一级反渗透水微生物方法学验证方案(201206)(不写了)(共15页)

1、一级反渗透水微生物方法学验证方案编码：VP/QBV-12-T000-00页码： PAGE 7/7PAGE 头孢呋辛钠无菌检查方法确认方案编码：VP/QMV-T001-00页码： PAGE 3/8项目人员 ItemPersonnel部门/岗位Dept./Position签名Signature日期Date方案起草Prepared byQC/检验员年 月 日 (Y) (M) (D) 方案审核Reviewed byQC/经理 年 月 日 (Y) (M) (D)QA/副经理 年 月 日 (Y) (M) (D)QA/经理年 月 日 (Y) (M) (D)方案批准Approved by质量受权人 年 月 日

2、 (Y) (M) (D)颁发部门Issued byQA生效日期Effective Date 年 月 日 (Y) (M) (D)分发部门Distributed to QC制作备份：1份Copies prepared: 1pcs目 录 TOC o 1-1 h z u HYPERLINK l _Toc312850836 1.概述(i sh) PAGEREF _Toc312850836 h 3 HYPERLINK l _Toc312850837 2.目的(md) PAGEREF _Toc312850837 h 3 HYPERLINK l _Toc312850838 3.依据(yj)及参考文件 PAGE

3、REF _Toc312850838 h 3 HYPERLINK l _Toc312850839 4.验证小组和各部门职责 PAGEREF _Toc312850839 h 3 HYPERLINK l _Toc312850840 5.验证时间安排 PAGEREF _Toc312850840 h 4 HYPERLINK l _Toc312850841 6.确认内容 PAGEREF _Toc312850841 h 4 HYPERLINK l _Toc312850842 7.偏差情况6 HYPERLINK l _Toc312850843 8.变更6 HYPERLINK l _Toc312850844 9

4、.验证结果评价内容6 HYPERLINK l _Toc312850845 附件1 ：培训确认表 PAGEREF _Toc312850845 h 1 HYPERLINK l _Toc312850846 附件2：文件检查确认表2 HYPERLINK l _Toc312850847 附件3 ：设备确认结果3 HYPERLINK l _Toc312850848 附件4 ：试验器材确认结果4 HYPERLINK l _Toc312850849 附件5 ：试验用菌种确认结果4 HYPERLINK l _Toc312850850 附件6：培养基确认结果5 HYPERLINK l _Toc312850851

5、附件7：试剂确认结果5 HYPERLINK l _Toc312850852 附件8：器皿确认结果6 HYPERLINK l _Toc312850853 附件9：细菌、霉菌及酵母菌计数验证结果记录7 HYPERLINK l _Toc312850836 附件10：检验记录81.概述(i sh)本公司(n s)制备的一级反渗透水为饮用水经一次反渗透法制备(zhbi)的制药用水，本方案以中国药典2010年版为依据，参照纯化水微生物限度检验方法进行验证，以证明其方法对一级反渗透水的适用性。方法拟定为：取一级反渗透水2ml置50mlpH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液中，滤干，同法制备2张膜，将滤膜菌面朝上分别

6、贴于营养琼脂培养基和玫瑰红钠琼脂培养基平板上培养，营养琼脂培养基置3035倒置培养3天，玫瑰红钠琼脂培养基置2328倒置培养5天，测定菌数。2.目的根据中国药典2010年版确定一级反渗透水的微生物限度检查方法。3.依据及参考文件3.1中国药典2010年版二部附录 = 11 * ROMAN XI J“微生物限度检查法”3.2中国药品检验标准操作规范2010年版“微生物限度检查法”3.3 SOP-QC-0213-V01微生物限度检查法3.4 SOP-QA-017-V01验证管理规程4.验证小组和各部门职责4.1验证小组及对应职责职位姓名部门具体职责组长林武装QC验证总协调工作，并审核验证的数据组员

