北京辉奥生物技术有限公司实验外包服务项目简介

1、北京辉奥生物技术有限公司实验外包服务一、整体的课题研究：整体课题基本方案二、抗体制备：单抗、多抗、抗体附件服务三、RNA干扰实验：RNA干扰检测四、分子生物学实验研究定量PCR微小RNA定量PCR,甲基化特异性PCR,逆转录RT-PCR五、细胞学实验研究细胞迁移与侵袭实验，流式细胞术，细胞培养与模型，细胞增殖与毒性MTT检测,细胞转染。六、病理学实验研究HE与特殊染色，细胞凋亡Tune检测，激光共聚焦检测，免疫细胞化学ICC，免疫荧光IF，免疫组化IHC。七、载体构建与蛋白表达杆状病毒表达重组蛋白，大肠杆菌表达重组蛋白，载体构建八、蛋白与生化实验研究凝胶电泳迁移率实验EMSA，ELSIA与生化

2、指标检测，核因子NF-Kbp65活性检测，PKC蛋白激酶活性检测，明胶酶谱MMP活性检测，蛋白印迹WB（Westernblotting）。九、酶联免疫测试服务兽药残留（含三聚氰胺），毒素类检测，主要是黄曲霉系列，呕吐毒素，玉米赤霉烯酮等十、理化分析仪器的测试服务利用平台的气象色谱仪，液相色谱仪，原子吸收仪，离子色谱仪，以及气质联用，液质联用等理化分析仪器来对样品进行测试，1、农兽药药残留、以及其他有机化合物的测试，2、重金属检测（含有机态的重金属元素的测试），3、水和食品中阴阳离子的测试，4、实验方案的设计，谱图的解析等其他服务。整体课题实验研究整体课题基本方案步骤一客户提供研究方向或课题设计

3、。步骤二文献资料准备、讨论课题方案、优化试验流程。步骤三实验材料、试剂的准备。步骤四开展预实验研究和正式实验研究，获得研究结果。附加步骤分析实验图片数据、完成论文、课题结题。分子生物学实验研究定量PCR微小RNA定量PCR实时荧光定量PCR技术指在PCR反应体系中加入荧光试剂，利用基因扩增伴随的荧光信号实时检测PCR进程，通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。避免了以传统半定量PCR方法差生的误差，实时定量PCR已经广泛应用于RNA的检测分析，用于检测组织细胞mRNA表达差异，微小RNA(microRNA)的定量检测、验证基因芯片结果和RNA干扰效果。客户只需提供检测的样本以及基因的名称，

4、我们为您完成引物设计合成、基因提取、模板DNA转录、定量imPCR扩增、扩增曲线以及熔点曲线制备、数据分析。甲基化特异性PCR(MSP)1D07J0他2JQ100人榔本E曲聿C料本D+f本ABCEUHVNVMUU$弓M內齐列拘碑屯吟幽乩J,N引嘟J提丽拝本有单晏也带农呜I搦齐”躬懒7.提示拝聿有苹完全甲基也甲基牝电泳姑果分析左图显示橋氐俣D円个杆羸甲矗化检测絃炭毎牛样莊均同时以非甲基此引输U和甲尿优討側JHT增*同时检测内聚CAlPDH匚样农U引砌斗”，引嗨j”*提示样車无甲基他D样為U弓胸7,鸣惱j-提示引物设廿咸检测过程肯问關无袪反应拆玉是否甲基卷甲基化特异性PCR(MSP)步骤一确定检测

5、基因，设计甲基化引物及非甲基化引物。步骤二提取基因组DNA，纯度、含量检测。步骤三基因组DNA亚硫酸氢钠修饰，DNA回收纯化。步骤四PCR扩增反应，琼脂糖凝胶电泳。步骤五照相、结果分析。逆转录RT-PCR逆转录RT-PCR步骤一确定检测基因，准备检测组织或细胞，设计并合成引物。步骤二总RNA提取，纯度检测。步骤三逆转录-PCR实验，琼脂糖凝胶电泳。步骤四照相采图，测定条带灰度值或吸光度值。RNA干扰实验RNA干扰实验RNA干扰（RNAinterfering,RNAi）现象是指由与靶基因序列同源的双链RNA（DsRNA）引发的基因转录后的沉默过程，小干扰RNA特异性介导相同序列的mRNA降解，阻

