毛鸡骨草体外对HBsAg和HBeAg的抑制作用

1、毛鸡骨草体外对HBsAg和HBeAg的按捺作用陈晓白韩余健许潘健甘耀坤王晓平赵仕花【摘要】目的不雅察毛鸡骨草在体外对HBsAg和HBeAg的按捺作用。要领将毛鸡骨草醇提取液与等容量、滴度为164的HBsAg和HBeAg阳性血清混淆,使混淆后毛鸡骨草的浓度别离为96，48，24，12和6g/L，用磷酸缓冲液与164的HBsAg和HBeAg阳性血清混互助空缺比拟。每组6管，37水浴8h和16h后，接纳ELISA法测定HBsAg和HBeAg的D值，不雅察其对HBsAg或HBeAg的按捺作用。结果毛鸡骨草醇提取液对血清中HBsAg和HBeAg均具有按捺作用，可使HBsAg和HBeAg的浓度低落，出现一

2、个显着的量效和时效反响干系。此中毛鸡骨草在作用16h，浓度为96，48g/L时对HBsAg，HBeAg按捺作用最为显着P0.05。结论毛鸡骨草在体外有较显着的抗HBsAg和HBeAg作用。【关键词】毛鸡骨草乙型肝炎外貌抗原HBsAg乙型肝炎E抗原HBeAg按捺鸡骨草AbrusantniensisHane和毛鸡骨草AbrusllisHane为豆科相思子属植物,是常用的中药材，亦是我国出口中草药品种之一1。具有清热解毒、利湿、活血化瘀、舒肝止痛等成果，临床上多以复方入药,可用于黄疸、胁肋不舒、胃脘胀痛、急慢性肝炎、乳腺炎等症，特殊是在肝胆疾病治疗方面应用普及，并获得较好的结果。中国的广东、广西等地

3、有富厚的鸡骨草资源，广西玉林制药有限责任公司消费的保肝护胆良药“鸡骨草胶囊就是以毛鸡骨草为重要质料。为了更好地开拓、利用广西这一富厚的中草药资源，进一步明白毛鸡骨草抗肝炎病毒的作用，为临床治疗病毒性肝炎提供更确切的理论根据，本文接纳体外研究要领，以乙肝病人血清为研究工具，接纳酶联免疫吸附实行(ELISA)技能，不雅察毛鸡骨草在体外对HBsAg和HBeAg的按捺作用。1质料与仪器1.1药物与试剂毛鸡骨草由广西玉林制药有限责任公司提供；HBsAg检测试剂盒酶联免疫吸附试验；ELISA，批号：202206003；HBeAg检测试剂盒酶联免疫吸附试验；ELISA，批号：202208008。HBsAg检

4、测试剂盒和HBeAg检测试剂盒均为北京科卫临床诊断试剂生物技能产物。乙型肝炎病毒外貌抗原HBsAg、乙型肝炎病毒E抗原HBeAg阳性血清6份，由广西玉林市红十字会病院查验科提供。1.2仪器与装备RT2100型酶标仪深圳雷杜生命科学办事公司消费；RE-52A型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)；F100型高速全能破坏机(天津市泰斯特仪器)。2要领2.1毛鸡骨草醇提取液的制备将30g毛鸡骨草粉末放于索氏提取器中，加300l质量分数为0.75的乙醇在90水浴中回流提取3h，取出提取液，再次用300l质量分数为0.75的乙醇在90水浴中回流提取3h，归并提取液，用旋转蒸发仪将提取液浓缩至10l，使样品液

5、浓度为3g/l。2.2ELISA(酶联免疫吸附实行)法定量检测HBsAg和HBeAg参考文献2，3。取乙型肝炎病人血清6份，用磷酸缓冲液PBS按12将血清作倍比稀释，ELISA要领测定原血清及差异稀释度血清样品的HBsAg和HBeAg含量(吸光度：D)，被测血清样品D值阴性血清比拟D值的2.1倍时为阳性血清。选择HBsAg和HBeAg滴度为164的阳性血清各6份。将毛鸡骨草醇提取液的pH值调至7.4，用PBS将毛鸡骨草醇提取液稀释为差异浓度的药液，将差异浓度的药液别离与等容量、滴度为164的阳性血清混淆,使混淆后的血清中毛鸡骨草的浓度别离为96，48，24，12和6g/L，从而分为A组96g/

