《药理学实验指导》word版

1、药理学实验指导（供临床医学、口腔医学、医学检验、护理学专业用）主 编：张明远 栗 坤 刘 蕾 卢春凤副主编：朱秋双 王丽敏 刘明远 杨 丽主 审：赵玉珍 赵锦程 傅正宗目 录 TOC o 1-2 h z HYPERLINK l _Toc72295251 一、药理实验基本知识与技术 PAGEREF _Toc72295251 h HYPERLINK l _Toc72295252 (一) 药理学实验课的目的和要求 PAGEREF _Toc72295252 h HYPERLINK l _Toc72295253 (二) 常用实验动物的捉拿和给药法 PAGEREF _Toc72295253 h HYPER

2、LINK l _Toc72295254 (三) 实验动物给药量的计算 PAGEREF _Toc72295254 h HYPERLINK l _Toc72295255 二、药理学实验课内容选编 PAGEREF _Toc72295255 h 9 HYPERLINK l _Toc72295256 实验一 水杨酸钠血浆半衰期的测定 PAGEREF _Toc72295256 h 9 HYPERLINK l _Toc72295257 实验二 磺胺类药物在正常与肾衰家兔体内的药代动力学参数测算 PAGEREF _Toc72295257 h 11 HYPERLINK l _Toc72295258 实验三 不同

3、给药途径对异戊巴比妥作用的影响 PAGEREF _Toc72295258 h 14 HYPERLINK l _Toc72295259 实验四 口服与腹腔注射硫酸镁的作用比较 PAGEREF _Toc72295259 h 15 HYPERLINK l _Toc72295260 实验五 药物的相互作用 PAGEREF _Toc72295260 h 16 HYPERLINK l _Toc72295261 实验六 传出神经药物对在体兔肠的作用 PAGEREF _Toc72295261 h 17 HYPERLINK l _Toc72295262 实验七 传出神经药物对离体兔肠的作用 PAGEREF _T

4、oc72295262 h 18 HYPERLINK l _Toc72295263 实验八 烟的毒性实验 PAGEREF _Toc72295263 h 20 HYPERLINK l _Toc72295264 实验九 有机磷药物中毒及其解救 PAGEREF _Toc72295264 h 21 HYPERLINK l _Toc72295265 实验十 新斯的明对琥珀胆碱和筒箭毒碱肌松作用的影响 PAGEREF _Toc72295265 h 22 HYPERLINK l _Toc72295266 实验十一 传出神经药物对兔眼瞳孔的作用 PAGEREF _Toc72295266 h 23 HYPERLI

5、NK l _Toc72295267 实验十二 传出神经药物对狗血压的影响 PAGEREF _Toc72295267 h 24 HYPERLINK l _Toc72295268 实验十三 心得安对抗肾上腺素对蛙心受体的兴奋作用 PAGEREF _Toc72295268 h 26 HYPERLINK l _Toc72295269 实验十四 普鲁卡因的阻断麻醉作用 PAGEREF _Toc72295269 h 28 HYPERLINK l _Toc72295270 实验十五 普鲁卡因的椎管麻醉作用 PAGEREF _Toc72295270 h 29 HYPERLINK l _Toc72295271

6、实验十六 丁卡因与普鲁卡因表面麻醉作用的比较 PAGEREF _Toc72295271 h 30 HYPERLINK l _Toc72295272 实验十七 药物的抗电惊厥作用 PAGEREF _Toc72295272 h 31 HYPERLINK l _Toc72295273 实验十八 巴比妥类药物对药物性惊厥的影响 PAGEREF _Toc72295273 h 32 HYPERLINK l _Toc72295274 实验十九 士的宁惊厥作用部位分析 PAGEREF _Toc72295274 h 33 HYPERLINK l _Toc72295275 实验二十 钙镁拮抗作用 PAGEREF

7、_Toc72295275 h 34 HYPERLINK l _Toc72295276 实验二十一 地西泮对小鼠激怒反应的影响 PAGEREF _Toc72295276 h 35 HYPERLINK l _Toc72295277 实验二十二 药物的镇痛作用（热板法） PAGEREF _Toc72295277 h 36 HYPERLINK l _Toc72295278 实验二十三 药物的镇痛作用（扭体法） PAGEREF _Toc72295278 h 38 HYPERLINK l _Toc72295279 实验二十四 尼可刹米对中枢性呼吸抑制的解救 PAGEREF _Toc72295279 h 3

8、9 HYPERLINK l _Toc72295280 实验二十五 利多卡因对氯化钡诱发大鼠心律失常的治疗作用 PAGEREF _Toc72295280 h 40 HYPERLINK l _Toc72295281 实验二十六 强心甙对在体蛙心的作用 PAGEREF _Toc72295281 h 41 HYPERLINK l _Toc72295282 实验二十七 强心甙对离体蛙心的作用（斯氏法） PAGEREF _Toc72295282 h 42 HYPERLINK l _Toc72295283 实验二十八 正常心血管功能的调节和急性心力衰竭 PAGEREF _Toc72295283 h 44 H

9、YPERLINK l _Toc72295284 实验二十九 呋塞米对家兔的利尿作用 PAGEREF _Toc72295284 h 47 HYPERLINK l _Toc72295285 实验三十 硫酸镁的导泻作用机制分析 PAGEREF _Toc72295285 h 48 HYPERLINK l _Toc72295286 实验三十一 药物对家兔离体子宫的作用 PAGEREF _Toc72295286 h 49 HYPERLINK l _Toc72295287 附录 PAGEREF _Toc72295287 h 50一、药理实验基本知识与技术(一)药理学实验课的目的和要求药理学既是理论科学，又是

10、实践科学。药理学实验课是药理学教学的一个重要组成部分。它的目的一方面是验证理论，巩固并加强对理论知识的理解；另一方面是学习和掌握药效学与药代动力学实验的基本操作方法和技能，培养对科学工作严肃的态度，严密的方法、严格的要求及科学的思维方式，学习实验设计及实验数据统计处理的有关知识，初步具备客观地对药理学实验现象进行观察、比较分析、综合和解决实际问题的能力。从而更深入、准确地理解和掌握药理学基本知识，指导临床合理用药；并为研究开发新药、发现药物新用途，为其他生命科学的研究探索奠定初步基础。药理实验包括进行实验操作，观察和记录实验现象，整理实验结果和写出实验报告等环节。为了提高实验效果，实验前应做好