6、断相应基因表达。为您提供的RAN干扰技术包括化学合成小RNA片段（SiRNA）和构建载体RNA（SnRNA）两种形式，客户只需提供干预基因名称或基因序列ID,我们免费设计合适的干预位点，保证至少有一对小RNA有效抑制目的基因表达，抑制效率不低于70%。RNA干扰流程步骤一确定干扰基因，设计并合成合适的小干扰RNA（片段型或载体型小干扰RNA）。步骤二预转染实验，进行细胞培养，摸索转染条件、时间并进行必要的检测（WB，PCR等），确定干预效果最佳的一对小RNA。步骤三正式实验，设置合理实验分组，进行瞬时或稳定转染。步骤四转染后检测，根据实验要求选择细胞生物学检测、蛋白检测、分子生物学检测等。以研

7、究小干扰RNA对于细胞、蛋白或基因功能的影响。RNA干扰检测细胞检测细胞增殖毒性MTT细胞凋亡细胞周期细胞迁移细胞侵袭蛋白检测免疫印迹WB免疫细胞化学ICC免疫荧光IF流式细胞术FCM酶联免疫ELSIA分子生物检测RT-PCR实时荧光定量PCR甲基化特异性PCR（MSP）生化检测酶类检测脂类检测糖类检测细胞转染GFP检测细胞学实验研究细胞迁移与侵袭实验细胞迁移与侵袭实验将Transwell小室放入培养板中，小室内称上室，培养板内称下室，上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔，将研究的细胞种在上室内，由于聚碳酸酯膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞，应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜，

8、就可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种方面的研究。完成时间：收到细胞样本及相关试剂后10个工作日。提示：生物备有常规使用的近100种细胞，如果客户没有相应细胞，请来函来电咨询。细胞转染GFP检测流式细胞术流式细胞术FCM(FlowCytometry)是一种定量、快速、客观多参数相关检测分析的分析技术，在细胞生物学、免疫学、肿瘤学、血液学等学科应用广泛，可检测培养细胞、组织样本、分离细胞等，其检测结果以直方图、二维图或假三维图表示，用于检测免疫表型分析(白血病、淋巴瘤、干细胞、疾病诊断、药物评价）、DNA含量及细胞周期分析、细胞特异性标记物、细胞凋亡研究、基因转染鉴定等方面。客户需

9、要准备检测细胞和抗体，如果您没有合适的检测细胞和抗体，请来函来电咨询，我们也可协助您准备检测细胞和抗体，公司实验室拥有2000多种抗体和近100种细胞库存用于FCM和IF检测。完成时间：收到样本后5个工作日细胞培养与模型提供提供原代细胞培养、传代细胞培养以及细胞模型建立等多种细胞学实验方案，如药物干预、小RNA干扰、表达载体转入细胞等，同时提供完善的下游检测，包括免疫蛋白印迹WB、免疫沉淀IP、免疫细胞化学、免疫荧光、RT-PCR、荧光定量PCR、ELSIA检测和细胞增殖与毒性MTT检测、细胞迁移、细胞侵袭、凋亡检测、流式细胞术FCM检测等。成功培养的原代细胞如大鼠间充质干细胞、小鼠子宫平滑肌

10、细胞、人皮肤成纤维细胞、人支气管上皮细胞、大鼠子宫内膜细胞等，具有丰富的原代细胞培养操作经验。公司实验室拥有多种常用细胞株，可随时为你提供低价质优的细胞。细胞增殖与毒性MTT检测提供提供原代细胞培养、传代细胞培养以及细胞模型建立等多种细胞学实验方案，如药物干预、小RNA干扰、表达载体转入细胞等，同时提供完善的下游检测，包括免疫蛋白印迹WB、免疫沉淀IP、免疫细胞化学、免疫荧光、RT-PCR、荧光定量PCR、ELSIA检测和细胞增殖与毒性MTT检测、细胞迁移、细胞侵袭、凋亡检测、流式细胞术FCM检测等。成功培养的原代细胞如大鼠间充质干细胞、小鼠子宫平滑肌细胞、人皮肤成纤维细胞、人支气管上皮细胞、