7、黄微QC负责验证方案和验证报告的起草，负责验证数据的收集，负责检品的检测与验证记录的填写。辛海安QC负责检品的检测与验证记录的填写。林明凤刘利吴东丹代珊QC监督验证过程实施及验证过程中的偏差及OOS处理。彭艳妃吴东琴QA负责验证方案和验证报告的归档保存。监督验证过程实施及验证过程中的偏差及OOS处理。4.2验证(ynzhng)委员会姓名职务职责颜杰质量受权人1.负责验证方案及报告的批准；2.负责验证过程中出现的偏差/OOS的批准放行。马立如QA经理1.负责验证方案及报告的审核；2.负责验证过程中出现的偏差/OOS的评估。张德志QA副经理5. 验证(ynzhng)时间(shjin)安排时 间工作

8、内容2012年06月方案起草、审批2012年06月2012年07月标准确认、检验方法确认2012年07月完成报告6.确认内容6.1验证前准备6.1.1培训确认本次确认内容是否已对相关人员进行培训，检查确认结果记录在附件1培训确认表。6.1.2文件确认本次确认前确认方案及相关指导的SOP是否已经批准。检查确认结果记录在附件2文件检查确认表。如无相关文件，则需要增加发放。6.1.3仪器设备确认检查所涉及的设备是否符合实验要求，确认结果填写在附件3 设备确认结果中。可接受标准：设备应经确认，在校准有效期内。6.1.4试验器材确认检查所涉用试验器材，确认结果填写在附件4试验器材确认结果中，可接受标准：

9、试验器材各配件应齐全，无损坏。6.1.5试验(shyn)用菌种确认检查所涉及的试验用菌种是否(sh fu)符合实验要求，确认结果填写在附件5 试验(shyn)用菌种确认结果中。可接受标准：菌种形态特征应良好、菌种代数不得超过第五代。6.1.6培养基确认检查所涉及的培养基是否符合实验要求，确认结果填写在附件6 培养基确认结果。可接受标准：营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基应在有效期内，应做培养基适应性检查；因目前中国食品药品检定研究院（原中国药品生物制品检定所）没有改良马丁琼脂对照培养基，所以未对改良马丁琼脂培养基进行适应性检查，此次确认只确认该培养其应在有效期内。6.1.7试剂确认检查所涉用试

10、剂是否符合实验要求，确认结果填写在附件7试剂确认结果中。可接受标准：试剂应在有效期内。6.1.8器皿确认检查所涉用器皿是否符合实验要求。确认结果填写在附件8器皿确认记录中。可接受标准：一般玻璃器皿要求洁净，无破损，量器要进行校准。6.1.9确认用培养基、缓冲液、平皿、刻度吸管应置121湿热灭菌30分钟。6.2验证方法6.2.1 菌液制备：取金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌的新鲜培养物至营养琼脂培养基中经3035培养1824小时、白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁琼脂培养基中经2328培养2448小时，分别加入0.9%无菌氯化钠溶液10ml洗下菌苔转移至空试管中作为菌悬液原液，用0.9%无

11、菌氯化钠溶液进行10倍梯度稀释至含菌数50100cfu/ml的菌悬液。取黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂培养基中经2328培养57天，加入含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液10ml洗下孢子吸出，转移至空试管中作为菌悬液原液，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液进行10倍梯度稀释至含孢子数50100cfu/ml的孢子悬液。6.2.2菌液计数：分别(fnbi)取上述5种菌液1ml（小于100cfu加入(jir)培养皿，注入不超过45营养(yngyng)琼脂培养基或玫瑰红钠琼脂培养基1520ml，每种菌液作平行2个平板，于3035倒置培养247

12、2小时，测定菌数。6.2.3供试液制备：由取样组人员取样，用已灭菌规格250ml的无菌蓝盖瓶取100ml一级反渗透水1瓶。6.2.4细菌、霉菌及酵母菌数回收率测定：验证试验至少应进行3次独立的平行试验，并计算各试验菌每次试验的回收率。要求回收率不低于70%。具体拟定方法如下：6.2.4.1试验组：取一级反渗透水2ml置50mlpH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液中，同时加入1ml试验用菌液（含50100cfu的金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、黑曲霉或白色念珠菌），滤干，每种菌平行制备2张膜，将滤膜菌面朝上贴于营养琼脂培养基或玫瑰红钠琼脂培养基平板上培养，细菌置3035倒置培养2天，霉菌及酵