11、预习，明确本次实验目的、方法步骤和原理，做到心中有数，避免实验中出现忙乱和差错。实验过程中要在教师指导下加强培养独立操作能力，克服对教师的依赖性。通过实验操作要求在生理生化实验的基础上掌握常用实验动物的捉持、固定和给药方法，掌握药物剂量换算和常用实验动物麻醉方法，学会观察记录主要生理生化指标，掌握注射器、天平、磅秤、多导仪及CAI等用法，掌握以动物或其离体器官、组织为实验对象的外周神经系统药物实验法、中枢神经系统药物实验法、内脏系统药物实验法等主要实验方法以及药代动力学的基本实验方法。为达到上述目的，要求做到下列事项：实验前 1、仔细阅读实验指导，了解实验的目的、要求、方法和操作步骤，领会其设

12、计原理；2、结合实验内容，复习有关药理学和生理学、生化学等方面的理论知识，达到充分理解；3、估计实验中可能出现的情况和发生的问题。实验时 1、严格按照实验指导上的步骤进行操作，准确计算给药量，防止出现差错造成实验失败；2、认真、细致地观察实验过程中出现的现象，随时记录药物反应的出现时间、表现以及最后结果，联系理论内容进行思考；3、实验过程中要注意节约药品及实验材料，避免造成浪费。实验后 1、认真整理实验结果，经过分析思考，写出报告，按时交给指导教师；2、整理实验器材，洗净擦干，妥为安放。将实验后的动物按要求放到指定地点，课后认真做好实验室的清洁卫生工作。(二)常用实验动物的捉持和给药法1、青蛙

13、、蟾蜍通常以左手握持，用食指和中指夹住左前肢，用拇指压住右前肢，用右手协助将两后肢拉直，左手的无名指和小指将其压住固定。淋巴囊内注射法：蛙的皮下有数个淋巴囊（图1），一般多选胸、腹或股淋巴囊给药。胸部淋巴囊注射时应将针头插入蛙口腔，由口腔底部穿过下颌肌层而达胸部皮下；腹部淋巴囊注射时针头从蛙大腿上端刺入，经大腿肌层入腹壁肌层，再浅出进入腹部皮下，即进入淋巴囊，然后注入药液。 图1 蛙的皮下淋巴囊 1、颌下囊 2、胸囊 3、腹囊 4、股囊 5、胫囊 6、侧囊 7、头背囊 图2 小鼠灌胃法2、小鼠右手提起鼠尾，放在粗糙物（如鼠笼）上面，轻轻向后拉其尾，此时小鼠前肢抓住粗糙面不动；用左手的拇指和食指

14、捏住其头部皮肤和双耳；其余三指和掌心夹住其背部皮肤及尾部。这样小鼠便可被完全固定在手中。灌胃（po）：将小鼠固定后，右手持装有灌胃针头的注射器，自口角处插入口腔，沿上腭插入食道（图2）。如遇阻力，可将灌胃针头抽出再另插，以免穿破食道或误入气管，造成动物死亡。灌注量一般为0.10.2ml/10g，不超过0.5ml/只。肌内注射（im）：两人合作，注射部位多选后腿上部外侧。一处注射量不超过0.1ml。腹腔注射（ip）：左手将小鼠握持固定，使其腹部朝上。右手持注射器，取300角从下腹部外侧向头端刺入腹腔，进针部位不宜太高，刺入不能太深。注射量0.050.2ml/10g，不超过0.5ml/只。静脉注射

15、（iv）：将小鼠置于固定筒内，使其尾巴露在外面，用70%酒精涂擦尾部，或将鼠尾浸入50水中。待尾部静脉扩张后，左手拉住尾尖，右手进针，注射量不超过0.5m/只。3、大鼠捉持固定法基本与小鼠相同。因大鼠体积大，捉持固定时难一些。先将大鼠放在粗糙物上，向后轻轻拉其尾，使其不动，再用拇指、食指捏住头颈部皮肤后，其余三指和手掌固定鼠体，使其头、颈、胸、腹呈一直线。如果未抓紧，动物头部尚能转动，可用另一手帮助捏紧其头颈皮肤重新固定。灌胃、腹腔注射、腹部皮下注射均可一人操作。尾部静脉注射与小鼠注射法相似，但较困难。也可将大鼠腹股沟切开，从股静脉注射药物。每只大鼠用药量为小鼠的23倍。4、豚鼠先用手掌以稳准

16、的手法迅速扣住豚鼠背部，抓住其肩胛上方，将手张开，用手指握住颈部，或握住身体的四周，再拿起来，怀孕或体重较大的豚鼠，应以另手托住其臀部。豚鼠腹腔、皮下及肌内注射法基本同小鼠。5、家兔一手抓颈背部皮肤，轻轻将兔提起，另一手托其臀部，根据需要将兔固定为各种姿势。灌胃：二人合作，一人取坐位，用两腿夹持免身，一手握兔双耳，另一手抓住兔两前肢，另一人将开口器横插入兔口内，并向后翻转几下，使兔舌压住并固定之。将胃管（导尿管）从开口器中央孔插入口内，再慢慢地插入食道和胃。插管时感觉顺利，动物不挣扎也无呼吸困难出现，表示胃管在胃内。为慎重起见，将胃管外端放入水中，如未见气泡出现，即证明在胃内。然后将药液注入胃

17、内（图3）。灌注量一般为10m1/kg。如有兔固定箱一人也可操作。耳缘静脉注射：将兔置于固定箱内固定（或由一人固定），用洒精棉球涂擦兔耳，或用手指弹兔耳，使局部血管扩张。用左手拇指和中指捏住兔耳尖，以食指垫在兔耳拟进针部位的下面，右手持注射器从近耳尖处将针头刺入血管，并以左手将针头固定在兔耳上，然后注入药液。如已注入血管，推药时则畅通无阻；如推注时有阻力，局部肿胀变白，表明针头不在血管内，须拔针重新穿刺。注射量不超过2m1/kg，等渗液可达10m1/kg。 图3 家兔灌胃法 图4 犬后肢静脉注射法皮下、肌内、腹腔注射的基本方法与鼠类相同，选用的针头可以大些。给药的最大容量分别为0.5ml、1.

