM真菌的白三叶根系总表面积和

18、总体积均高于对照,其中混合真菌处理效果最好,在1.60%NaCl浓度下分别增加了94.60%和181.80%,与对照差异显著(表3)。盐胁迫下表3AM真菌对白三叶根构型的影响NaCl浓度(%)AM真菌治疗根尖数量(一个)平均翘曲(毫米)总根长(厘米)总表面积(cm2)总根部体积(cm3)0.00CK品牌632.00e0.49e385.56d38.00分贝0.60e通用汽车887.00b0.66亿美元449.23b50.00b0.79亿美元特种部队793.67c0.60摄氏度430.89c45.00摄氏度0.71摄氏度通用汽车+通用汽车1002.67a0.79a496.23a58.00a0.89

19、a0.80CK品牌430.67小时0.43华氏度214.00小时26.00小时0.39小时通用汽车606.33f0.54d295.67f40.00天0.60e特种部队583.67克0.50e258.67克35.00埃夫0.52f通用汽车+通用汽车668.00d0.59摄氏度345.33e45.00摄氏度0.69d1.20CK品牌1.7767亿0.33小时155.00千17.00i0.24升通用汽车278.00焦耳0.44f183.67i29.00高0.35升特种部队232.33千0.40克173.33j27.00小时0.30焦耳通用汽车+通用汽车314.67i0.49e210.33小时32.0

20、0fg0.41克1.60CK品牌98.00欧0.28升117.33米8.22万0.11牛通用汽车181.33米0.39克151.67千14.00ij0.26千特种部队161.33牛顿0.32小时128.00升12.00焦耳0.21米通用汽车+通用汽车213.33升0.42f181.00ij16.00i0.31焦耳盐胁迫下3.4 AM真菌对白三叶叶绿素含量的影响随着盐浓度的增加,白三叶叶片叶绿素含量降低。在相同NaCl胁迫下,混合菌接种量最高,莫氏球囊霉次之,发根球囊霉最低。在0.80%和1.20%NaCl胁迫下,接种混合真菌和镶嵌酵母处理的叶绿素含量显著高于对照,分别增加55.00%、44.1

21、0%、317.00%和267.00%(表4)。盐胁迫下3.5 AM真菌对白三叶细胞透性的影响随着盐浓度的增加,白三叶叶片的丙二醛和电导率增加。在相同NaCl胁迫下,接种混合真菌最低,其次是接种莫氏球囊霉,最高是接种发根球囊霉。接种AM真菌的丙二醛显著低于对照,接种混合真菌和莫氏球囊霉的电导率显著低于对照。随着盐浓度增加到1.60%,接种混合真菌、花叶胶孢菌和胶孢菌根的白三叶叶片电导率分别比对照降低13.20%、10.70%和6.50%(表4)。盐胁迫下4株AM真菌对白三叶叶片生理的影响NaCl浓度(%)AM真菌治疗相对叶绿素含量丙二醛含量(m olg-1)相对电导率(%)0.00CK品牌33.

22、00摄氏度2.82j29.03ijk通用汽车38.63ab2.30焦耳22.06千特种部队38.50b2.48焦耳25.23jkl通用汽车+通用汽车40.70a1.91j19.10升0.80CK品牌10.43英尺13.97f44.30fg通用汽车15.03德10.20小时35.13嗨特种部队13.10e12.23克38.10毫米通用汽车+通用汽车16.17d7.50升30.85hij1.20CK品牌1.00i22.30摄氏度61.03cd通用汽车3.67毫米16.53e53.73德特种部队2.67吉19.57天57.00天通用汽车+通用汽车4.17克15.43e49.00埃夫1.60CK品牌1