13、母菌数置2328倒置培养3天，测定菌数。6.2.4.2菌液组：测定所加的试验菌数。6.2.4.3供试品对照组：制备方法同试验组，不加确认菌液。细菌置3035倒置培养3天，霉菌及酵母菌数置2328倒置培养5天，测定菌数。6.2.4.4稀释剂对照组：用相应的稀释液替代供试品，按试验组的制备方法和菌落计数法测定菌数。试验结果：结果见细菌、霉菌及酵母菌计数验证结果记录6.2.4.5结果判断：稀释剂对照组的菌回收率均应不低于70%。若试验组的菌回收率均不低于70%，则可按该供试液制备方法和计数法测定供试品的细菌、霉菌或酵母菌数；若任一次试验中试验组的菌回收率低于70%，需分析原因，采取适当方法重新确认。

14、注：试验组回收率（%）=（试验组平均菌落数供试品对照组平均菌落数）菌液组平均菌落数100%稀释剂对照组回收率（%）= 稀释剂对照组平均菌落数菌液组平均菌落数100%6.2.4.6结果统计 实验结果填写在细菌、霉菌及酵母菌计数验证结果记录。7.偏差情况验证(ynzhng)过程中如果(rgu)有任何偏差应及时记录，分析原因，评价是否是关键偏差，并提出整改措施，并将偏差附于验证(ynzhng)报告中。8.变更验证过程中是否有变更，如有变更在再验证报告中进行说明。9.验证结果评价内容对验证结果进行综合评价，内容包括但不限于：验证实验是否有遗漏；确认验证过程中是否有偏差，偏差是否已经采取纠偏措施和预防措

15、施；验证记录是否完整；是否需要进一步补充实验。评价必须以书面形式写出报告。药液 PAGE 1一级反渗透水微生物方法学验证编码：R/QBV-12-T019-01页码： 1/7附件1 ：培训(pixn)确认表 培训(pixn)确认表培训日期培训人培训对象部门签名黄微代珊QC彭艳妃QC辛海安QC林明凤QC刘利QC吴东丹QC吴东琴QA确认人/日期： QA复核/日期： 药液 PAGE 1一级反渗透水微生物方法学验证编码：R/QBV-12-T019-01页码： 2/7附件2：文件(wnjin)检查确认表文件检查(jinch)确认表文件名称文件编号是否已批准生测室管理规程SOP-QC-005-V00是 否培

16、养基管理规程SOP-QC-017-V01是 否菌种管理规程SOP-QC-012-V01是 否XG1.D型脉动真空灭菌柜使用保养标准操作规程SOP-QC-0343-V01是 否培养箱使用保养标准操作规程SOP-QC-303-V00是 否电子天平使用标准操作规程SOP-QC-317-V00是 否洁净工作台使用保养标准操作规程SOP-QC-304-V00是 否生物安全柜使用保养标准操作规程SOP-QC-0386-V00是 否Haier 药品保存箱使用及保养标准操作规程SOP-QC-0395-V00是 否评价：确认人/日期： QA复核/日期： 一级反渗透水微生物方法学验证编码：R/QBV-12-T01

17、9-01页码： 3/7附件3 ：设备(shbi)确认结果设备(shbi)确认结果设备名称型 号生产厂家及出厂编号校准有效期至确认编号霉菌培养箱MJ-300BS-上海新苗医疗器械制有限公司（0812240005）生化培养箱SPX-300BS-II上海新苗医疗器械制造有限公司（0405011）霉菌培养箱MJ-300BS-上海新苗医疗器械制造有限公司（0812240004）霉菌培养箱MJ-300BS-II上海新苗医疗器械制造有限公司(1005240001)电热恒温培养箱DHP-9162上海一恒科技有限公司（035184）脉动真空灭菌柜XG1.DTX-0.24山东新华医疗器械股份有限公司（080549

18、）脉动真空灭菌柜XG1.DTX-0.36B山东新华医疗器械股份有限公司（20100953）生物安全柜BSC-1600A2苏州安泰空气技术有限公司（J10060420）生物安全柜BSC-1600A2苏州安泰空气技术有限公司（J10060421）生物安全柜BSC-1300A2苏州安泰空气技术有限公司（J10050341）电子天平PB602-N梅特勒-托利多仪器有限公司（1201130089）评价：确认人/日期： QA复核人/日期： 一级反渗透水微生物方法学验证编码：R/QBV-12-T019-01页码： 4/7GE6微生物限度检查方法确认编码：VP/QBV-T086-00页码： 2/7附件4 ：试

