食品检验工(高级)第七章课件

1、第七章第一节饮料中果汁含量的测定3.05比色皿中溶液的最终体积(mL)；192.1D-异柠檬酸的摩尔质量(g/mol)；6.3反应产物NADPH在340nm的吸光系数L/(mmolcm)。第二节饮料中维生素C含量的测定49.461mol/L(1/2I2)碘标准溶液相当于三氧化二砷的滴定度(g/mol)。第三节饮料中茶多酚含量的测定第四节饮料中咖啡因含量的测定第五节饮料中微量元素含量的测定一、锌、钾、钠、钙、镁、锡、铜含量的测定二、铅含量的测定三、砷含量的测定第六节饮料检验技能训练第一节饮料中果汁含量的测定1.原理2.仪器与试剂3.操作步骤2.仪器与试剂表7-16种组分的标准值和权值组分标 准

2、值权值橙汁柑、橘汁混合果汁橙汁柑、橘汁混合果汁钾/（mg/kg）137012501300018016018总磷/（mg/kg）135130135020019019氨基酸态氮/（mg/kg）290305300019019019L脯氨酸/（mg/kg）760685695014014014总D异柠檬酸/（mg/kg）80140115015017015总黄酮/（mg/kg）1185110011050140150152.仪器与试剂(1)仪器1)原子吸收分光光度计(带钾空心阴极灯)。2)紫外分光光度计(带1cm石英比色皿)。3)可见分光光度计(带1cm比色皿)。4)酸度计(带pH玻璃电极和饱和甘汞电极)。

3、5)离心机：转速不低于4000r/min，10mL离心管和容积大于80mL的离心管。6)微量可调移液管(01000mL)。(2)试剂1)硝酸。2)硫酸。3)10g/L氯化钠溶液。2.仪器与试剂4)100mg/L钾标准溶液。5)钒-钼酸铵溶液：称取20.0g钼酸铵，溶解在约400mL温度为50的热水中，冷却。6)100mg/L磷标准溶液：称取0.4394g经(1052)烘烤2h的磷酸二氢钾(精确至0.0001g)，置于50mL烧杯中，加水溶解，转移至1000mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀。7)甲醛(体积分数为36%)。8)0.05mol/L氢氧化钠标准溶液。9)乙酸乙酯。10)甲酸。11)无

4、过氧化物乙二醇独甲醚的制备：将数粒锌粒放入乙二醇独甲醚中，在暗处放置2天。2.仪器与试剂12)30g/L茚三酮-乙二醇独甲醚溶液：称取3.0g水合茚三酮，溶解在100mL无过氧化物的乙二醇独甲醚中，储存在棕色瓶中，置避光处。13)L-脯氨酸标准储备液(500mg/L)：称取0.0500g L-脯氨酸(精确至0.0001g)，置于50mL烧杯中，加水溶解，转移至100mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀，储存在约4冰箱内。14)NADO溶液：将咪唑缓冲液(稳定剂)30mL(pH=7.1)升温至2025，倒入-烟酰胺-腺嘌呤-双核苷酸-磷酸二钠45mg和硫酸锰10mg中，使其全部溶解，混合均匀。15

5、)异柠檬酸脱氢酶溶液：用1.8mL水溶解2mg异柠檬酸脱氢酶5(U)个活力单位，混合均匀。2.仪器与试剂16)300g/L氯化钡溶液：称取30g氯化钡，溶解在热水中，冷却后定容至100mL。17)71g/L硫酸钠溶液：称取71g无水硫酸钠，溶解于水中，定容至1000mL。18)缓冲溶液：称取2.4g三羟甲基氨基甲烷和0.035g乙二胺四乙酸二钠，用80mL水溶解，先用4mol/L氢氧化钠溶液调至pH值为7.2左右，再用1mol/L盐酸溶液调至pH=7.0(用酸度计测定)，用水定容至100mL。19)洗涤溶液：量取150mL水，加入10mL氨水、100mL丙酮，混匀。20)200g/L柠檬酸溶液