23、.00i25.23a75.10a通用汽车1.67嗨公元前23.17年公元前67.13年特种部队1.33i24.37磅70.20ab通用汽车+通用汽车1.87嗨22.23c公元前65.203.6 AM真菌对白三叶耐盐系数的影响耐盐系数反映了植物对盐胁迫的耐受程度,数值越高,植物的耐盐能力越强。混合真菌、莫氏酵母和发根酵母接种的白三叶耐盐系数分别比对照高75.00%、58.30%和37.50%,其中混合接种的耐盐系数最高。这表明接种AM真菌显著提高了白三叶的耐盐性(图1)。图1AM真菌对白三叶耐盐系数的影响4讨论AM能提高植物的耐盐性已被广泛认可21-23。盐胁迫下,白三叶的生长受到明显抑制,随着

24、盐浓度的增加,生长呈下降趋势。接种AM真菌促进盐胁迫下白三叶的生长,接种混合真菌效果最好。在盐胁迫下,接种AM真菌增加了白三叶根系的根尖数量、长度和直径、总表面积和体积,促进了白三叶根系的生长。AM真菌与植物根系建立共生体后,在土壤中形成巨大的菌丝网络,菌丝可以延伸到根系难以到达的土壤孔隙或土壤有机质中。菌根扩大了植物根系对养分的吸收范围,从而大大提高了白三叶的生长和外观质量。它是叶绿素植物光合作用的重要基础,叶绿素的生成是一个动态平衡过程24。植物细胞膜的选择性通透性改变或丧失,大量细胞物质外渗,组织浸泡液的电导率增加。电导率的变化反映了质膜的损伤程度25。盐胁迫下,白三叶的叶绿素生成平衡、

25、活性氧生成平衡和细胞膜透性被破坏,导致叶绿素含量下降,丙二醛积累,电导率增加。接种AM真菌增加叶绿素含量,减少丙二醛积累,降低电导率,有效改善白三叶的耐盐生理特性,从而提高其耐盐性(图1)。通过外观品质的测定,认为接种AM真菌后可耐受的最高盐浓度在0.80%以下。结果表明,接种AM真菌可以提高白三叶的耐盐性。随着我国人口的急剧增加和工业的快速发展,不合理的土地开垦和利用方式使得大量土地发生次生盐渍化。因此,利用AM真菌生物技术提高园林植物对盐渍土的适应性,对盐渍土绿化具有重要的现实意义。参考1劲松。中国盐渍土研究的发展历史与展望J.土壤科学学报,2008,45(5): 837-845。何,李丽

26、,盛秀。水分胁迫和接种VA菌根对绿豆生长的影响。核农学杂志J。2000, 14(5): 290-294.何,盛秀。不同VA菌根真菌对玉米生长和抗旱性的影响。西北农业大学学报,1999,27(6): 49-53。4金润,应龙主编。菌根。:科学,2007年。5 RabreG H,Almadini A M .盐胁迫下生物诱导剂在蚕豆耐盐性形成中的作用J.非洲生物技术杂志,2005,4(3): 210-222。6朱建民,阿博特.土壤盐分延迟丛枝菌根真菌繁殖体的萌发和限制菌丝生长J.植物学报.菌根,2006,16(5): 371-379。7张志勇,张志平.丛枝菌根真菌与盐碱土植物的共生关系J.菌根,20

27、07,17(3): 167-174。,刁志凯,严,等.菌根真菌的生理生态功能J.应用生态学杂志,2012,23(1): 285-292。9庆忌,金润,闵。丛枝菌根真菌提高植物抗逆性的作用及机理研究进展J.植物生理学杂志,2012,48(9): 845-852。金润,彭琦,徐坤,等.中国盐碱土中AM细菌的生态分布J.应用生态学杂志,1999,10(6): 721-724。11 Jahromi F,Aroca1 R,Porcel R,等.盐胁迫对根内球囊霉离体发育和菌根生菜植株体内生理和分子反应的影响J.植物学报.微生物生态学,2008,55(1): 45-53。12何忠群,何朝兴,智斌,等.丛枝菌根真菌对番茄渗透调节物质的影响J.园艺学报,2007,34(1): 147-152。13闵,辛华,郭少霞,等. AM真菌对盐渍土上番茄和辣椒生长及矿质养分吸收的影响.莱阳农学院学报,2005,22(

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