6、L、B组48g/L、组24g/L、D组12g/L、E组6g/L，用PBS与164血清混互助空缺比拟组，每组6管，即时安排37水浴中，用ELISA法测定各血清样品在8、16h的D值。每份血清各测1次。接纳酶联免疫吸附实行(ELISA)检测，结果以按捺率表现。药物对抗原的按捺率%=1-给药组抗原D值比拟组抗原D值1003结果3.1毛鸡骨草在体外对HBsAg的按捺作用接纳ELISA法，检测毛鸡骨草醇提取液在作用HBsAg滴度为1：64的肝炎血清8，16h后血清中HBsAg的含量。与空缺比拟组比拟力，毛鸡骨草醇提取液与肝炎血清作用8，16h后，毛鸡骨草浓度为6，12，24，48，96g/L时均对乙型肝

7、炎血清中HBsAg均具有按捺作用，可使乙型肝炎血清中HBsAg的浓度低落，且随着药物浓度和作用时间的增长，其按捺作用渐渐加强，出现一个显着的量效和时效反响干系。此中毛鸡骨草在作用16h后、浓度为96、48g/L对HBsAg具有较显着的按捺作用P0.05，按捺率别离为35.7%，29.3%。结果见表1。表1毛鸡骨草在体外对HBsAg的按捺作用略与空缺血清组比力,*P0.05；n=63.2毛鸡骨草在体外对HBeAg的按捺作用接纳ELISA法，检测毛鸡骨草醇提取液在作用HBeAg滴度为164的肝炎血清8,16h后血清中HBeAg的含量。与空缺比拟组比拟力，毛鸡骨草醇提取液与肝炎血清作用8,16h后，

8、毛鸡骨草在质量浓度为6，12，24，48，96g/L时均对乙型肝炎血清中HBeAg具有按捺作用，可使乙型肝炎血清中HBeAg的浓度低落，且随着药物浓度和作用时间的增长，其按捺作用渐渐加强，出现一个显着的量效和时效反响干系。此中毛鸡骨草在作用16h，浓度为96，48g/L对HBeAg具有较显着的按捺作用P0.05，按捺率别离为35.2%，32.4%。结果见表2。表2毛鸡骨草在体外对HBeAg的按捺作用略与空缺血清组比力,*P0.05；n=64讨论乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)引起、以肝脏炎性病变为主的一种熏染性疾玻血清中HBsAg阳性是HBV熏染的标记。HBeAg为HBV复制的紧张指标

9、，存在于乙肝外貌抗原阳性血液中，HBeAg阳性反响病毒复制活泼、熏染性强。如今，国表里医学界治疗乙型病毒性肝炎的抗病毒药物重要有滋扰素和核苷类药物两大类，但其疗效均不敷抱负。探求具有确切有用抗乙肝病毒药物已成为国表里学者研究的热门。我国传统医学博大博识，中医中药在治疗病毒性肝炎方面积聚了富厚的履历并获得了必然的结果。不少中药、中药提取物及中药单体对乙肝病毒均有明显的按捺结果。毛鸡骨草就是如今研究比力多的一类。毛鸡骨草如今已经在临床上普及利用，尤其在慢性病毒性肝病的应用中非常普及，多以复方入药。传统医学以为毛鸡骨草具有清热解毒、利湿、活血化瘀、舒肝止痛等成果，当代药理研究表白鸡骨草有护肝、利胆、

10、抗菌、抗炎、加强免疫作用。本研究以乙肝病人的血清为研究工具，不雅察了毛鸡骨草醇提取液在体外差异浓度和差异时间对HBsAg和HBeAg的按捺作用，结果表白，毛鸡骨草醇提取液对肝炎血清中HBsAg和HBeAg均具有按捺作用，可使肝炎血清中HBsAg和HBeAg的浓度低落，且随着药物浓度和作用时间的增长，其按捺作用渐渐加强，出现一个显着的量效和时效反响干系。此中毛鸡骨草在作用16h、质量浓度为96，48g/L对HBsAg、HBeAg按捺作用最为显着P0.05。药物抗病毒作用的研究要拥有多种，本实行直接接纳乙肝病人阳性血清为研究工具，与临床现实比力贴近。固然体外实行与体内实行的结果有必然的差异，体外实行不克不及完全反响药物体内的真实结果，但此实行，在必然程度上可以说明毛鸡骨草对乙型肝炎病毒有直接的按捺作用。本实行只是从某个角度证实毛鸡骨草抗肝炎病毒的作用，毛鸡骨草对乙肝病毒的作用另有待于接纳差异研究要领、多角度进一步明白。【参考文献】1白隆华,董青松,蒲瑞翎