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文档简介
1、 /19(完整word版)Agilent1260安捷伦高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程Agilent1260(四元泵)高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程(完整word版)Agilent1260安捷伦高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程 /19Agilent1260(四元泵)高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程1目的建立1260(四元泵)高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程,规范人员操作。2适用范匚二)适用于Agilent(四元泵)高效液相色谱仪的使用与维护。3责任与监督检验人员负责执行本规程,部门负责人监督本规程的实施。4规程细则4.1仪器原理高效液相色谱法
2、系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱,对供试品进行分离测定的色谱方法。注入的供试品,由流动相带入色谱柱内,各组分在柱内被分离,并进入检测器检测,由积分仪或数据处理系统记录和处理色谱信号。4.2仪器操作4.2.1系统组成:本系统由四元梯度泵、VWD检测器、自动进样器、柱温箱及OpenlabChemstation工作站和台式电脑等组成。f动逼样器二飢管暉列4.2.2操作前准备:4.2.2.1流动相的选择分类:组成分单组分和多组分极性-极性、弱极性、非极性常用溶剂:甲醇、水、乙腈、乙醇、乙酸乙酯、四氯化碳等。(溶剂最好为HPLC级,水为纯化水)其中多采用二元或多元组合溶剂作为流动相,
3、通过调节各组分的比例改变流动相的极性,已达到最佳的分离效果,对于部分情况还可以加入缓冲盐,调节出峰时间和达到改善峰型的效果。422.2流动相的选择为了除去流动相中的杂质,保护系统和色谱柱,在流动相使用完,装入新的溶剂前应使用抽滤瓶对溶剂进行过滤。4.223流动相的超声与脱气为了除去溶解在流动相中的气泡,降低基线噪音,在HPLC开机前应把各溶剂瓶在超声机中超声10-15min左右。对于溶解在流动相中的极微气体,安捷伦1260HPLC四元泵中集合了脱气机,可以进一步对混合后的流动相进行脱气处理。4.2.2.4流动相冷却流动相在超声机中长时间超声后,由于水分子振动摩擦,使水温上升,因此流动相瓶中的溶
4、剂也会被加热。加热后的流动相进入液相系统和色谱柱后,会影响基线噪声的增加,使平稳时间延长。4.2.3开机与关机4.2.3.11260HPLC及化学工作站开机使用与关机调带就速与紇动柚比的撫毛rA/8/C/Dj遁歩旳丸慮建检决压力4.2.3.2Agilent1260HPLC化学工作站开机步骤打开计算机担SS间規ft、08巴ocnhv二4、匣虽祐便骰強M、U至、至I丽強呱疾喺廿担巴塑-、吕01Hb-K柳ssi、Br蛍辰氷-、喺IKW旺迪m柳-ISWK-Ou占、feFs、00T、(坦阳他垠喺舟旺破近)忑、忑s丽強呱疾喺廿担巴塑、(怎苗疑)Br蛍S4喺比虺-O109CNDU召Vvffi、(胆出迄)ii
5、ifeilS3HPOM證)(完整word版)Agilent1260安捷伦高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程 /1930min左右至基线平稳;单击泵下面的瓶图标,输入溶剂瓶A、B内流动相的实际体积(为保护泵和色谱柱,请按实际体积输入)并勾选“操作项”中的两个对话框,单击“确定”,如果各溶剂瓶溶剂体积小于停泵体积,泵将自动停止。待柱前压力基本稳定后,打开柱温箱,检测器灯(右键点击DAD图标选择控制,打开氘灯);右键点击VWD图标,点击方法,设置VWD信号,设定波长(例如254nm);点击视图/在线信号/信号窗口1,打开监视窗口,观察基线情况;範图一崔羸曲停一俭专童口44.2.4数据采集4.