6、：称取20g柠檬酸，加水溶解，定容至100mL。2.仪器与试剂21)二甘醇溶液(9+1)：量取90mL二甘醇，加10mL水，混匀。22)试剂空白液：量取20mL 0.1mol/L氢氧化钠溶液置于50mL烧杯中，用200g/L柠檬酸溶液调至pH6，转移至100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。23)200mg/L橙皮苷标准溶液：称取0.0250g橙皮苷(质量分数约为80%)(精确至0.0001g)，置于50mL烧杯中，加20mL 0.1mol/L氢氧化钠溶液，用200g/L柠檬酸溶液调至pH6，转移至100mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀。3.操作步骤(1)钾含量的测定(同第四章第一节中钾含

7、量的测定方法)。(2)总磷含量的测定1)样品溶液的制备(同钾的测定)。2)测定：吸取0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL磷标准溶液，分别置于50mL容量瓶中，加10mL硫酸溶液(1+9)，摇匀，加10mL钒-钼酸铵溶液，用水定容至刻度，摇匀，配制成0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mg/L磷标准系列溶液，在室温下放置10min，用1cm比色皿，以0.0mg/L磷标准溶液调零点，在波长400nm处测定磷标准系列溶液的吸光度。3)结果计算(3)氨基酸态氮含量的测定3.操作步骤1)样品的测定：吸取5.0mL样品，置于100mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀后吸取2

8、0.0mL，置于200mL烧杯中，加60mL水，开动磁力搅拌器，用0.05mol/L氢氧化钠标准溶液滴定至酸度计指示pH=8.2，记下消耗氢氧化钠标准溶液的体积，以计算总酸度。2)结果计算(4)L-脯氨酸含量的测定1)样品溶液的制备：称取一定量混合均匀的样品(浓缩汁1.00g，果汁5.00g，果汁饮料和果汁型碳酸饮料10.00200.0g)置于200mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀。2)测定：吸取0.00、0.50、1.00、2.50、4.00、5.00mLL-脯氨酸标准溶液分别置于50mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀，配制成0.0mg/L、L-脯氨酸标准系列溶液。3.操作步骤3)结果计算

9、(5)总D-异柠檬酸含量的测定1)样品溶液的制备 果汁型碳酸饮料：称取500g样品置于1000mL烧杯中，加热煮沸，在微沸状态下保持5min，并不断搅拌，待二氧化碳基本除净后，冷却至室温称量，最后用水补足至加热前的质量。 浓缩果汁、果汁、果汁饮料、水果饮料：混匀后备用。2)水解：按表7-2中规定的取样量称取样品溶液进行水解。3.操作步骤表7-2水解时的取样量样 品 名 称水解时取样量/g比色测定时吸取量/mL浓缩果汁2000408果汁10000812含40%（质量分数）果汁的果汁饮料20001520含20%（质量分数）果汁的果汁饮料250020含10%（质量分数）果汁的果汁饮料40020含5%

10、（质量分数）果汁的果汁饮料60080020含25%（质量分数）果汁的果汁型碳酸饮料10001500203.操作步骤 浓缩果汁、果汁：称取样品溶液置于50mL烧杯中，加5mL 4mol/L氢氧化钠溶液，搅拌均匀，在室温下放置10min，使之水解，然后将溶液移入离心管中，用5mL 4mol/L盐酸溶液和1020mL水分数次洗涤烧杯，将洗液并入离心管中，使总体积约为30mL，搅拌均匀。 果汁饮料、水果饮料、果汁型碳酸饮料：称取样品溶液置于离心管中，加5mL 4mol/L氢氧化钠溶液，搅拌均匀，在室温下放置10min，使之水解，然后加5mL 4mol/L盐酸溶液，搅拌均匀。3)沉淀3.操作步骤 称样量