18、0ml和5.0ml/kg。6、犬一人用长柄钳式捕犬夹夹犬颈，另一人将犬嘴绑住。绑嘴方法：先将绳带从嘴下面绕上来，在鼻子上面打一结，再将绳带绕到嘴下面打一结，然后将绳带拉倒耳后颈部打结固定。犬在手术台上的固定方法：将犬仰卧在手术台上，四肢拴上绳带，将两前肢的绳带从背后交叉递向对侧，并压住对侧上肢，再将绳带拉紧固定于台边上；后肢平行固定在台边即可。如果是麻醉犬，需要解开绑嘴带，将舌头拉出嘴外以防窒息。腹腔注射：犬被夹住后，用力将犬的颈、头部压在地上，一人提起一侧后肢并将药液注入腹腔。静脉注射；多从后肢外侧小隐静脉或前肢皮下头静脉注射。注射前，先局部剪毛，并由一人用力压迫静脉近心端，使静脉充血扩张，

19、另一人进行注射，针管内见有回血，表示针头在静脉内，解除对静脉近心端的压迫，即可推注药物（图4）。(三)实验动物给药量的计算药量单位药量的基本单位是克(g)，有时亦用毫克(mg)、微克(g)、毫微克(ng)及微微克(g)。换算关系是:1g=103mg=106g药量的基本容量单位是毫升(ml)，有时亦用到升(L)及微升(l)。换算关系是：1L=103ml=106l。给药容量注射用药前应首先考虑该种动物在特定注射途径所能允许的最大容量（ml），只有确定容量之后才能决定溶液配成多大浓度合适。通常，动物血容量约占体重的1/13左右，静脉注射药液容量过大，可能影响到循环系统正常功能，故静脉注射容量最好在体

20、重的1/100以下，静脉外（皮下，肌内及腹腔）注射容量最好在体重的1/40以下。如一只20g体重的小白鼠，尾静脉注射不宜超过0.2ml，肌内、皮下、腹腔等部位注射不宜超过0.5ml。药物浓度药物浓度是指定量液体或固体制剂中所含药物的份量，常用的液体制剂有以下几种表示方法：1百分浓度 以每一百份溶液中所含药物的份数来表示，简写成%。（1）重量/容量（W/V）法：表示每100ml溶液中含有药物的克数，如5%葡萄糖，是指100ml溶液中含有5g葡萄糖。（2）容量/容量（V/V）法：适用于液体药物的配制，表示100ml溶液中含有药物的ml数，如75%乙醇即100ml溶液中含无水乙醇75ml。2比例浓度

21、 用来表示稀溶液的浓度，如1:10000肾上腺素溶液即指0.01%肾上腺素溶液（1ml溶液中含0.1mg肾上腺素）。3摩尔/升（mol/L）浓度 是指1L溶液中所含溶质的摩尔质量数，称为该溶液的摩尔/升浓度，如0.1mol/LNaCl溶液表示1L溶液中含有0.1摩尔，即5.844gNaCl（NaCl分子量为58.44）。剂量换算动物实验所用药物剂量，一般以mg/kg（有时也以g/kg）计算，给药时需从已知药物浓度换算成相当于每kg体重（为方便起见，大鼠、豚鼠也可按100g体重，小鼠、蟾蜍可按每10g体重）应该注射的药液量（ml）。有时则需根据药物剂量和给药容量计算出合适的药物浓度，有时还需进行

22、浓度间（如百分浓度和摩尔浓度间）换算，以便进行分析和计算。1由药物剂量mg/kg及药液百分浓度换算成每kg体重注射药量（ml），进而计算出每只动物应注射多少ml药液。例：小白鼠体重22g，腹腔注射吗啡10mg/kg，药物浓度0.1%，应注射多少ml？计算方法：0.1%的盐酸吗啡溶液每ml含药物1mg，10mg/kg相当于10ml/kg，小鼠22g体重换算成0.022kg，10ml/kg0.022kg=0.22ml。为计算方便，上述10mg/kg首先换算成0.1ml/10g，小白鼠体重改写成2.210g，0.1ml/10g2.210g=0.22ml。2由药物剂量mg/kg和设定的药液容量ml/k

23、g，计算应配制药物浓度。例：家兔静脉注射吗啡10mg/kg，注射容量1ml/kg，应该配制的药液浓度是多少？计算方法：10mg/kg相当于1ml/kg，1ml药液应该含10mg吗啡，1：10=100：X，X=1000mg=1g，故应配成的药液浓度为100ml含1g，即1%盐酸吗啡。3百分浓度与摩尔浓度间换算：例：0.5%盐酸组胺相当于多少摩尔/升浓度？计算方法：依公式M=10X/W，式中M为摩尔/升浓度，X为百分浓度中%左侧的数字（即100ml药液中药物的克数），W为药物的分子量，已知X为0.5、W=184.1，代入公式M=100.5/184.1=2.7102，所以0.5%盐酸胺组织溶液的摩尔

24、浓度相当于2.7102mol/L。二、药理学实验课内容选编实验一 水杨酸钠血浆半衰期的测定【目的】了解用比色法测定水杨酸钠血浆浓度和计算其半酸期的方法。【动物】兔1只。【药品】10%及0.02%水杨酸钠、10%三氯醋酸、10%三氯化铁、0.5%肝素、20%乌拉坦，蒸馏水。【器材】10ml试管、试管架、吸管（0.5、1.0、5.0ml），5ml注射器、针头、玻璃记号笔、吸球、721分光光度计、离心机、兔手术台、计算器。【方法】参见表2-1测定步骤进行：1取4支试管编号后各加10%三氯醋酸溶液3.5ml表2-1 水杨酸钠血药浓度测定步骤试管（编号）10%三氯醋酸（ml）血（ml）蒸馏水（ml）0.