6、2.4.1采集方法编辑编辑完整方法:从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项,选中除“数据分析”外的三项,单击“确定”进入下一画面。1d=!-f_LC.IVl2巳遵适舒主羽用宰仲底主亲C12)+有乍去切7吝性澄213E;S3E:捱、河扌=卍胡回丁钙片V片辛去佶出冇洼吟1母E畫运吟1啤丹孑5入右沦慟烝右乍去S右斗対匪-QD斗吕煨柱-32TTT俅坤一.右击M口序列包S(V)净户1也_中SJHA)在帥也-运苻氐r违匝卞cd,右法洁SLCD画石完B2右卡去IEL.目定乂字睫渥口tF0vt-aaw.-.3TjSm-H-3=-.鲂吐方壬UZJg启方;去g右去着法启帝去idU看方去(V)-.-.tCTEn右法
7、问75方耐方法信息:在“方法注释”栏中加入(如方法的用途等),单击“确定”进入下一画面。Tlu*泵参数设定:在“流速”处输入方法所需流量(如1ml/min);默认为A为100%,如需二元高压,在“溶剂B”处输入所需比例,则溶剂A=100-B,也可“插入”一行“时间表”编辑二元梯度;在“压力限”处输入柱子的最大耐高压(建议设定200bar)以保护柱子,单击“确定”进入下一画面。VWD检测器参数设定:在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm;在“峰宽(响应时间)下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间(如0.1min(2s);如有特殊要求,也可在“时间表”中可以“插入”一行输入随时间
8、切换的波长(如1min波长=300nm)点击“确定”在“运行时选项表”中选中“数据采集”选项,单击“确定”lfc.la0期屈姑e熾遇旧血电巴竺竺-|j3|.J3_J9V左imaEtaAOiadit9CKHEM32WKTHMKpXjJaATCUHJMFaL-.NDeMQCflLINWALSTST.H1_JMALALMilKOUXjl.MJJDGCMUM匸JMOUXJLMXO1邙.HQJWGMJK弘貝!_JE-3CALH.WQDKHFreTJMUltKPTEST.HfhlIVCCinTCTu*SHQDK-aiFji=dlAM单击“方法”菜单选中“方法另存为”输入方法名(如:阿替洛尔有关物质)单击“
9、确定”cme:JHIUCkU&Litamuj.*ur;rUA1X;KGUoqiPHAWfl:.KT/mqiTAJM5I1.b-Ahh;KTW5TIKFIKrwur?rKLEaHKWH5E:wiKrMMrjrim7iTTKflffnrr-cmzEn3t-暑彌Mi.4洛强H-ZT-SDEJJMl&Xil-I518-12-21单20130307aaaqL_*SLa*wlLipF-EMPhMI-VL1-3里E1-讹齐细口ky.-rd冋nu.-H.-+4R.iI】-/iiir:irdEa-1IM-IisHwr冲DC1J5IDII-j.耳Ih-IJFIlD.M-tE-maS.PIWJiUmJ-iFFIEI
10、14IJlilllllitlii.11-r1阳曲用K仏前w|j?33:Q.lli韵日1SMIiEki-1L*UH1*.UhMJ-ITUfii.UCl饴恥!4T|.bjIi11P阴轴mjMv册p.WtiinnA!EILU.MW!L.EHJNliB.HJ1皐二1i-iWsk.ji-llr11H.jJI441S-J-W*5.Heam|-H_1|g,hi5?la11:1.忙1山IQ_ri;iLi!LILK.|:Ij-!.!:.Ili-i-vHIJI:iWII5!-lIW51M3昌.刊It!JI1dTPUi:厂TMim匚厂亚二血:丁T;恿忙:*1*505w对静風子1.05峯41救&000屈上4.2.6报
11、告打印4.2.6.1从“报告”菜单选择“设定报告”选项。勺亠刁斗宗信巨广1凶津加色谱谿i出仇)浦UJ佯品自定文報滾1样品信見I詐”创潦加谓分克欄o标15皿)潦加兰臼1门IKI礼11:1潦tn优驰自左殳字段:.甘.,二氏习应址寸.6-RI*、SI-J皿in-瑤Tin1IF.TjluI1FP.洽吕嗣ii”.巨佶习就L打印扒闍)咒I4苗瑙|血的i回EWIJ_csvm_ULF足芒in严Iifj圍去肓IF.海T.LIIILSOilIMF(El4.262单击“定量结果”框中“定量”右侧的黑三角选中所采用的的报告方法(如面积外标法等),单击“确定”4.2.6.3从“报告”菜单中选择“打印”则报告打印结果将显
12、示在屏幕上,如想输出至0打印机,eqol人只出伍苗旨柳、U至、忑oLn只圾疾喺%00Iosr-st、苗尼比寸odz.寸皿00t旺M、WUJ、一UJO.-C呱疾匸宁二丛.0粽矗昊担規趺滋06旺怛、胆旺迪噩込modz.寸。施件此械二*劭x-s-_551-Erssau篥3&:*UW2SK.WM合1X.F3SS-KiaHTr_slm335a-i。to岷辰氷苗佟怛苗ng世0心、tefc胆m怛屈0、ng艇呃mte岷T06Z.寸&IWW也8Z.寸。氷比密曲尼+H捱氷mzz.寸T氷UMOPms旺)尼M去辰氷、個M佟、CNZZ.寸oiEi、苗WS.0趺(总2%06槪)总驚旺06旺M、WUJ、一UJ0.IS.0呱烬苗二丛.0粽矗昊担規ftKfi2%ots旺ot旺、后尼氷IZZ.寸(完整word版)Agilent1
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