11、小于或等于25g的样品溶液：在盛有水解物的离心管中依次加入2mL氨水、3mL氯化钡溶液、20mL丙酮，用玻璃棒搅拌均匀，取出玻璃棒，按顺序放在棒架上，将离心管在室温放置10min，然后以3000r/min的转速离心510min，小心倾去上层溶液，保留离心管底部的沉淀物。 称样量大于25g的样品溶液：按上述步骤分别制备26份沉淀物，然后用约50mL洗涤溶液将2只(或3只、4只、6只，视称样量而定)离心管中的沉淀物合并到1只离心管中，在室温下放置10min，然后以3000r/min的转速离心510min，小心倾去上层溶液，保留离心管底部的沉淀物。3.操作步骤4)溶解：将玻璃棒按顺序放回原离心管中，

12、向离心管中加入20mL硫酸钠溶液，然后将离心管置于微沸水浴中加热10min，同时用玻璃棒不断搅拌，趁热用缓冲溶液将离心管中的溶液转移到50mL容量瓶中，冷却至室温后，用缓冲溶液稀释至刻度，摇匀，用滤纸过滤，弃去最初滤液，保留滤液备用。5)测定：按表7-3中规定的程序和溶液的加入量，用微量可调移液管依次将各种溶液加入比色皿中，立即用玻璃棒上下搅拌，使比色皿中的溶液充分混匀。6)结果计算6.3反应产物NADPH在340nm的吸光系数L/(mmolcm)。(6)总黄酮含量的测定4.结果计算5.异常数据的修正6.3反应产物NADPH在340nm的吸光系数L/(mmolcm)。表7-3总D-异柠檬酸含量

13、的测定法加入比色皿中的溶液空白样品NADP溶液/mL重蒸馏水/mL样品溶液/mL100200100200混匀，约3min后分别测定空白吸光度（）和样品吸光度（）异柠檬酸脱氢酶溶液/mL005005混匀，约10min后达到反应终点，出现恒定的吸光度，分别记录空白吸光度（）和样品吸光度（）。若10min后未达到反应终点，则每2min测定一次吸光度，待吸光度恒定增加时，分别记录空白和样品吸光度开始恒定增加时的吸光度（和）。(6)总黄酮含量的测定1)样品溶液的制备：称取一定量混合均匀的样品(浓缩汁2.005.00g，果汁10.0g，果汁饮料、水果饮料和果汁型碳酸饮料50.0g)置于100mL烧杯中，加

14、入10mL 0.1mol/L氢氧化钠溶液，调至pH12，静置30min后，再用200g/L柠檬酸溶液调至pH6，转移至100mL容量瓶中，用水定容至刻度，用滤纸过滤，收集澄清滤液。2)测定：吸取0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL 橙皮苷标准溶液置于6支25mL具塞试管中，分别依次加入5.00、4.00、3.00、2.00、1.00、0.00mL试剂空白溶液，摇匀，再各加5.0mL二甘醇溶液、0.1mL 0.1mol/L氢氧化钠溶液，摇匀，配制成0.0、20.0、40.0、60.0、80.0、100.0mg/L总黄酮标准系列溶液。3)结果计算5.异常数据的修正1)当(

15、i=1，2，3，4，5，6)1.25，或(i=1，2，3，4，6)2，或(i=1,2,3,4,6)0.35时，必须将其组分项删去，相应的权值按比例分配给剩余组分项。2)当1.25时，按1.25计算。3)当同时修正3种组分时(总D-异柠檬酸除外)，果汁含量的计算公式为第二节饮料中维生素C含量的测定1.乙醚萃取法1.乙醚萃取法(1)原理2，6-二氯靛酚能被L-抗坏血酸还原为无色体，微过量的2，6-二氯靛酚用乙醚萃取，然后由乙醚层中的玫瑰红色来确定终点。(2)试剂1)丙酮(分析纯)。2)乙醚(分析纯)。3)100g/L硫酸铜溶液。4)20g/L草酸溶液。5)0.1mol/L 1/2I2标准溶液：称取

