切花百合离体繁殖与多倍体培育的研究

1、切花百合离体繁殖与多倍体培育的研究百合 (Lilium brownii F.E.Br.var.viridulum Baker)是单子叶植物亚纲百合科 (Liliaceae) 百合属 (Lilium) 多年生球根植物，是世界名花之一，适合用作切花、盆花和园林布景，深受人们的喜爱，具有很高的商业价值和观赏价值。开展多倍体育种，是提高百合观赏品质和抗性的一条非常重要的途径。本研究共有10 个百合供试品种， 以索邦 (Sorbonne) 和提伯 (Tiber) 两个品种为试验材料， 进行了组织培养体系的系统研究， 在其筛选出的最佳培养基上， 探寻其是否能成为适合其余8 个品种的广谱培养基，利用秋水仙素

2、和 Oryzaline诱导得到了四倍体索邦和提伯新种质， 以期得到具有价值的新材料， 为百合的倍性育种奠定基础。百合离体快繁体系的研究结果表明：最佳的外植体消毒方式：鳞片用洗涤剂浸泡10min,自来水冲洗30min, 75%乙醇消毒90s, 0.1 %升汞消 毒13min,无菌水冲洗46次。初代诱导索邦提伯芽分化的最佳培养基均为MS+1.0mg L 6-BA+0.2mg LNAA诱导率达100% ,成芽数为5.0以上。索邦最佳继代增殖的培养基为 MS+1.0mg /L 6-BA+0.1mg/L NAA,其增殖系数为6.25;提伯最佳继代增殖的培养基为 MS+0.5mJL 6-BA+0.2mg/

3、L NAA,增殖系数为 5.0。索邦的最适生根培养基为1/2MS+0.5mgzL IBA,提伯的最适生根培养基为1 2MS+0.2mg L IBA ，植株和根系生长状况良好，生根率为100，移栽成活率 90以上。将郁罗柠(Yelloween) 、红蕊 (Fangin) 、奥塔里 (Aotali) 、肉色杰作(Rousejizuo)、布林迪西(Cordelia)、黑人蒙特(Mome Negro)、多安娜(Pollyanna) 、南川百合(L.rosthornil) 接种在索邦、提伯芽诱导、增殖和生根的最适培养基上， 结果表明： 这 8个品种的鳞片都能在MS+1.0mg L 6-BA+0.2mg/

4、L NAAS养基上诱导出芽，布林迪西、多安娜、肉色杰作的出芽率最高，其次是奥塔里、黑人蒙特、红蕊，出芽率最低的是南川百合和郁罗柠，最低的出芽率均达40%,所以认为MS+1.0mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA可以成为芽诱导百合鳞芽的广谱培养基。MS+1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA是比较适合郁罗柠、红蕊、奥塔里、布林迪西的继代增殖培养，增殖系数能达到 3.2 以上。MS+0.5mg L 6-BA+0.2mg LNAAt匕较适合肉色杰作、多安娜、黑人蒙特、南川百合的继代增殖培养，增殖系数能达到 2.3 以上。MS+1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA MS+0

5、.5mJL 6-BA+0.2mg/L NAA是分别适合这 8 个品种增殖的广谱培养基。1 2MS+0.2mg L IBA 为适合郁罗柠、红蕊、奥塔里、肉色杰作、布林迪西、多安娜生根的广谱培养基，根系多长势好，利于移栽存活。利用秋水仙素溶液和Oryzaline 溶液， 采用浸泡法和混培法， 对索邦提伯进行多倍体的诱导， 两种化学剂以秋水仙素为好， 两种方法中以浸泡法处理效果较好。索邦以0.05 %秋水仙素溶液处理20h效果最好，提伯以0.02 %秋水仙素溶液处理 15h 效果最好，获得的纯合四倍体植株最多，诱导率均为 13.3 。混培法索邦以添加0.1 %的秋水仙素处理15d为好，提伯以添加0.

6、05 %的秋水仙素处理15d 效果最佳，可获得最多的纯合四倍体，诱导率分别为 10.0 和6.7%。索邦以 0.003 % Oryzaline 溶液处理 9h 为好，提伯以 0.003 % Oryzaline溶液处理 6h 效果最好，变异率最高，分别达到了 13.3 和 10.0 。对四倍体和二倍体百合植株进行了外部形态、 气孔、 保卫细胞特性的对比观 察发现：四倍体植株的叶片增厚、叶长变短、叶形指数变小，索邦、提伯的叶厚分别是二倍体的200和162.1 ， 叶长分别是二倍体的 82.8 和 75.8 。 索邦 和提伯四倍体的气孔密度明显下降，分别为二倍体的 58.7 和 71.4 ；保卫细胞增大， 长度分别为二倍体的 142.5 和 156.0 ， 宽度分别为二倍体的 112.6 和 160.8 ；气孔大小较二倍体明显增大，长度为二倍体的 127.6 、 128.1 ，宽度为二倍体的 124.3 、 170.1 。对四