25、2%水杨酸钠（ml）10%三氯化铁（ml）光密度K值药物浓度（g/ml）对照管13.51.01.00.5标准管23.51.01.00.5给药管33.51.01.00.5给药管43.51.01.00.52取家兔1只，称重后耳缘静脉注射乌拉坦1g/kg麻醉，仰位固定于兔手术台上。分离出气管后插入气管插管。分离出一侧颈动脉（或股动脉），用经0.5%肝素润湿过内壁的注射器从颈动脉（或股动脉）取血2.0ml，分别置于1号管和2号管内各1.0ml，摇匀静置。3由耳缘静脉缓慢注射10%水杨酸钠2.0ml/kg。给药后10分钟和60分钟各取血1.0ml，分别置入3号管和4号管内，摇匀静置。41、3、4、号管内

26、各加入蒸馏水1.0ml，2号管内加入0.2%水杨酸钠1.0ml，摇匀。5将4支试管离心5分钟（15003000rpm），使血浆蛋白沉淀。6取4支试管编号，将离心后的上清液一次性倒入相应编号的试管中，从中准确吸取3.0ml分别置入相应编号的另外4支试管中，每管再各加入10%三氯化铁溶液0.5ml，摇匀显色。7以1号管为对照管，用分光光度计在波长520nm处测定其余3管的光密度值。由2号管光密度值（Y2）和浓度（X2已知）求比值K，即K=，再根据X=KY，由Y3和Y4，求得X3和X4，根据下式求t1/2：t1/2=式中X3和X4分别为给药后10分钟和60分钟的血药浓度，t为两次取血间隔时间（50分

27、钟）。【结果】将实验结果填入上表中，并根据实验结果计算半衰期。【注意事项】1操作必须准确，否则不仅计算出的半衰期不准确，而且有可能出现负值。2取血方法也可采取不麻醉家兔而直接从心脏或耳缘静脉取血。【思考题】测定药物的t1/2有何临床意义？实验二 磺胺类药物在正常与肾衰家兔体内的药代动力学参数测算【目的】1了解磺胺类药物在正常与肾功能衰竭的动物体内随时间变化的代谢规律，并掌握药代动力学参数的拟合与计算方法。2掌握药代动力学对于临床用药的意义和重要性。【实验原理】磺胺类药物能与某些试剂发生反应生成有色物质，通过比色法可以对磺胺类药物血浓度进行定量分析。磺胺类药物在酸性环境下使其苯环氨基（NH2）离

28、子化生成铵类化合物（NHJ），与亚硝酸钠发生重氮化反应生成重氮盐（NN一）。该化合物在525nm波长下比色，其光密度与磺胺类药物浓度成正比。【实验动物】健康成年家兔2只，体重2.03.0kg。【药品与试剂】1HgCl2溶液、0.9NaCl溶液、1普鲁卡因、0.3肝素钠溶液、10%磺胺二甲嘧啶（sulfamethazine，SM2）或以等浓度的磺胺嘧啶（su1fadiazine，SD）、磺胺噻唑（sulfathiazo1e，ST）、磺胺甲基异恶唑（sulfamethoxazole，SMZ）代替，7.5%三氯醋酸，0.1%SM2标准液，0.5%亚硝酸钠，0.5%麝香草酚（用20NaOH配制），0.

29、3%肝素（用生理盐水配制），20%乌拉坦或1%盐酸普鲁卡因，蒸馏水。【实验器材】752型分光光度计、离心机、婴儿秤、手术器材1套、动脉夹、硅胶管、家兔手术台、注射器（5ml、10ml、20ml）及针头、吸管（0.1m1、0.2m1、0.5m1、1ml、2ml、5ml）、吸球、离心管、试管架、半对数坐标纸、玻璃记号笔、药棉、纱布、具有回归功能的计算器或进行程序处理的微型计算机。【方法与步骤】1家兔肾功能损伤模型的建立实验前1d（1828h）进行，取家兔2只，称重后1只皮下注射1Hg Cl2溶液1.2mlkg体重，造成急性肾功能衰竭动物模型；另1只则在相同部位注射等容量的生理盐水作为正常对照。2药

30、动学实验（1）血中药物浓度测定：参见表2-2测定步骤进行。麻醉全麻或局麻均可。取正常或肾功能损伤的家兔1只（实验前禁食12h，不禁水），记录体重和性别，耳缘静脉注射20%乌拉坦（5mlkg体重）麻醉，仰位固定于家兔手术台上，或以1%的盐酸普鲁卡因做手术区浸润麻醉。手术：可选用颈总动脉或股动脉。手术区剪毛，切皮约6cm，钝性分离皮下组织和肌肉，分离出动脉23cm，在其下穿2根丝线，结扎远心端，保留近心端。耳缘静脉注射0.3%肝素1m1kg体重。插管：用动脉夹夹住动脉近心端，再于两线中间的一段动脉上剪一V形切口，插入硅胶管（己肝素化），用线结扎牢固，以备取血用。取血：打开动脉夹放取空白血样0.4m

31、1，分别放入1号管（对照管）和2号管（标准管）各0.2m1，摇匀静置。尔后静注10%SM23m1kg，分别于注射后1、3、5、15、30、45、60、90、150min时由动脉取血0.2ml，加到含有7.5%三氯醋酸2.7ml的试管中，摇匀。标准管中加入0.1SM2标准液0.1ml，其余各管加蒸馏水0.1ml，摇匀。显色：将上述各管离心5min（15003000rpm），取上清液1.5m1，加入0.5%亚硝酸钠0.5ml，摇匀，再加入0.5%麝香草酚1ml，摇匀后为橙色。测定：于分光光度计上在525nm波长下测定各样品管的光密度值。计算血中药物浓度：根据同一种溶液浓度与光密度成正比的原理，可用