16、13g碘和35g碘化钾，溶于100mL水中，转移至1000mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，储存于棕色具塞瓶中。49.461mol/L(1/2I2)碘标准溶液相当于三氧化二砷的滴定度(g/mol)。6)0.01mol/L(1/2I2)碘标准溶液：在使用时，将25mL 0.1mol/L(1/2I2)碘标准溶液稀释至250mL。7)0.88mg/mLL-抗坏血酸标准溶液：称取0.22gL-抗坏血酸，用20g/L草酸溶液溶解并稀释至250mL。8)0.088mg/mLL-抗坏血酸标准溶液：吸取0.88mg/mLL-抗坏血酸标准溶液25.00mL，用20gL草酸溶液稀释至250mL。9)2,6-二氯

17、靛酚标准溶液：称取0.2g 2,6-二氯靛酚，用少量热的重蒸馏水湿润，再慢慢加入热的重蒸馏水，搅拌溶解，过滤，冷却后，将滤液用重蒸馏水稀释至1L，保存于冰箱中，一周至少标定一次。10)5g/L淀粉指示剂：称取0.5g可溶性淀粉，用5mL冷水调匀后，在搅拌下缓缓注入100mL沸水中，再煮沸23min，直至溶液透明，加0.1g碘化汞作保存剂。(3)操作步骤49.461mol/L(1/2I2)碘标准溶液相当于三氧化二砷的滴定度(g/mol)。(4)结果计算(5)注意事项2.荧光比色法(3)操作步骤1)样品溶液的制备 原汁：称取含L-抗坏血酸410mg有代表性的样品(准确至0.001g)，用20g/L

18、草酸溶液稀释至200mL，混匀。 浓缩汁：在浓缩汁中加入与浓缩过程中失去的水分等量的水，使其成为原汁，然后按原汁一样制备样品溶液。 果汁饮料、果蔬汁水：对于L-抗坏血酸含量在0.05mg/mL以下的样品，混匀后直接取样测定；对于L-抗坏血酸含量在0.05mg/mL以上的样品，称取含L-抗坏血酸410mg有代表性的样品(准确至0.001g)，用20g/L草酸溶液稀释至200mL，混匀。 果蔬汁碳酸饮料：先将样品旋摇至基本无气泡后，按果汁饮料方法制备样品溶液。(3)操作步骤 固体饮料：称取含L-抗坏血酸410mg有代表性的样品(准确至0.001g)，用20g/L草酸溶液溶解并稀释至200mL，混匀

19、。 乙醚萃取处理：对于高度乳化或样品溶液颜色较深且易被乙醚萃取的样品，取样后置于分液漏斗中，加30mL乙醚，充分振摇，静置分层后，将下层样液放入200mL容量瓶中，然后向分液漏斗中加入20mL 20g/L草酸溶液，振摇，待分层后，将下层水溶液与200mL容量瓶中的样液合并。如此反复操作4次，每次均将下层水溶液与样液合并，最后用20g/L草酸溶液稀释至刻度，摇匀。2)空白试液的制备：按样品处理中所确定的取样量称取同一样品(准确至0.001g)，置于250mL锥形瓶中，加入20mL100硫酸铜溶液，加水使总体积约为100mL，然后小心加热至沸腾并保持微沸15min，冷却至室温。(3)操作步骤3)测

20、定 样品溶液的测定：取1015支50mL比色管，在每支比色管中均加入10.00mL样品溶液和2.5mL丙酮，放置3min后，在第一支比色管中加入1mL2,6-二氯靛酚溶液，充分混匀，精确控制40s后，加入2mL乙醚，充分振摇，放置几分钟，待乙醚与水溶液分层后，观察乙醚层有无出现玫瑰红色。若乙醚层出现淡玫瑰红色，则表明已到测定的暂定终点；若乙醚层无色，则在第二支比色管中加入1.5mL2,6-二氯靛酚溶液。若乙醚层还不显红色，则在其余比色管中逐一加入2.0mL、2.5mL、3.0mL、3.5mL、4.0mL、4.5mL、5.0mL2,6-二氯靛酚溶液，直至乙醚层出现玫瑰红色为止，即达到暂定终点。达

