迪安诊断TSPOT产品

1、感染(gnrn)现状1. 感染人数多 5.5 亿人感染过结核(jih)2. 患病人数多 现有活动性肺结核患者500万3. 潜伏感染人数多 受限于检测条件较难统计， 2009 年流行病调查结果为总人口的 44.5%（因采用PPD检测，假阳性较多）4. 新发患者多 仅活动性肺结核 2009年新发病患 107 万5. 死亡人数多 13 万/年共三十一页中国(zhn u)独立医学实验室领导者T-spot.TB项目(xingm)介绍济南迪安医学检验中心马凤美共三十一页共三十一页共三十一页其它检测技术PPD（TST）实验影像学检查(jinch)病理学诊断实验室常规检测(jin c)细菌学诊断免疫学诊断分子

2、生物学诊断原检测手段共三十一页假阴性：免疫力低下或HIV人群(rnqn)，新生儿、老弱人群，药物影响假阳性：BCG接种人群，其它分支杆菌感染(gnrn)，交叉污染肺外的结核感染无法明确诊断抗痨治疗疗效无法评价无法排筛结核感染，造成生物制剂或移植手术治疗后病患免疫力下降，引发结核，形成医疗事故现有检测的不足之处：共三十一页WHO关于血清学检测(jin c)声明2011年7月20日，世界卫生组织（ WHO ）正式声明，要求禁止将 血清学检测方法 （抗原，抗体(kngt)，蛋白芯片等）用于肺结核和肺外结核的诊断。WHO warns against the use of inaccurate comm

3、ercialserological tests for pulmonary and extra-pulmonaryTB.A substandard test with unreliable results TB can be wrongly diagnosed A serological test for diagnosing active TB disease is bad practice Problems of misdiagnosis The inaccurate serological tests are costly Selling substandard tests with u

4、nreliable results共三十一页T-SPOT.TB结核(jih)感染T细胞检测全球最精确(jngqu)的快速结核感染检测共三十一页-干扰素释放实验（IGRAs，interferon- gamma releaseassays ）酶联免疫斑点技术（ELISPOT，Enzyme-Linked ImmunoSpotassay）结核杆菌特异抗原早期(zoq)抗原靶6（ESAT-6，early secretedantigenic target 6 ）培养滤液蛋白10（CFP 10，culturefiltrate protein 10 ）技术(jsh)背景共三十一页TB 抗 原 多肽T细胞(xb

5、o)活化(huhu)T细胞 干扰素-干扰素释放实验（IGRAs）干扰素检测阴性干扰素检测阳性共三十一页-干扰素释放(shfng)实验（IGRAs）结核感染者体内存在特异的效应T淋巴细胞，效应T淋巴细胞再次(zi c)受到结核抗原刺激时会分泌多种细胞因子（IFN-）。因此，检测效应T淋巴细胞可用于结核病或结核潜伏感染者的诊断。由于效应T细胞存活时间很短，而且具有特异性，因此可以作为机体是否正处于被感染的指标，无论是否有临床症状。特点：共三十一页实验中采用的两个抗原 (ESAT-6 & CFP10) 均来自结核分枝杆菌基因组 RD1区域所有的卡介苗均缺失(qu sh) RD1 区基因因此， 结核感

6、染T 细胞斑点(bndin)试剂盒不会受卡介苗接种影响大多数环境分枝杆菌也缺失 RD1区基因（仅结核分枝杆菌复合群存在 RD1区）技术背景ESAT-6与CFP 10抗原共三十一页病人需就医两次结果(ji gu)报告时间 48-72 小时灵敏度有限，尤其是免疫低下者特异性高与卡介苗有交叉反应与非结核分支杆菌有交叉反应主观性判断单次血液测试第二日报结果敏感度95.6%，免疫低下者仍有效特异性97.1%不受卡介苗接种影响与非结核分支杆菌无交叉反应每例样本(yngbn)均有阴阳对照共三十一页美国（CDC和儿科学会）；加拿大 （加拿大结核病委员会）；巴西（卫生部）英国（国家卫生和临床协会）；法国（国家卫

7、生局）；西班牙（西班牙肺病和胸部手术协会）；德国（德国抗结核病中央委员会）； 意大利；瑞士（瑞士肺科协会）；荷兰（实用结核病控制委员会）；丹麦（丹麦肺部医学会）；挪威（挪威公共卫生协会）；芬兰（国家卫生和福利协会）；爱尔兰（国家结核病咨询(zxn)委员会）；葡萄牙；捷克共和国； 斯洛伐克； 波兰； 保加利亚；克罗地亚澳大利亚（国家结核病咨询委员会、传染病协会和澳大利亚风湿病协会）；沙特阿拉伯；南朝鲜；日本（日本结核病预防协会）WHO 和 ECDC-干扰素释放实验(shyn)（IGRAs)在欧美国家得到全面推广，并被写入诊疗指南共三十一页例1：英国结核诊疗(zhnlio)指南 The Natio

8、nal Institute for Health and ClinicalExcellence (NICE) released new clinicalguidelines for the use of innovative TB bloodtests called interferon-gamma release assays(IGRAs) for diagnosing latent tuberculosisinfection (LTBI) on 24th March 2011. 英国国家(guji)健康与临床卓越研究所（NICE）发布了新的临床指南，指出用创新TB全血实验，即-干扰素释放实