11、大鼠子宫内膜细胞等，具有丰富的原代细胞培养操作经验。公司实验室拥有多种常用细胞株，可随时为你提供低价质优的细胞。细胞增殖与毒性MTT检测细胞增殖与毒性检测MTT检测，原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。MTT方法用于判断药物、外源性基因、小RNA、蛋白、抗体、细胞因子、血清等对于细胞的作用，以明确上述因子对于细胞生物学行为的影响（如细胞活力、增殖、凋亡

12、等方面）。细胞转染将外源性基因（载体）转入细胞内，已成为研究基因与细胞功能的重要手段，目前常用的包括小RNA干预（RNAi）和外源性表达载体转入两种手段，二者分别发挥基因沉默和基因表达的功能，在实现基因敲除、鉴定基因的生物学特性、研究基因表达与沉默对于细胞生长及相关因子的影响、研究基因表达的调控机制等方面发挥重要作用。细胞迁移与侵袭实验将Transwell小室放入培养板中，小室内称上室，培养板内称下室，上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔，将研究的细胞种在上室内，由于聚碳酸酯膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞，应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜，就可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁

13、移、细胞侵袭等多种方面的研究。细胞迁移实验（对照组）细胞迁移实验（实验组）细胞转染提供原代细胞培养、传代细胞培养以及细胞模型建立等多种细胞学实验方案，如药物干预、小RNA干扰、表达载体转入细胞等，同时提供完善的下游检测，包括免疫蛋白印迹WB、免疫沉淀IP、免疫细胞化学、免疫荧光、RT-PCR、荧光定量PCR、ELSIA检测和细胞增殖与毒性MTT检测、细胞迁移、细胞侵袭、凋亡检测、流式细胞术FCM检测等。成功培养的原代细胞如大鼠间充质干细胞、小鼠子宫平滑肌细胞、人皮肤成纤维细胞、人支气管上皮细胞、大鼠子宫内膜细胞等，具有丰富的原代细胞培养操作经验。公司实验室拥有多种常用细胞株，可随时为你提供低价

14、质优的细胞。细胞增殖与毒性MTT检测细胞增殖与毒性检测MTT检测，原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜MSO）能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。MTT方法用于判断药物、外源性基因、小RNA、蛋白、抗体、细胞因子、血清等对于细胞的作用，以明确上述因子对于细胞生物学行为的影响（如细胞活力、增殖、凋亡等方面）HE与特殊染色提供蜡块包埋制作、组织切片、HE染色，特殊染色、细胞转染、细胞爬片、免疫组织化学I

15、HC,免疫细胞化学ICC、免疫荧光IF、激光共聚焦，凋亡TUNEL染色等形态学方面的实验技术服务，包括实验设计与操作、图片采集，实验结果分析等方面的技术服务。通过多年的合作交流，已建立一批人体各系统正常组织、肿瘤组织蜡块库和近100种常用人、大鼠、小鼠细胞株库存以供选择使用，实验室拥有2000多种常规抗体、信号通路抗体、磷酸化抗体、组化抗体等用于IHC和IF染色，仅收取少量抗体使用费，可以为客户省去抗体购买的费用。您只需要提供检测的组织、细胞和抗体，我们为您完成组织包埋、切片、细胞培养、细胞爬片、染色和图片采集的一站式技术服务。（TUNEL凋亡染色组织切片）（TUNEL凋亡染色细胞爬片）如果您

16、准备开展研究而没有合适的组织、细胞或者检测抗体，敬请来电来函咨询，我们将尽力满足您的要求，让您的课题顺利结题、论文顺利发表。特染）细胞凋亡Tunel检测提供蜡块包埋制作、组织切片、HE染色，特殊染色、细胞转染、细胞爬片、免疫组织化学IHC,免疫细胞化学ICC、免疫荧光IF、激光共聚焦、凋亡TUNEL染色等形态学方面的实验技术服务，包括实验设计与操作、图片采集，实验结果分析等方面的技术服务。通过多年的合作交流，已建立一批人体各系统正常组织、肿瘤组织蜡块库和近100种常用人、大鼠、小鼠细胞株库存以供选择使用，实验室拥有2000多种常规抗体、信号通路抗体、磷酸化抗体、组化抗体等用于IHC和IF染色，

