第19章-支原体、衣原体、立克次氏体

1、第十八章-第二十一章 支原体、立克次体、衣原体、螺旋体医学微生物学第十八章 支原体(Mycoplasma) 1.生物学性状 支原体的概念、培养特性及其与细菌L型的区别。 2.主要病原性支原体 (1) 肺炎支原体所致疾病。 (2) 解脲脲原体、人型支原体及生殖支原体所致疾病。 重点内容 支原体 (mycoplasma) 概念： 缺乏细胞壁的原核细胞型微生物 形态上呈多形性 能通过细菌滤器 二分裂繁殖 能在无生命培养基上独立生长繁殖的最小的原核细胞型微生物。柔膜体纲支原体目肺炎支原体，人型支原体，生殖支原体，穿透支原体，发酵支原体，梨支原体解脲脲原体支原体分类支原体科无胆甾原体科螺原体科支原体属脲

2、原体属致 病 类 别肺炎支原体（M.pneumoniae)人型支原体 (M.hominis)生殖器支原体 (M.genitalium)穿透支原体 (M.penetraus) 溶脲脲原体 (U.urealyticum) 一、生物学性状 1、形态、结构： 形态：呈多形性 可通过细菌滤器（最小，0.20.3m ） 无细胞壁，细胞膜含胆固醇较多 繁殖方式：二分裂，出芽等 特殊结构：荚膜，顶端结构 染色方法：姬姆萨（Giemsa ）染色淡紫色 G结构: 最外层为细胞膜，三层结构，内外层为蛋白质及糖类，中间层为脂质；少数有荚膜，有的有特殊的顶端结构。 特殊的顶端结构： 粘附宿主上皮细胞表面，与支原体的致病

3、有关。2、培养 营养要求比一般细菌高，必须在含血清、酵母浸膏和胆固醇的培养基上生长繁殖， 生长缓慢。 pH：适宜7.68.0（7.0易死亡），但解脲脲原体最适pH5.56.5 形成“荷包蛋”样菌落，有鉴别意义。 液体培养基不易形成混浊。3、抗原结构 补体结合试验可检测糖脂类抗原 ELISA试验可检测蛋白质类抗原 血清抗体可用生长抑制试验（growth inhibition test, GIT）和代谢抑制试验（metabolic inhibition test, MIT）鉴定生化反应支原体葡萄糖 精氨酸尿素吸附细胞 致病性肺炎支原体+-红细胞肺炎、支气管炎人型支原体-+-泌尿生殖道感染生殖支原体

4、+-泌尿生殖道感染穿透支原体+-红细胞CD4+T细胞巨噬细胞 条件感染多见于艾滋病解脲脲原体-+-泌尿生殖道感染流产及不孕不育4、抵抗力 较弱 不耐干燥、热，耐低温；对-内酰胺类抗生素（影响细胞壁合成）不敏感；对作用于胆固醇、干扰蛋白质合成、阻碍DNA合成的药物敏感。5、支原体与细菌L型的主要区别 主要性状 支原体 细菌L型 来源 自然界中广泛存在的独立微生物 细菌胞壁缺陷的变异型 返祖 在任何情况下不能变成细菌 除去抗生素等物质可回复为细菌原有形态 遗传 在遗传上与细菌无关 在遗传上与细菌相关 培养 需加胆固醇 一般不需要胆固醇 两者相同点？缺乏细胞壁，形态多样，能通过滤菌器。固体培养菌落呈

5、荷包蛋样或颗粒状。临床表现相似间质性肺炎、泌尿生殖道感染、不育等支原体与细菌L型的相同点二、致病性 名称 所致疾病 传播 肺炎支原体 原发性非典型肺炎、 呼吸道 支气管炎人型支原体 泌尿生殖道感染 条件致病生殖器支原体 泌尿生殖道感染 性接触穿透支原体 多见于艾滋病 多种途径解脲脲原体 泌尿生殖道感 性接触、垂直传播1、肺炎支原体： 传染源：病人、带菌者 传播途径：呼吸道 所致疾病：原发性非典型性肺炎 （1）主要经飞沫传播，但大多数发生于夏 末秋初，515岁青少年发病率最高。 （2）特殊的顶端结构：P1表面蛋白（170 kDa）和P30（32 kDa）为主要的粘附蛋白，使肺炎支原体黏附于呼吸道