9、验，来诊断潜伏性结核感染共三十一页例2：英国皮肤病学诊疗(zhnlio)指南 2009年英国皮肤病学中TNF-治疗前结核(jih)筛查指南：共三十一页例3：瑞士抗TNF-治疗前筛查潜伏感染(gnrn)指南Experts in rheumatology, gastroenterology andpneumology agreed that:1. A definite risk of tuberculosis exists with anti-TNFagents, and all patients should be screened for tuberculosisand latent tube

10、rculosis infection prior to any anti-TNF-atherapy.2. The screening should be based on history,chest x-rayand an IGRA test.瑞士关于抗TNF-治疗前筛查结核潜伏感染的指南中建议(jiny):1. 要求所有接受抗TNF-治疗患者在治疗前都应该进行结核病检测和潜伏感染的筛查2. 筛查应该基于既往史，X摄片和干扰素释放实验（T-SPOT.TB方法）共三十一页用BD CPT 管或Ficoll提取液收集(shuj)外周血单个核细胞过夜孵育，洗板，加入酶标二抗结核特异抗原（ ESAT-6

11、/CFP 10）刺激结核特异的效应 T淋巴细胞使其分泌 - 干扰素加入底物工作液，用肉眼或放大(fngd)镜计算斑点数效应T淋巴细胞分泌的 -干扰素与膜板预包被的抗 -干扰素抗体结合并固定在细胞周围1 个斑点=1 个效应 T细胞实验过程共三十一页阴性(ynxng)结果阳性(yngxng)结果阳性对照（PHA ）实验结果空白对照特异性94.1%抗原AESAT-6抗原 BCFP10灵敏度95.3%共三十一页共三十一页共三十一页共三十一页临床(ln chun)应用及科室共三十一页临床应用1 、结核病辅助(fzh)诊断 /疗效评价“菌阴”结核病患者的辅助诊断肺外结核的鉴别(jinbi)诊断抗痨治疗的疗

12、效评价2 、免疫力低下 /受抑制患者的结核诊断/感染筛查使用生物制剂 /免疫抑制剂患者的结核感染筛查HIV感染者/ 肾透析患者/器官移植患者3 、儿童结核病的辅助诊断4 、结核密切接触者 /高危人群的结核感染筛查结核病患者的家属 /医务工作者 /监狱囚犯5 、接触追踪共三十一页肺内/外结核(jih)辅助诊断2周以上不明原因发热(f r)病人的结核感染排筛诊断阴性结果95%以上可排除结核感染结核/感染/呼吸科共三十一页生物制剂/免疫抑制剂使用前的结核筛查肺结核与肺间质病的鉴别(jinbi)诊断“结脑”和“狼脑”的鉴别诊断写入由全国(qun u)风湿病学权威署名的英夫利西单抗治疗前结核预防与管理专

13、家建议风湿免疫科共三十一页腹水(fshu)待查肠结核的鉴别诊断(zhndun)发热待查生物制剂治疗前结核筛查（克罗恩病，炎症性肠病）消化科共三十一页移植(yzh)，HIV感染者并发结核神经内科，结核性脑膜炎的辅助(fzh)诊断肾内科，肾结核的鉴别诊断，血透患者的结核筛查内分泌科，糖尿病患者的结核筛查血液科，血液病治疗前的结核筛查（血液病合并活动性结核）生殖中心，盆腔结核造成不孕不育，试管婴儿手术前的结核排筛骨科，骨结核诊断其他科室共三十一页合并(hbng)结核的相关疾病艾滋：据报道，艾滋病患者合并结核病感染者为15.9%50%。HIV的流行已成为全球结核病发病率及死亡率第三次回升的主要原因，而

14、结核病也是艾滋病患者最常见的机会感染和致死病因。风湿病：日前判断风湿病患者是否存在LTBI，除通过详细询问病史(bn sh)、行x线胸片检查外主要依靠PPD试验的结果。而大部分患者在接受肿瘤坏死因子(TNF-)拮抗剂治疗之前往往已接受免疫抑制治疗，包括甲氨蝶呤(MTX)、糖皮质激素等，这导致PPD试验假阴性率升高。糖尿病：我国9 240万成年人有糖尿病，1.482亿成年人处于糖尿病前期。糖尿病是活动性结核的一个中度甚至高强度的危险因素。可能是因为持续的高血糖损害了针对结核杆菌的机体免疫。血液病：血液病合并活动性结核发生率约为该发病率的15. 5 倍。因自身免疫功能低下, 大部分患者长期用免疫抑

15、制剂，PPD 试验阴性占多数，同时合并其他感染，使误诊率较高。抗TNF治疗：广泛应用于免疫介导的炎性疾病(immunemediated inflammatory diseases，IMID)，如类风湿关节炎(RA)、强直性脊柱炎(AS)、银屑病关节炎、克罗恩病等。其它疾病：肿瘤、晚期肾病、器官移植、肝硬化、肺隐球菌病、肺结核合并非结核分枝杆菌肺病、儿童结缔组织疾病等。共三十一页（1）肝素抗凝全血，常温(chngwn)保存（2）采血量：成人(chng rn)全血量4-6ML，儿童3ML，免疫力或白细胞量低下者6-8ML（3）标本要求32小时内达到实验室（建议取血人员到达后采血）报告时间：2个工作日收费标准：800元/测试咨询电话：400-7118-000；采血要求项目的特点: 简便、快速、准确共三十一页内容摘要感染现状(xinzhung)。早期抗原靶6（ESAT-6，early secreted。培养滤液蛋白10（CFP 10，culture。瑞士（瑞士肺