32、空白血样标准管浓度及其光密度值求算出其他样品管的磺胺药物浓度。公式如下：样品管光密度（OD）标准管光密度（OD）样品管浓度（gml）标准管浓度（gml）样品管浓度（gml）样品管光密度（OD）标准管光密度（OD）（标准管浓度（gml）将计算所得数据填入表2中。表2-2 磺胺类药物血药浓度测定的步骤试 管 编 号标准 管对照 管给药 后1min3 min5 min15 min30 min60 min90 min150min7.5%三氯醋酸（ml）2.72.72.72.72.72.72.72.72.72.7血样（ml）0.20.20.20.20.20.20.20.20.20.2蒸馏水（ml）0.1

33、0.10.10.10.10.10.10.10.1标准液（ml）0.1充分摇匀 离心5min 取上清夜1.5ml0.5%亚硝酸钠（ml）0.50.50.50.50.50.50.50.50.50.50.5%麝香草酚（ml）1.01.01.01.01.01.01.01.01.01.0光密度（OD）浓度（gml）（2）药动学参数求算：列表：SM2药时数据表时间（t） 实测浓度（C） 外推浓度（C） 剩余浓度（C）（min） （gml） （gml） （gml）作图：在半对数坐标纸上以时间（t）为横坐标，实测浓度的对数值（lgC）为纵坐标，将所得数据在坐标纸上作点连线，可得到二房室模型特征性药时曲线。计算

34、药时曲线方程式：同二房室模型。计算药代动力学参数：同二房室模型。【结果与处理】自行作图与列表，然后求算药代动力学参数。【注意事项】1每次取血前要先将插管中的残血放掉。2每吸取一个血样时，必须更换吸管，若只用一支吸管时，必须将其中的残液用生理盐水冲净。3将血样加到三氯醋酸试管中应立即摇匀，否则易出现血凝块。4可用静脉血取代动脉血，但静脉取血的缺点是有时因静脉不充盈而取不出血。可以用灯泡加温、涂抹二甲苯等方法刺激静脉使之充盈。另外，取血时间无保证易使结果不准确。【思考题】1一次静脉注射后的药时曲线能反映哪些与药代动力学有关的基本概念？2房室模型的涵义是什么？3说明实验中所求的药动学参数的意义。实验

35、三 不同给药途径对异戊巴比妥作用的影响【目的】观察不同的给药途径对药物作用快慢的影响，掌握小白鼠的灌胃法、皮下注射及尾静脉注射法。【动物】小鼠4只。【药品】1%amobarbital（异戊巴比妥）。【器材】大烧杯、天平、1ml注射器、小鼠灌胃器。【方法】取小鼠4只称重、编号，观察正常活动、呼吸状况及翻正反射后，分别给予1%amobarbital溶液0.1ml/20g，甲鼠灌胃，乙鼠皮下注射，丙鼠腹腔注射，丁鼠尾静脉注射。观察、记录作用发生的时间，并比较4鼠给药后表现有何不同。【结果】鼠号体重剂量给药途径给药时间翻正反射消失时间甲乙丙丁实验四 口服与腹腔注射硫酸镁的作用比较【目的】观察硫酸镁口服

36、与注射给药的作用有何不同，掌握硫酸镁口服与注射给药对机体的作用。【动物】小鼠2只。【药品】12%MgSO4。【器材】大烧杯、天平、1ml注射器、小鼠灌胃器。【方法】取小鼠2只，1只由腹腔注射12%MgSO4（含水）0.1ml/10g（1.2g/kg），另一只灌胃给予同样剂量（1.2g/kg）的MgSO4。观察并记录动物出现的症状。【注意事项】被灌胃给药的小鼠如果也出现抑制，甚至呼吸麻痹而死亡，系由技术操作失误，可能是将灌胃针头穿透食管或胃脏，使MgSO4进入胸腔或腹腔所致。应及时补作。实验五 药物的相互作用【目的】通过实验，认识联合用药时药物的协同作用和拮抗作用。【动物】小鼠5只。【药品】0.

37、05%地西泮溶液，0.1%戊巴比妥钠溶液，0.05%回苏灵溶液。【器材】1ml注射器，铁丝鼠笼。【方法】取性别、体重相近的小鼠5只，编号、称重，然后分别给药：1号鼠腹腔注射地西泮0.1mg/10g（0.05%溶液0.2ml/10g）。2号鼠皮下注射戊巴比妥钠0.2mg/10g（0.1%溶液0.2ml/10g）。3号鼠先腹腔注射地西泮0.1mg/10g（0.05%溶液0.2ml/10g），10min后再皮下注射戊巴比妥钠0.2mg/10g（0.1%溶液0.2ml/10g）。4号鼠皮下注射回苏灵0.1mg/10g（0.05%溶液0.2ml/10g）。5号鼠先腹腔注射地西泮0.1mg/10g（0.0

38、5%溶液0.2ml/10g），10min后再皮下注射回苏灵0.1mg/10g（0.05%溶液0.2ml/10g）。将5鼠分置铁丝鼠笼中，比较所出现的药物反应及最终结果。给小鼠预先注射地西泮，对于戊巴比妥钠和回苏灵的药理作用各有何影响？编号性别体重(g)第一次给药第二次给药两药相互作用类型药名及剂量给药后反应药名及剂量给药后反应1 2345【思考题】联合用药的临床意义有哪些？实验六 传出神经药物对在体兔肠的作用【目的】观察并分析作用于传出神经系统药物对肠平滑肌的作用。【动物】家兔1只。【药品】10%乌拉坦，0.9%NaCl，1%atropine，0.1%pilocarpine nitrate，0

39、.5%physostigmine salicylate。【器材】兔手术台、婴儿秤、手术刀、剪刀、1ml、2ml、20ml注射器、针头、蛙心夹、手术线、缝合针、镊子、试管夹、兔肠管悬吊固定套管、支架、张力换能器、BL-420生物机能实验系统。【方法】取兔1只，称重，10%乌拉坦10ml/kg耳缘静脉麻醉后，仰卧固定于兔台上，沿腹正中线切口，长约5cm，剖开腹腔，选取一段长约10cm的空肠，于两端肠系膜无血管处各穿一小孔，经此二孔用手术线结扎这段肠管的两端，两端固定在套管上，再将套管用试管夹固定于支架上，将连有长线的蛙心夹夹住结扎肠管段的中间，线的另一端与张力换能器的受力片相连。固定好换能器的位置