6、上皮。 （3）具有超抗原作用，能刺激炎症细胞在感染部位释放大量的淋巴因子（如TNF-、IL-1、IL-6）引起组织损伤。原发性非典型性肺炎：（primary atypical pneumonia） 临床以咳嗽、发热、头痛、咽痛和肌肉痛为主，可并发支气管肺炎、皮疹、心血管和神经系统症状。2、解脲脲原体： （1）经性接触，引起非淋菌性尿道炎。 （2）经胎盘传染给胎儿，引起早产、死胎和新生儿呼吸道感染。 （3）与不孕症有关 三、免疫性 固有免疫 适应性免疫体液免疫： 抗膜蛋白的抗体包括IgM、IgG和SIgA。细胞免疫： 主要是特异性CD4Th1 细胞分泌细胞因子。四、微生物学检查（一）分离培养鉴定

7、：耗时、阳性检出率64%（二）血清学试验1、冷凝集试验：辅助诊断2、生长抑制试验（GIT）和代谢抑制试验（MIT）（三）分子生物学检测：PCR技术 （快速、特异、敏感 ） PCR技术思考题细菌L型与支原体在生物学性状方面有何相似之处？其主要区别是什么？简述支原体形态结构的主要特征。简述致病性支原体的种类及其致病性。名词解释：支原体(mycoplasma)、冷凝集试验 课外阅读资料 1 吴移谋，叶元康. 支原体学. 北京 人民卫生出版社，2008年2 Blanchard A, Browning G. Mycoplasma: Molecular Biology, Pathogenicity and

8、 Strategies for controlCRC press, 20053 Rottem S. Interaction of mycoplasmas with host cells. Physiol Rev, 2003,Apr;83(2):417-4324 Tully JG, Raz S. Molecular anddiagnostic procedures in mycoplasmology. Vol II. New York, Academicpress, 1996第十九章 立克次体(rickettsia) 重点内容立克次体的概念、形态、染色及其培养特性；普氏立克次体、斑疹伤寒立克次体

9、、恙虫病东方体的传染源、传播媒介、所致疾病及防治原则。立克次体 (rickettsia) 概念： 立克次体（rickettsia）是一类以节肢动物为传播媒介、严格细胞内寄生的原核细胞型微生物。 对人致病的立克次体立克次体属Rickettsia 东方体属Orientia 埃立克体属Ehrlichia 无形体属Anaplasma斑疹伤寒群 Typhus group 斑点热群 Spotted fever group 普氏立克次体R. prowazekii莫氏立克次体 R. typhi 恙虫病东方体O. tsutsugamushi 查菲埃立克体E. chaffeensis 嗜吞噬细胞无形体A.phag

10、ocytophilum 立氏立克次体 R. rickettsii共 同 特 点专性胞内寄生、二分裂繁殖大小介于细菌与病毒之间以节肢动物作为传播媒介或储存宿主多形态，G-大多数为人畜共患病原体对多种抗生素敏感结构 与革兰阴性菌相似 细胞壁 脂多糖 粘附宿主细胞 微荚膜样黏液层 抗吞噬一、生物学性状：与G细菌类似1、形态与结构： 多形态性，球杆状或杆状 柯克斯体更小，多形性更明显 G 姬姆萨染色（紫色）细胞中的立克次体细胞中的立克次体2、培养特性活细胞动物接种、鸡胚卵黄囊接种、细胞培养培养特性 细胞培养专性细胞内寄生 鸡胚卵黄囊接种 接种动物:小鼠、家兔、豚鼠 912h分裂一代，最适生长温度为32

