案例03的开题报告

1、轻工大学学生毕业设计（）开题表课题名称生物源保鲜剂抑菌效果的比较研究课题类型课题来源横向项目导 师常 超学生学号1201070517专 业食品质量与安全立题背景目前保鲜剂行业发展的重点一方面是完善原有的安全防腐剂的生产工艺，降低生产成本和;另一方面大力开发高效、经济的新型防腐剂。人类对自身健康和环保问题认识的不断提高，逐渐发现不少化学 抗菌剂有潜在的“三致”作用，并且新型化学 抗菌防的开发越来越艰难。这使得天然安全的生物源保鲜剂越来越受到人们的青睐。其中，乳酸链球菌素（Nisin）和壳聚糖（Chitosan ）是比较常见的生物保鲜剂。乳酸链球菌素（Nisin）是由几类乳酸乳球菌产生的一种小分子

2、多肽类物质，安全无毒。而壳聚糖是由甲壳质脱乙酰制得，不易溶于水、碱溶液或其他强酸例如硫酸，却能溶于醋酸、苯甲酸等低浓度的酸溶液。课题研究意义安全性高的生物保鲜剂作为一种防腐保鲜的重要越来越受到消费者的青睐。其中壳聚糖和nisin 是两种非常常见的生物源保鲜剂。此项研究的目的在于：通过滤纸片法找出壳聚糖和乳酸链球菌各种供试菌的最小抑菌浓度（MIC），以及保鲜剂浓度与抑菌效果的关系，并分析比较壳聚糖和 nisin 的抑菌效果。从而为冷鲜防腐保鲜提供理论数据和依据。研究内容本文研究的主要内容如下：分析不同保鲜剂的抗菌谱；对于同一种供试菌，分析不同保鲜剂的最小抑菌浓度；比较保鲜剂的抑菌效果；实验思路本

3、次实验为了比较分析nisin和壳聚糖对肉源菌和供试菌的抑菌效果。首先106107cfu/ml的菌悬液、保鲜剂溶液（0.05%、0.125%、0.25%、0.5%、0.8%、1%、5%、10%）以及无菌滤纸片。前者4冰箱中暂存备用，后者置于紫外灯下杀菌30min以上，备用。最后采用滤纸片法测定抑菌圈直径，数据，找出最小抑菌浓度，并绘图比较各保鲜剂的抑菌效果。实验方案 菌种的活化和菌悬液的 :从固体斜面培养基中挑取部分菌落，接种于无菌液体培养基中，37培养 1618h 得到一定浓度的菌悬液。再吸取适量菌悬液均匀涂抹在固体培养基表面，37倒置培养 24 小时。从长满菌落的培养基表面挑取几个菌落于盛有

4、无菌液体培养基的锥形瓶中，对数培养 1618h 后，冰箱 4暂存备用。平板计数该锥形瓶中的菌悬液浓度，抑菌试验前利用 9ml 无菌生理盐水试管稀释至含菌体 106107cfu/ml 的菌悬液即可。 Nisin 和壳聚糖溶液的配置:用去离子水配置一系列浓度梯度的 nisin 溶液（0.05%、 0.125%、0.25%、0.5%、0.8%、1%、5%、10%）。用无菌 1%醋酸溶解壳聚糖，配置一系列浓度梯度的壳聚糖溶液（0.05%、0.125%、0.25%、0.5%、0.8%、1%、5%、10%）。上述溶液在紫外灯下照射 30min 灭菌后备用。 滤纸片的 :用打孔器将厚滤纸打成直径 5.5mm

5、 的圆形纸片（有缺口的弃掉），放置于玻璃 中，160烘箱中干热灭菌 2 h 后，放置于 60烘箱，备用。 最小抑菌浓度（MIC）和抑菌圈直径的测定:选用质量分数为 0.05%、0.125%、0.25%、 0.5%、0.8%的保鲜剂溶液测定最小抑菌浓度。试验前，用棉擦拭无菌工作台表明，并将所有试验操作器具放置在无菌工作台里，紫外灯照射 30 分钟，灭菌。将菌悬液均匀涂抹于已凝固的琼脂培养基表面，盖上，放置一旁。接着将无菌滤纸片（5.5mm）放入保鲜剂溶液中浸泡一段时间，用无菌镊子取出，在容器壁上沥去多余水分后（每个滤纸片的吸水量为 0.0100.015ml），放置在已涂抹菌悬液的培养基中，每个培

6、养基中放置 34 个滤纸片。用生理盐水做空白对照。倒置培养 37，24h。用游标卡尺测量抑菌圈直径。数据，分析结果。实验进度安排本课题从 2015 年 12 月份开始准备，课题的任务的阶段、内容及时间安排如下：月 22 日3 月 4 日查阅相关资料，准备开题、外文翻译月 27 日5 月 20 日课题实施，进行实验操作月 20 日5 月 31 日撰写月 6 日6 月 10 日答辩已具备的条件及未具备的条件分析文字资料部分校馆收藏的，期刊；课题导师所拥有的资料； 馆上的数据库，如维普、中国期刊网、等。实验环境部分相关的实验条件，与实验相关的设备、仪器、试剂和原料等，并会分析析实验结果；数据分析与处

7、理、课题的书写与修改；指导老师及师兄师姐的指导与帮助。8. 参考文献1,.生物抑菌素Nisin抑菌试验J.农业科学,2008,9:128-1302起.Nisin 在食品防腐作用中的研究进展J.食品研究与开发,2012,33(4):233-235 3云雪霞,.乳酸链球菌产肠毒素大肠杆菌的抑菌作用观察J.中国学杂志,2006,23(6):529-5314 Guiotto A,Pozzobon M,Canevari M,etal. PEGylation of the antimicrobial peptide nisin A: problems andsJ.Farmaco,2003,58(1):45

8、-505,等.乳链菌肽的抑菌机制J.中国食品学报,2007(2):128-1336,等.壳聚糖抗菌性能的研究J.食品科学,2007,28(9):121-1247,沈月新.不同脱乙酰度壳聚糖的抑菌性J.海洋大学学报,2001,10(4):380-382 8冯,等.壳聚糖抑菌性能影响、机理及其应用研究进展J.中国酿造,2009(1):19-23ElGhaou,ArulJ,AinA,etal. Anti-fungal activity of chitosan onrvest pathogens:induction of morphological and cytological alteration

9、s in Rhzizopus stoloniferJ.MycolRes,1992,96:769-779李昆仑, 等. - 聚赖氮酸在食品中应用的研究进展J. 保鲜与加工,2010,10(1):11-15倪 清艳 , 李 燕 , 张海 涛 . - 聚 赖氨酸的 抑菌作 用及其 在保鲜 中的应 用J.2008,29(09):102-105Shima S,Matsuo ka H,Sakai H. Antimicrobial Action of -poly- lysine J.J Antibio t,1984,37:1449 -1455张全景, 冯小海, 徐虹, 张扬, 曹. - 聚赖氨酸在冷鲜保鲜中的应用 J,2011,32(02):290-295,.天然防腐剂在冷却牛肉保鲜中的应用J.食品与发酵工业,2004,30(8):107-11215Welscher Y,N l H M,Souza C,etal. Natamycin blocks fungal growth by binding specifically to ergosterol without permeabilizing the membraneJ.Journal of Biological Chem