21、到暂定终点时，2,6-二氯靛酚溶液常常过量，需要进一步试验，以确定精确终点。(3)操作步骤 空白试液的测定：吸取空白试液10.00mL，置于50mL比色管中，加2.5mL丙酮，按样品溶液测定的方法，逐一加入不同量的2,6-二氯靛酚溶液，直至乙醚层出现玫瑰红色为止，测得所需2,6-二氯靛酚溶液的量。(5)注意事项1)处理样品时采用20g/L草酸，可防止维生素C的氧化损失。2)同一样品三次测定结果允许的相对偏差：L-抗坏血酸含量大于或等于10mg/100g的样品应小于2%，L-抗坏血酸含量小于10mg/100g的样品应小于5%。2.荧光比色法(1)原理样品中的维生素C用草酸萃取后，用2,6-二氯靛

22、酚氧化成脱氢维生素C，再与邻苯二胺反应生成具有紫蓝色荧光的喹啉衍生物。(2)仪器与试剂1)仪器：荧光分光光度计。2)试剂 10g/L草酸溶液。 500g/L乙酸钠溶液。 硼酸-乙酸钠溶液：将3g硼酸溶于500g/L乙酸钠溶液中并稀释到100mL。 0.2g/L邻苯二胺溶液：称取20mg邻苯二胺，溶于100mL水中。2.荧光比色法 2,6-二氯靛酚溶液：称取50mg 2,6-二氯靛酚和50mg碳酸氢钠，溶于50mL水中。 20g/L硫脲溶液：将2g硫脲溶于50%(体积分数)乙醇溶液中并稀释到100mL。临用前配制。 0.2mg/mL抗坏血酸标准溶液：精确称取抗坏血酸20mg，用10g/L草酸溶液

23、溶解，置于100mL棕色容量瓶中，用10g/L草酸溶液稀释至刻度，摇匀，置于冰箱中保存。 0.1mg/mL抗坏血酸标准使用液：吸取25.00mL0.2mg/mL抗坏血酸标准溶液，置于50mL棕色容量瓶中，用10g/L草酸溶液稀释至刻度，摇匀。2.荧光比色法 硫酸喹啉标准溶液：准确称取10.0mg喹啉，用0.05mol/L硫酸溶液溶解后，移入1000mL容量瓶中，再用0.05mol/L硫酸溶液稀释至刻度，摇匀(此溶液每毫升相当于10g喹啉)。使用时，用0.05mol/L硫酸溶液配制成每毫升相当于0.1g喹啉的溶液，此溶液用于校正荧光光度计的灵敏度。(3)操作步骤1)样品的处理：吸取VmL样品，用

24、10g/L草酸溶液稀释至50mL，使L-抗坏血酸的质量浓度控制在10100g/mL，摇匀。2)测定：吸取5.00mL抗坏血酸标准使用液(0.1mg/mL)，置于50mL容量瓶中。(4)结果计算第三节饮料中茶多酚含量的测定1.原理2.仪器与试剂3.操作步骤4.结果计算5.注意事项2.仪器与试剂(1)仪器恒温水浴锅、分光光度计。(2)试剂1)酒石酸亚铁溶液：称取100mg 硫酸亚铁(FeSO47H2O)和500mg酒石酸钾钠，用水溶解并定容至100mL。2)pH7.5的磷酸盐缓冲液 磷酸氢二钠(1/15mol/L)：称取23.377g磷酸氢二钠，加水溶解后定容至1L。 磷酸二氢钾(1/15mol/

25、L)：称取9.078g磷酸二氢钾，加水溶解后定容至1L。3)没食子酸乙酯标准溶液：准确称取用水重结晶并在100下干燥1h的没食子酸乙酯0.5g，加水溶解后，置于100mL容量瓶中稀释定容，充分摇匀。3.操作步骤(1)标准曲线的绘制吸取没食子酸乙酯标准溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0，分别置于25mL容量瓶中，均加水至5.0mL，再各加入5.0mL酒石酸亚铁溶液，用磷酸盐缓冲溶液定容，充分摇匀，放置15min。(2)样品的测定准确吸取1020mL样品，置于100mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀，用干滤纸过滤，弃去最初约20mL的滤液。5.注意事项1)由于只用了5%(体积分数)的提