17、仅收取少量抗体使用费，可以为客户省去抗体购买的费用。您只需要提供检测的组织、细胞和抗体，我们为您完成组织包埋、切片、细胞培养、细胞爬片、染色和图片采集的一站式技术服务。如果您准备开展研究而没有合适的组织、细胞或者检测抗体，敬请来电来函咨询，我们将尽力满足您的要求，让您的课题顺利结题、论文顺利发表。完成时间：收到样本后10个工作日激光共聚焦检测提供蜡块包埋制作、组织切片、HE染色，特殊染色、细胞转染、细胞爬片、免疫组织化学IHC,免疫细胞化学ICC、免疫荧光IF、激光共聚焦、凋亡TUNEL染色等形态学方面的实验技术服务，包括实验设计与操作、图片采集，实验结果分析等方面的技术服务。通过多年的合作交

18、流，已建立一批人体各系统正常组织、肿瘤组织蜡块库和近100种常用人、大鼠、小鼠细胞株库存以供选择使用，实验室拥有2000多种常规抗体、信号通路抗体、磷酸化抗体、组化抗体等用于IHC和IF染色仅收取少量抗体使用费，可以为客户省去抗体购买的费用。您只需要提供检测的组织、细胞和抗体，我们为您完成组织包埋、切片、细胞培养、细胞爬片、染色和图片采集的一站式技术服务。如果您准备开展研究而没有合适的组织、细胞或者检测抗体，敬请来电来函咨询，我们将尽力满足您的要求，让您的课题顺利结题、论文顺利发表。激光双色）（激光三色）免疫细胞化学ICC提供蜡块包埋制作、组织切片、HE染色，特殊染色、细胞转染、细胞爬片、免疫

19、组织化学IHC,免疫细胞化学ICC、免疫荧光IF、激光共聚焦、凋亡TUNEL染色等形态学方面的实验技术服务，包括实验设计与操作、图片采集，实验结果分析等方面的技术服务。通过多年的合作交流，已建立一批人体各系统正常组织、肿瘤组织蜡块库和近100种常用人、大鼠、小鼠细胞株库存以供选择使用，实验室拥有2000多种常规抗体、信号通路抗体、磷酸化抗体、组化抗体等用于IHC和IF染色，仅收取少量抗体使用费，可以为客户省去抗体购买的费用。您只需要提供检测的组织、细胞和抗体，我们为您完成组织包埋、切片、细胞培养、细胞爬片、染色和图片采集的一站式技术服务。如果您准备开展研究而没有合适的组织、细胞或者检测抗体，敬

20、请来电来函咨询，我们将尽力满足您的要求，让您的课题顺利结题、论文顺利发表。完成时间：收到样本后10个工作日免疫荧光IF提供蜡块包埋制作、组织切片、HE染色，特殊染色、细胞转染、细胞爬片、免疫组织化学IHC,免疫细胞化学ICC、免疫荧光IF、激光共聚焦、凋亡TUNEL染色等形态学方面的实验技术服务，包括实验设计与操作、图片采集，实验结果分析等方面的技术服务。通过多年的合作交流，已建立一批人体各系统正常组织、肿瘤组织蜡块库和近100种常用人、大鼠、小鼠细胞株库存以供选择使用，实验室拥有2000多种常规抗体、信号通路抗体、磷酸化抗体、组化抗体等用于IHC和IF染色，仅收取少量抗体使用费，可以为客户省

