实验室背景总结

1、URO基因(jyn)的功能研究徐艳飞2010.9.19共十七页一、研究(ynji)材料1.拟南芥-作为基础研究的材料【物种名称】阿拉伯芥【中文别名】阿拉伯鼠耳芥、拟南芥、鼠耳芥、阿拉伯草 【拉丁学名】Arabidopsis thaliana 【英文名称】Thale Cress 【科属分类】双子叶植物纲、十字花目、十字花科、拟南芥属【特点】 植株形态个体小，高度只有30cm左右(zuyu) 生长周期短，从播种到收获种子2个月左右 结子多，每株每代可产生数千粒种子 自花授粉植物，基因高度纯合 基因组小，只有5对染色体 全基因组测序完成 共十七页Landsbeg ereca (Ler)col共十七页

2、2.小立碗藓 小立碗藓（Physcomitrella patens） 葫芦藓科，小立碗藓属， 它生长所需营养简单，容易培养； 其配子体在生活史中占优势，对其突变体的表型可以进行直接研究；其核基因组易于与有同源片段的外源DNA发生高频率的同源重组，从而使得精确的基因破坏和基因敲除成为可能，为基因功能的研究提供了良好的材料。 小立碗藓与高等陆生植物有很多相似特点，而小立碗藓的一些特性使得它比其他植物更易于进行分子生物学的研究。小立碗藓在国外已经(y jing)成为植物分子生物学研究的模式生物。 3.小羽藓 苔藓类小叶小羽藓（Haplocladium microphyllum ）（Hedw.） Br

3、oth. ssp. capitatum （Mitt.） Reim.， 以全草入药。 共十七页3.大豆 （Glycine max） 大豆的特点(tdin): 赵惠芳介绍4. 烟草 （Nitotiana tobacum）共十七页 一、研究(ynji)对象 uro突变体 URO基因uro（upright rosette,垂直向上生长(shngzhng)的莲座叶）从T-DNA插入突变体库中筛到的半显性突变体共十七页共十七页 uro突变体的表型总结： 幼苗的生长 ：种子的萌发率降低 下胚轴在伸长早期长于野生型 株型：矮小丛生(cngshng) 顶端优势减弱 叶：叶片上举 偏下性生长 茎：粗 软 束间纤维

4、缺失 皮层细胞发育不足 花：花序数目减少，花的多态性 果：果荚皱缩 颜色较深 共十七页T-DNA插入到URO基因起始编码框前164bp处，导致URO基因过量表达uro突变体的表型正是由于这种过量表达引起(ynq)的而这个URO基因就是At3g23140基因共十七页分析URO基因的表达模式：Ler中：只在花序中检测到URO基因的微弱表达uro突变体中：URO基因的模式发生了改变，整体的表达量上调，最显著的上调出现在茎和花序中。uro突变体这些异常(ychng)的表型可能是由于URO基因的表达模式改变引起的共十七页URO （At3g23140）基因编码植物特有(t yu)的C2H2锌指蛋白亚家族，

5、已经报道的该家族基因主要参与植物各个时期的生长发育，以及环境胁迫下基因的表达调控。URO基因与这个家族的基因有很高的序列同源性共十七页三、URO基因潜在的研究(ynji)价值基础研究价值：1.URO基因影响生长素的代谢平衡 2.URO基因是植物特有的C2H2转录因子家族的成员3.URO基因可能参与乙烯调控的植物生长发育4.URO基因与光形态建成密切相关应用研究价值：5. URO基因可能参与植物抵抗(dkng)干旱胁迫6. URO基因过量表达导致植物的衰老延缓URO基因的功能共十七页共十七页URO基因自身启动子的克隆构建URO基因(jyn)的功能 URO基因的表达特征分析URO基因及其同源基因的

6、功能分析URO基因参与的调控网络URO基因组蛋白甲基化修饰分析uro突变体回复子的筛选植物染色质免疫共沉淀技术 过量表达转基因植株的构建与功能研究 功能缺失转基因植株的构建与功能研究 p35s:URO /pNOS:URO/pYAB3竞争抑制子/dsuro/amiRNAAc/Ds转座子和EMS诱变获得互作基因互作基因的功能分析与生长素/乙烯之间的关系uro突变体与此类突变体之间的杂交三、研究的内容(nirng)与技术路线互作基因的定位图位克隆 mappingURO基因抵抗干旱胁迫机制研究URO基因延缓植物衰老的研究失水率/气孔/ABA/表皮毛/根/生长素黑暗诱导下的叶片衰老衰老相关基因的表达植物

7、延缓衰老的表型特征启动子转化子的获得以及研究共十七页URO同源基因(jyn)的功能小立碗藓/大豆中URO基因的同源基因构建克隆并转化植物拟南芥转化子的表型与特点基因功能相似与否小立碗藓/大豆中的同源基因构建克隆 构建转化入小立碗藓/大豆中 筛出小立碗藓/大豆转基因苗将该基因的功能应用到实际生产生活中大豆(ddu)小立碗藓 进一步验证了该基因的功能共十七页请大家(dji)批评指正！共十七页内容摘要URO基因的功能研究。【中文别名】阿拉伯鼠耳芥、拟南芥、鼠耳芥、阿拉伯草。【科属分类】双子叶植物纲、十字花目、十字花科、拟南芥属。小立碗藓与高等陆生植物有很多相似特点，而小立碗藓的一些特性使得它比其他植物更易于(yy)进行分子生物学的研究。从T-DNA插入突变体库中筛到的半显性突变体。T-DNA插入到URO基因起始编码框前164bp处，导致URO基因过量表达。