26、取液进行比色，即使稍有差错，也会产生很大的误差。2)如果改变磷酸盐缓冲溶液的浓度，那么显色后溶液的吸光度也会发生变化，因此必须避免改变磷酸盐缓冲溶液的浓度。3)为了测得茶多酚的准确含量，就需要用茶多酚纯品作比色标准，但由于不同茶多酚的显色不同，且茶多酚不易买到，所以本方法用纯度高、稳定、易得的没食子酸乙酯作为比色标准。第四节饮料中咖啡因含量的测定1.紫外分光光度法2.高效液相色谱法1.紫外分光光度法(1)原理咖啡因的三氯甲烷溶液对波长为276.5nm的光有最大吸收，其吸收值的大小与咖啡因的含量成正比。(2)仪器与试剂1)仪器：紫外分光光度计。2)试剂 无水硫酸钠。 三氯甲烷(使用前重新蒸馏)。

27、 15g/L高锰酸钾溶液：称取1.5g高锰酸钾，加水溶解并稀释至100mL。 亚硫酸钠和硫氰酸钾混合溶液：称取10g无水亚硫酸钠，加水溶解并稀释至100mL。另取10g硫氰酸钾，加水溶解并稀释至100mL。将这两种溶液均匀混合。1.紫外分光光度法 磷酸溶液(3+17)：吸取15mL磷酸置于100mL容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀。 200g/L氢氧化钠溶液：称取20g氢氧化钠，加水溶解，冷却后稀释至100mL。 200g/L乙酸锌溶液：称取20g乙酸锌Zn(CH3COO）2，加入3mL冰乙酸，用水溶解并稀释至100mL。 100g/L亚铁氰化钾溶液：称取10g亚铁氰化钾K4Fe(CN）6，加水

28、溶解并稀释至100mL。 咖啡因标准品(质量分数在98%以上)。 咖啡因标准溶液：根据咖啡因标准品的含量，用重蒸三氯甲烷配制成每毫升相当于0.5mg咖啡因的溶液，置于冰箱中保存。(3)操作步骤1.紫外分光光度法1)样品的处理 可乐型饮料：向250mL分液漏斗中，准确移入10.020.0mL经超声脱气后的均匀可乐型饮料样品，加入15g/L高锰酸钾溶液5mL，摇匀，静置5min，然后加入10mL亚硫酸钠和硫氰酸钾混合溶液、1mL磷酸溶液(3+17)、1mL 200g/L氢氧化钠溶液和50mL重蒸三氯甲烷，振摇100次，静置分层，收集三氯甲烷。水层再加40mL重蒸三氯甲烷，振摇100次，静置分层。合

29、并两次三氯甲烷萃取液，用重蒸三氯甲烷稀释至100mL，摇匀。1.紫外分光光度法 咖啡、茶叶及其固体制成品：准确称取0.52.0g已粉碎成低于30目(0.6mm)的均匀样品，置于100mL烧杯中，加入80mL沸水，加盖摇匀，浸泡2h，将浸出液全部移入100mL容量瓶中，加入200g/L乙酸锌溶液2mL、100g/L亚铁氰化钾溶液2mL，摇匀，加水定容至100mL，摇匀，静置沉淀，过滤。准确吸取5.020.0mL滤液，按中操作进行，制成100mL三氯甲烷溶液。 咖啡、茶叶的液体制成品：向100mL容量瓶中，准确移入10.020.0mL均匀样品，加入200g/L乙酸锌溶液2mL、100g/L亚铁氰化