21、去抗体购买的费用。您只需要提供检测的组织、细胞和抗体，我们为您完成组织包埋、切片、细胞培养、细胞爬片、染色和图片采集的一站式技术服务。如果您准备开展研究而没有合适的组织、细胞或者检测抗体，敬请来电来函咨询，我们将尽力满足您的要求，让您的课题顺利结题。免疫组化IHC提供蜡块包埋制作、组织切片、HE染色，特殊染色、细胞转染、细胞爬片、免疫组织化学IHC，免疫细胞化学ICC、免疫荧光IF、激光共聚焦、凋亡TUNEL染色等形态学方面的实验技术服务，包括实验设计与操作、图片采集，实验结果分析等方面的技术服务。通过多年的合作交流，已建立一批人体各系统正常组织、肿瘤组织蜡块库和近100种常用人、大鼠、小鼠细

22、胞株库存以供选择使用，实验室拥有2000多种常规抗体、信号通路抗体、磷酸化抗体、组化抗体等用于IHC和IF染色，仅收取少量抗体使用费，可以为客户省去抗体购买的费用。您只需要提供检测的组织、细胞和抗体，我们为您完成组织包埋、切片、细胞培养、细胞爬片、染色和图片采集的一站式技术服务。如果您准备开展研究而没有合适的组织、细胞或者检测抗体，敬请来电来函咨询，我们将尽力满足您的要求，让您的课题顺利结题、论文顺利发表。载体构建与蛋白表达杆状病毒表达重组蛋白杆状病毒表达重组蛋白昆虫杆状病毒表达系统能有效的弥补大肠杆菌表达系统的缺陷，杆状病毒表达的外源基因产物可以得到各种翻译后修饰，包括磷酸化、糖基化、酰胺化

23、、信号肽切割、二硫键形成等，式表达有功能重组蛋白的理想工具。主要步骤包括重组杆状病毒载体构建、载体和病毒共转染昆虫细胞、筛选重组病毒、病毒滴度放大、小量和大量感染昆虫细胞、获得蛋白。大肠杆菌表达重组蛋白步骤一引物设计、模板提取、基因扩增、载体构建、基因测序。步骤二重组质粒DNA导入感受态细胞，通过SDS或其它检测评定小量表达结果，评估目的蛋白表达量。步骤三大量表达和纯化，并分析表达蛋白。蛋白生产时间3-8周。大肠杆菌表达重组蛋白大肠杆菌表达重组蛋白步骤一引物设计、模板提取、基因扩增、载体构建、基因测序。步骤二重组质粒DNA导入感受态细胞，通过SDS或其它检测评定小量表达结果，评估目的蛋白表达量

24、。步骤三大量表达和纯化，并分析表达蛋白。蛋白生产时间3-8周杆状病毒表达重组蛋白昆虫杆状病毒表达系统能有效的弥补大肠杆菌表达系统的缺陷，杆状病毒表达的外源基因产物可以得到各种翻译后修饰，包括磷酸化、糖基化、酰胺化、信号肽切割、二硫键形成等，式表达有功能重组蛋白的理想工具。主要步骤包括重组杆状病毒载体构建、载体和病毒共转染昆虫细胞、筛选重组病毒、病毒滴度放大、小量和大量感染昆虫细胞、获得蛋白。蛋白与生化实验研究凝胶电泳迁移率实验EMSA凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA-electrophoreticmobilityshiftassay)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的

25、技术，可用于定性和定量分析。当检测如转录调控因子一类的DNA结合蛋白，可用纯化蛋白，部分纯化蛋白或核蛋白提取物。在检测RNA结合蛋白时，依据目的RNA结合蛋白的位置，可用纯化或部分纯化的蛋白，也可用细胞核或胞质提取物。竞争实验中采用含蛋白结合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段(特异)和其它非特异片段，来确定DNA或RNA结合蛋白的特异性。ELSIA与生化指标检测收费标准：ELISA检测1000元/板需要客户提供酶标试剂盒，如需要公司提供请说明。酶活性检测50/样品激酶（如CK、PK、HK）、酯酶、磷酸酶、脱氢酶、合成酶抗氧化/自由基检测50/样品总抗氧化能力T-A0C,超氧化物歧化酶S0D,过氧化氢酶CAT,过氧化物酶POD,丙二醛MDA,还原型谷胱甘肽GSH,NO,NOS,Cox,ROS生化代谢检测50/样品蛋白、氨基酸、糖、脂类完成时