40、，按步骤进行操作：将换能器的输入端插头与BL-420系统前面板“1通道”（或2、3通道）输入接口接好，用鼠标选择“输入信号”菜单中的“1通道” （或2、3通道）菜单项，以弹出“1通道” （或2、3通道）子菜单，在“1通道”（或2、3通道）菜单中选择“张力”信号，用鼠标单击工具条上的“启动波形显示”命令按钮，或者从“基本工能”菜单中选择“启动波形显示”命令项，此时“1通道”（或2、3通道）显示窗口可有肠平滑肌蠕动波形显示，根据窗口中显示的波形，再适当的调节实验参数，以获取最佳的实验效果（也可以将用鼠标选择“输入信号”改成选择“实验项目”菜单中的“消化实验”菜单项，以弹出“消化实验”子菜单，在消化

41、实验子菜单中选择“消化道平滑肌运动”）。描记正常肠管蠕动波形后，由耳缘静脉注射下列药物：0.1%pilocarpine nitrate 0.1ml/kg，描记一段蠕动波形。0.1%atropine 0.1ml/kg，描记肠管蠕动曲线。0.5%physostigmine salicylate 0.1ml/kg，观察肠蠕动波形有何变化。【结果】根据需要可进行描记图形的记录，剪辑粘贴打印后进行实验结果分析。【注意事项】1处理肠管时操作要轻柔。2勿损伤肠系膜血管。3实验中可同时观察瞳孔、唾液分泌等变化。此实验也可用二道生理记录仪进行实验，动物实验操作方法同上，实验用仪器改用二道生理记录仪，张力换能器的

42、输入端插头插入仪器FD2功能放大器输入插孔，调节好仪器各有关部位（由教师课前调好）后，描记一段正常肠管蠕动曲线后，按上述给药顺序进行给药。实验七 传出神经药物对离体兔肠的作用【目的】学习离体平滑肌器官的实验方法，观察拟胆碱药和抗胆碱药、拟肾上腺素药和抗肾上腺素药对离体兔肠的作用。【动物】家兔1只。【药品与试剂】0.001%氯化乙酰胆碱溶液、0.1%硫酸阿托品溶液、0.002%盐酸肾上腺素溶液、0.3%盐酸普萘洛尔溶液、0.001%甲基硫酸新斯的明溶液、台氏（Tyrode/s）液。【器材】麦（Magnus）氏浴槽、恒温水浴、L形通气管、温度计、充气球胆、铁支架、张力换能器、弹簧夹、螺旋夹、双凹夹

43、、粗剪刀、手术剪、眼科镊、下口瓶（500ml）、量筒、注射器、烧杯、培养皿、缝合针、缝合线、张力换能器、BL-420生物机能实验系统。【方法】1取制肠段标本：取空腹家兔1只，左手执髂上部，右手握木棰，猛击枕骨部致死。迅速开腹，剪取整个空肠及回肠上半段，迅速置于冷台氏液中，除去肠系膜，用台氏液将肠内容物冲洗干净，剪成长约2cm的小段，置盛有台氏液的培养皿内备用。多余肠管如不及时应用，可剪成数段，连同台氏液置于4冰箱中保存，12h内仍可使用。2装于麦氏浴槽：在肠段两端用缝针各穿一线，将肠段的一端系在通气管的小钩上。将通气管连同肠段放入盛有台氏液的麦氏浴槽内（台氏液量30ml），以双凹夹将通气管的另

44、一端固定在铁支架上，使充满空气的球胆和通气管相连，微微开启球胆橡皮管上的螺旋夹，使球胆内的空气以2个气泡/s的速度从通气管尖端的小孔逸出，供给肠肌以氧气。3标本联接及记录：肠段另端的一线系于张力换能器的小钩上，将换能头输出线与电源部分的输入插座相联，电源部分的输出线联接于记录仪。浴槽中的肠肌承受约1g的拉力。开动记录仪，记录一段正常收缩曲线，然后依次用药。（1）加0.001%氯化乙酰胆碱溶液0.1ml，结果如何？当肠段收缩明显时，立即加入：（2）0.1%硫酸阿托品溶液0.1ml，观察对肠段收缩的影响。收缩曲线下降到基线时再加入：（3）0.001%氯化乙酰胆碱溶液，剂量同（1），结果又如何？如作

45、用不明显，接着追加：（4）0.001%氯化乙酰胆碱溶液1ml，此时肠段有无收缩？观察3min后更换浴槽中的台氏液3次。（5）0.002%肾上腺素溶液0.2ml，观察对肠段的舒张，待作用明显后，用台氏液冲洗3次。（6）0.3%普萘洛尔溶液0.2ml，接触23min后，加入肾上腺素，剂量同（5），与首次用肾上腺素时的结果比较，有何不同？观察结果后用台氏液冲洗3次。（7）加入0.001%新斯的明溶液0.2ml，当作用明显时，加入0.1%硫酸阿托品溶液0.1ml，观察对肠段收缩的影响。【注意事项】1注意控制浴槽的水温，调节肠肌的张力，否则均可影响肠段的收缩功能与对药物的反应。2方法中的用药量系以麦氏浴

46、槽中有30ml左右的台氏液为准。如台氏液的容量有所改变，用药量亦相应调整。【报告要点】以描图和文字记述正常离体肠肌的张力和舒缩情况、加入各种药物后的反应，并对实验结果作适当讨论。【讨论题】1使离体平滑肌保持其收缩功能需要哪些基本条件？2试从受体学说分析阿托品对肠肌的作用，并讨论这些作用的临床意义。3普萘洛尔阻断什么受体而拮抗肾上腺素的作用？注：本实验既可用兔肠来做，也可用豚鼠肠来做，但两者稍有区别：1兔肠的肌层较厚，通气最好用95%O2+5%CO2，用药后需多换几次台氏液，才能将药物洗去。豚鼠肠的肌层较薄，一般通气即可，洗去药物也较容易。2兔肠的肌层较厚，收缩力较强，以加1g左右的负荷为宜。豚