19、验器材确认(qurn)结果试验器材确认(qurn)结果名称型 号来 源检查项目及标准检查结果微孔滤膜孔径0.45m，直径50mm杭州高得泰林有限公司完整，无破损封闭式无菌检查薄膜过滤器STV2、STV3型浙江宁海白石药检仪器厂完整，洁净，无破损评价：确认人/日期： QA复核人/日期： 附件5 ：试验(shyn)用菌种确认结果试验用菌种确认结果菌种名称及编号来 源保存方法及条件菌种代数（不得超过第五代）/形态特征金黄色葡萄球菌CMCC（B）26003中国药品生物制品检定所培养基斜面2-8大肠埃希菌CMCC（B）44102中国药品生物制品检定所培养基斜面2-8枯草芽孢杆菌CMCC（B）63501中

20、国药品生物制品检定所培养基斜面2-8白色念珠菌CMCC（F）98001广州市药品检验所培养基斜面2-8黑曲霉CMCC（F）98003广州市药品检验所培养基斜面2-8评价：确认人/日期： QA复核人/日期： 一级反渗透水微生物方法学验证编码：R/QBV-12-T019-01页码： 5/7附件6：培养基确认(qurn)结果培养基确认(qurn)结果培养基名称来 源检查项目及标准批号/有效期至/检查结果玫瑰红钠琼脂培养基北京三药科技开发公司1.应在有效期内2.应做适用性检查营养琼脂培养基北京三药科技开发公司1.应在有效期内2.应做适用性检查改良马丁琼脂培养基北京三药科技开发公司应在有效期内评价：确认

21、人/日期： QA复核人/日期： 附件7：试剂(shj)确认结果 试剂确认结果试剂名称规格来 源检查项目及标准批 号/有效期至pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液250g/瓶北京三药科技开发公司应在有效期内氯化钠500g/瓶广州化学试剂厂应在有效期内新洁尔灭溶液500ml/瓶广东恒健制药有限公司应在有效期内洗必泰5kg/箱锦州九泰制药有限责任公司应在有效期内吐温80500ml/瓶天津市大茂化学试剂厂应在有效期内评价：确认人/日期： QA复核人/日期： 一级反渗透水微生物方法学验证编码：R/QBV-12-T019-01页码： 6/7附件8：器皿(qmn)确认结果 器皿确认(qurn)结果容器名称规格型号

22、检查项目及标准检查结果培养皿9cm洁净，无破损烧杯1000ml、500ml洁净，无破损蓝盖瓶500ml、250ml、100ml洁净，无破损试管18mm180mm、30 mm200mm洁净，无破损刻度吸管10 ml 、5 ml、2 ml、1ml洁净，无破损量筒1000ml 、500ml、100ml洁净，无破损应校准评价：确认人/日期： QA复核人/日期： 一级反渗透水微生物方法学验证编码：R/QBV-12-T000-00页码： 7/8附件(fjin)9：细菌、霉菌(mjn)及酵母菌计数验证结果记录 细菌、霉菌及酵母菌计数验证结果(ji gu)记录检品名称：一级反渗透水 批号： 检验日期： 检验方法：试验菌种菌种编号菌液组（确认加菌数）试验组（检品+确认加菌数）稀释剂对照组（稀释剂+确认加菌数）供试品对照组（检品本底菌数）试验组菌回收率%稀释剂对照组菌回收率%组1组2平均组1组2平均组1组2平均组1组2平均金黄色葡萄球菌大肠埃希菌枯草芽孢杆菌白色念珠菌黑曲霉备注：试验组的回收率（%）=（试验组平均菌落数供试品对照组平均菌落数）菌液组的平均菌落数100%稀释剂对照组的回收率（%）=稀释剂对照组的平均菌落数菌液组的平均菌落数100%回收率应不低于70%结果评定：检验人/日期： 复核人/日期： 一级反渗透水微生物方法学验证编码：R/QBV-12-T000-00页码：