30、钾溶液2mL，摇匀，加水定容至100mL，摇匀，静置沉淀，过滤。准确吸取5.020.0mL滤液，按中操作进行，制成100mL三氯甲烷溶液。1.紫外分光光度法2)标准曲线的绘制：吸取0.5mg/mL咖啡因标准溶液，用重蒸三氯甲烷配制成质量浓度分别为0.0、5.0、10.0、15.0、20.0g/mL的标准系列溶液。3)样品的测定：在25mL具塞试管中，加入5g无水硫酸钠，吸取20.00mL样品的三氯甲烷溶液置于其中，摇匀，静置。()结果计算(5)注意事项1)本方法仪器检出限为0.2g。2)平行测定结果的相对偏差：可乐型饮料为10%，咖啡、茶叶及其制成品为15%。2.高效液相色谱法(1)原理咖啡因

31、的甲醇溶液在286nm波长处有最大吸收，其吸收值的大小与咖啡因的含量成正比。(2)仪器与试剂1)仪器 高效液相色谱仪。 色谱柱：BondapakTMC18(30cm3.9mm id)。 预柱：RESAVETMC18。 超声清洗器(CQ250)。 混纤微孔滤膜。2)试剂 甲醇：HPLC试剂。 乙腈：HPLC试剂。2.高效液相色谱法 三氯甲烷：分析纯(必要时需重蒸)。 超纯水(18.2M)。 无水硫酸钠(分析纯)。 氯化钠(分析纯)。 咖啡因标准品(质量分数大于98%)。(3)操作步骤1)样品的处理 可乐型饮料：样品先用超声清洗器在40下超声脱气5min，然后吸取10.0mL经脱气的样品，用混纤微

32、孔滤膜过滤，弃去最初的5mL，保留剩余的5mL备用。2.高效液相色谱法 咖啡、茶叶及其制成品：在150mL烧杯中，称取2g已粉碎成粒径低于30目(0.6mm)的均匀样品或液体样品，加入23mL超纯水，再加50mL三氯甲烷，摇匀，在超声处理机上萃取1min(分两次，每次30s)，静置30min，分层，将萃取液倾入另一150mL烧杯中。在样品中再加入50mL三氯甲烷，重复上述萃取操作步骤，弃去样品。合并两次萃取液，加入少许无水硫酸钠和5mL饱和氯化钠溶液，过滤，将滤液移入100mL容量瓶中，用三氯甲烷定容。最后取10mL滤液，用混纤微孔滤膜过滤，弃去最初的5mL，保留剩余的5mL备用。2)色谱条件

33、2.高效液相色谱法3)标准曲线的绘制：用甲醇配制成咖啡因质量浓度分别为0、20、50、100、150g/mL的标准系列溶液，分别进样10L，于286nm处测量峰面积，绘制峰面积-咖啡因质量浓度的标准曲线或求出线性回归方程。4)样品的测定：吸取10L可乐型饮料样品或5L咖啡、茶叶及其制成品样品，进样，于286nm处测量其峰面积，根据标准曲线或线性回归方程求出样品的峰面积相当于咖啡因的质量浓度。(4)结果计算(5)注意事项1)本方法仪器检出限为0.72g/mL。2)平行测定结果的相对偏差：可乐型饮料为5%，咖啡、茶叶及其制成品为10%。第五节饮料中微量元素含量的测定一、锌、钾、钠、钙、镁、锡、铜含

34、量的测定二、铅含量的测定1.双硫腙比色法2.原子吸收分光光度法2.原子吸收分光光度法(1)原理同第二章第四节中铅含量的测定方法2。(2)仪器与试剂同第二章第四节中铅含量的测定方法2。(3)操作步骤1)样品的处理：取均匀样品1020g(精确到0.01g)置于烧杯中，于电热板上先蒸发至一定体积后，加入混合酸消化完全，然后转移、定容于50mL容量瓶中。2)测定(同第二章第四节中铅含量的测定方法2)。(4)结果计算同第二章第四节中铅含量的测定方法2。三、砷含量的测定1.砷斑法2.银盐法1.砷斑法(1)原理同第二章第四节中砷含量的测定方法1。(2)仪器与试剂同第二章第四节中砷含量的测定方法1。(3)操作步骤1)样品的处理：吸取10mL样品置于瓷坩埚中，加入2g氧化镁、10mL100g/L硝酸镁溶液，在水浴上蒸干，用小火炭化后，在550高温炉中灰化至白色