47、鼠肠的肌层菲薄，收缩力较弱，以加0.5g左右的负荷为宜。3兔肠的腔道较宽，自发收缩也较多，剪成短段置于台氏液中后，其内容物可自动洗出。豚鼠肠常需用小心地向肠管内滴加台氏液的方法将其中的内容物洗出。4兔的肠段自发活动较多，适宜于做观察药物对肠运动影响的实验。豚鼠肠段自发活动较少，基线稳定，适宜于做生物检定（特别是组胺）的实验。实验八 烟的毒性实验【目的】观察烟碱对机体的毒性作用。【动物】小鼠2只。【药品与试剂】香烟。【器材】1ml注射器2支，水烟斗。【方法】吸烟前先取蒸馏水4ml置于水烟斗内，振摇后，用注射器抽取1ml作对照实验。然后将香烟插入水烟斗上，点燃香烟吸入（2支）。此时烟内毒物如烟碱等

48、即溶于水中。取小鼠2只，观察其正常活动后，一鼠由腹腔注射吸烟后水烟斗内液体0.10.5ml。另一鼠腹腔注射吸烟前水烟斗内液体0.10.5ml作对照，注射后内观察二鼠有何不同反应。【思考题】试述吸烟对人体有哪些危害？为什么？实验九 有机磷药物中毒及其解救【目的】观察有机磷药物中毒的症状及血液胆碱酯酶的抑制情况。根据阿托品和碘解磷定对有机磷中毒的解救效果，初步分析两药的解毒机制。【动物】家兔2只。【药品与试剂】0.2%atropine，5%dipterex，2.5%PAM，二甲苯，测定血液胆碱酯酶的试剂另详。【器材】10ml注射器2支，兔固定箱，瞳孔尺，小鼠灌胃针头，预先加草酸钾的试管，试管架，刀

49、片，木夹，干棉球。【方法】1取家兔2只，以甲、乙编号，称重，观察下列指标：活动情况、呼吸（频率、幅度、节律是否均匀）、瞳孔大小、唾液分泌、大小便、肌张力及有无肌震颤等，分别加以记录。2将两兔分别固定于箱内，以蘸有二甲苯或酒精的棉球涂擦耳壳，使血管扩张。当充血明显时，用刀片切割耳静脉（切口不要过大、过深），让血液自然流出，滴入预先置有少量草酸钾结晶的试管内，立即摇匀，供测定血液胆碱酯酶活力之用。如取血后切口流血不止，可用干棉球按压，再夹上木夹止血。3两兔同样给予有机磷农药：5%dipterex 2ml/kg，由另一侧耳静脉注入。密切注意给药后家兔上述生理指标的变化，加以记录。中毒症状明显时，再按

50、上法取血，留供胆碱酯酶活力测定。4立即给甲兔静脉注射0.2%atropine lml/kg，给乙兔静脉注射2.5%PAM 2ml/kg，然后每隔5min，再检查各项生理指标一次，观察两兔的情况有无好转，特别注意甲兔和乙兔的区别。中毒症状明显减轻后，再次由两兔的静脉取血，测定血液胆碱酯酶活力。【报告要点】兔号体重观察阶段活动情况呼吸情况瞳孔大小唾液分泌大小便次数及 性 状肌张力及震颤血液胆碱酯酶活力甲给药前给敌百虫后给阿托品后乙给药前给敌百虫后给碘解磷定后【注意事项】1敌百虫的精制，可利用其在沸水中溶解度增加，冷却后可结晶析出的性能来进行。取粗制敌百虫溶解于沸水中，保温过滤。将滤液放置冷却，滤取

51、结晶，干燥后即得。2给家兔静注敌百虫后，如经15min尚未出现中毒症状，可追加1/3量。3本实验系为分析阿托品和碘解磷定的解毒机制而设计。在临床实际应用中，需将阿托品与碘解磷定配合应用，才能获得最佳解毒效果。为防止动物死亡，在实验结束时也应给两兔分别补注碘解磷定与阿托品。【思考讨论题】1根据本次实验结果，分析有机磷农药的中毒机制及阿托品和解磷定的解毒原理。2将本实验方法用于有机磷解毒剂的筛选时，最好选用哪些指标？3为什么对中度或重度有机磷农药中毒病人，必须合并应用阿托品和AChE复活药？附：全血胆碱酯酶活力的比色测定法【原理】在反应系统中加入一定量的乙酰胆碱，温育一定时间，胆碱酯酶使乙酰胆碱水

52、解为胆碱和乙酸。未被胆碱酯酶水解剩余的乙酰胆碱与碱性羟胺作用生成乙酰羟胺。乙酰羟胺在酸性溶液中成为乙酰羟肟酸再与三氯化铁反应形成棕色铁的复合物。依据颜色深浅计算剩余乙酰胆碱含量，推算出水解乙酰胆碱的酶活力。OH O OH(CH3)3N(CH2)2OCCH3 + HNOH H 乙酰胆碱 羟胺O OHCH3CNOH + (CH3)3N(CH2)2OH H 乙酰羟胺 胆碱O H+ O3 CH3CNOH + Fe3+ 3 CH3CNO Fe + 3H+ H H 乙酰羟胺 棕色铁的复合物【器材】试管、试管架、吸管、恒温水浴、分光光度计、漏斗、滤纸。【药品与试剂】2/15mol/L磷酸氢二钠溶液：称取Na

53、2HPO412H2O 23.87g，用蒸馏水溶解，稀释至500ml。2/15mol/L磷酸二氢钾溶液：称取KH2PO4 9.08g，用蒸馏水溶解，稀释至500ml。pH7.2磷酸盐缓冲液：取2/15mol/L磷酸氢二钠溶液72ml，与2/15mol/L磷酸二氢钾溶液28ml混合即成。0.001mol/L pH4.5醋酸盐缓冲液：先由每升含冰醋酸5.78ml之水溶液28ml和每升含醋酸钠（不含结晶水）8.20g之水溶液22ml混合，成为0.1mol/L pH4.5之醋酸盐缓冲液，临用前以蒸馏水稀释100倍。0.07mol/L 乙酰胆碱底物贮存液：快速称取氯化乙酰胆碱0.127g（或溴化乙酰胆碱0

54、.158g），溶于0.001mol/L pH4.5醋酸盐缓冲液10ml中。在冰箱中可保存4w。0.07mol/L 乙酰胆碱底物应用液：临用前取0.07mol/L 乙酰胆碱底物贮存液，用pH7.2磷酸盐缓冲液稀释10倍。碱性羟胺溶液：临用前取等量14%氢氧化钠溶液和14%盐酸羟胺溶液，混合即成。4mol/L 盐酸溶液：取比重1.19的盐酸1容积，加蒸馏水2容积，混合即成。10%三氯化铁溶液：称取FeCl36H2O 10g，用0.1mol/L 盐酸溶解，使成100ml。【方法】按下表操作。每加一种试剂后均须充分摇匀，保温时间须严格控制。步骤加 入 量 （ml）标 准 管测 定 管空 白 管1 pH

55、7.2磷酸盐缓冲液1.01.01.02 全血（混匀后）0.10.10.13 370C水浴预热3min4 乙酰胆碱底物应用液1.05 370C水浴保温20min6 碱性羟胺溶液4.04.04.07 乙酰胆碱底物应用液1.08 室温静置2min9 4mol/L 盐酸溶液2.02.02.010 10%三氯化铁溶液2.02.02.011 乙酰胆碱底物应用液1.012 用滤纸过滤，选用525nm于15min内比色完毕。以蒸馏水校正吸收度到零点，读取各管吸收度。【计算】（标准管吸收度空白管吸收度）（测定管吸收度空白管吸收度） 70 = 胆碱酯酶活力（单位/ml）标准管吸收度空白管吸收度注：通常以1ml血液

56、在规定条件下能分解1mol/L 乙酰胆碱定为1个胆碱酯酶活力单位。计算式中的“70”是由于每管中加有7mol/L 乙酰胆碱，0.1ml血液，71.0/0.1=70。实验十 新斯的明对琥珀胆碱和筒箭毒碱肌松作用的影响【目的】观察新斯的明对除极化型和非除极化型肌松药肌松作用的影响，学习麻醉大鼠腓神经一胫前肌标本的制备方法。【动物】大鼠。【药品】0.005%氯化筒箭毒碱，0.03%氯化琥珀胆碱，0.01%溴化新斯的明，20%乌拉坦，2%盐酸普鲁卡因，0.9%NaCl。【器材】手术器械1套（大、小手术剪、手术刀、镊子、分离钳、玻璃分针），大鼠手术台，棉球，棉线，张力换能器，描记装置1套，电刺激装置，保

57、护电极，铁支架，双凹夹，1ml、2ml注射器。BL-420生物机能实验系统。【方法】1调节好BL-420生物机能实验系统及电刺激装置。2取大白鼠1只，称重，腹腔注射乌拉坦1.21.5g/kg。麻醉后，两前肢背位固定在手术台上，做好气管插管，从后肢踝关节正前部向上剪开小腿皮肤，剪断踝关节部横韧带，分离胫前肌肌腱，沿胫骨分离胫前肌（勿损伤血管），在胫前肌肌腱处扎一线，于远端切断肌腱；分离出腓神经，安装电极以备进行实验刺激；在髋关节后外侧约0.5cm处切开皮肤，暴露出一段坐骨神经，用浸有盐酸普鲁卡因的棉球，在坐骨神经干上做传导麻醉，约12min后，沿放置麻醉药部位，将神经切断。手术结束后，将胫前肌与

58、换能器相连，腓神经处安上保护电极，在整个实验过程中每5s给一次单刺激，选择适当的刺激强度（以收缩曲线高度24cm为宜），记录给药前肌肉收缩曲线35min。3腹腔注射氯化筒箭毒碱0.2mg/kg，待收缩振幅被抑制50%时，立即由舌静脉匀速注射溴化新斯的明0.1mg/kg。4肌肉收缩恢复后，由腹腔注射氯化琥珀胆碱1.22.4mg/kg。待收缩振幅被抑制50%时，立即由舌静脉注入溴化新斯的明0.1mg/kg。【结果】根据描记曲线图分析实验结果。【注意事项】1溴化新斯的明注射不宜过快，尚可进行静脉插管给药。每次注射药物后，需立即注射生理盐水0.51ml，以便将插管内积存的药液全部注入静脉中。2实验过程

59、中应密切注意呼吸状态，必要时进行人工呼吸。实验十一 传出神经药物对兔眼瞳孔的作用【目的】观察拟胆碱药、抗胆碱药及拟肾上腺素药对兔眼瞳孔的作用，并分析后两类药物散瞳作用的机制。【动物】家兔2只。【药品】1%atropine，1%pilocarpine，0.5%physostigmine，1%neosynephrine。【器材】测瞳尺，手电筒，兔固定箱，滴管。【方法】取兔2只，于适度的光照下，用测瞳尺测量两眼瞳孔的大小（以mm表示之）。另用手电筒的光试验对光反射，即突然从侧面照射兔眼，如瞳孔随光照而缩小，即为对光反射阳性，否则为阴性。在兔的结膜囊内滴药（滴药时用拇指与食指将兔下眼睑拉开，使其成杯状

60、，并用中指压住鼻泪管，滴入药液2滴，轻轻揉动眼睑，使药液与角膜充分接触，并在结膜囊内保留1min，然后放手任其自溢），所滴药液参见下表。家兔编号左眼右眼甲1%atropine1%pilocarpine乙1%neosynephrine0.5%physostigmine滴药后10min，在同样的光照下，再测两兔左、右眼的瞳孔大小和对光反射。如滴毛果芸香碱及毒扁豆碱眼的瞳孔已经缩小，在这两眼的结膜囊内再分别滴入1%阿托品、1%苯肾上腺素2滴，10min后检查瞳孔大小及对光反射又有何变化？【报告要点】瞳孔大小（mm） 对光反射兔号 眼睛 药物用药前 用药后 用药前 用药后左 阿托品1 毛果芸香碱 右再