11、35动物接种细胞培养卵黄囊胚体羊膜囊绒毛尿囊腔气室鸡胚结构模式图鸡胚接种3、抗原构造：与G-菌非常相似 群特异性抗原 脂多糖 种特异性抗原 外膜蛋白外 斐 反 应变形杆菌某些OX菌株代替相应的立克次体抗原进行非特异性凝集反应，检测人类或动物血清中有无相应的Ab本质：交叉凝集试验立克次体病的辅助诊断外斐反应（Weil-Felix reaction） 斑疹伤寒立克次体共同O抗原 恙虫病立克次体 普通变形杆菌X19、X2、XK菌株OX19、OX2、OXK + 患者血清交叉凝集试验 可辅助诊断立克次体病 主要立克次体与变形杆菌抗原交叉现象变形杆菌菌株立克次体 OX19 OX2 OXK普氏立克次体 +

12、+ 斑疹伤寒立克次体 + + 立氏立克次体 + + 恙虫病立克次体 +4、抵抗力： 较弱 5630min即被灭活 耐低温、干燥 节肢动物粪便中可存活一年以上 对四环素和氯霉素敏感 禁用磺胺类药物二、致病性与免疫性流行环节 传播媒介节肢动物 储存宿主 寄生宿主 啮齿类动物 储存宿主二、致病性与免疫性致病物质 脂多糖（细菌内毒素相似） 磷脂酶A所致疾病 人畜共患性疾病 自然疫源性疾病 实验室感染 致病机制立克次体 胞膜受体结合 被吞入局部血 胞内大量繁殖 管内皮细胞内破坏红细胞 第一次菌血症 溶血 全身中毒症 全身血管内皮细胞 内毒素 皮疹、脏器功能紊乱 第二次菌血症 磷脂酶A磷脂酶A血管炎内毒素

13、立克次体穿入细胞（一）普氏立克次体（R. prowazekii） 流行性斑疹伤寒(epidemic typhus)虱传斑疹伤寒 (louse-borne typhus)所致疾病流行性斑疹伤寒临床表现: 潜伏期 （1014d） 高热、头痛、肌肉痛等 （47d） 皮疹 神经、心血管和其他器官病变 斑疹伤寒流行环节 传染源： 病人，不属于人畜共患病 储存宿主： 病人 传播媒介： 人虱 传播方式： 人 人虱 人（二）斑疹伤寒立克次体 (R. typhi)地方性斑疹伤寒（endemic typhus）鼠型斑疹伤寒（murine typhus）虱传斑疹伤寒（flea-borne typhus）所致疾病地方

14、性斑疹伤寒临床表现： 与流行性斑疹伤寒相似，但病情较轻，发病缓慢，持续时间短，很少侵害中枢神经系统。 流行环节 传染源：鼠储存宿主：啮齿类动物(主要为老鼠) 传播媒介：鼠蚤或鼠虱传播方式：鼠 鼠蚤 人 人虱 鼠虱鼠蚤吃饱的跳蚤人体虱（三）恙虫病东方体（O. tsutsugamushi ）恙虫病（tsutsugamushi disease）丛林斑疹伤寒（scrub typhus)所致疾病恙虫病(丛林热)临床表现: 潜伏期 （710d） 高热、剧烈头痛、耳聋等 红斑样皮疹、水疱、溃疡 周围红润，上覆黑色痂皮（焦痂）恙虫病皮肤焦痂流行环节 传染源：鼠储存宿主：恙螨传播媒介：恙螨 寄生于恙螨体内，可经

15、卵传代。人若进入恙螨的孳生地，可能受感染(亦称“丛林热”) 流行环节传播方式： 若虫成虫虫卵 鼠等幼虫 幼虫人 虫卵成虫若虫免疫性 以细胞免疫为主，体液免疫为辅病后可获得较强免疫力主要病原性立克次体病原体所致疾病媒介贮存宿主普氏立克次体流行性斑疹伤寒人虱 人莫氏立克次体或斑疹伤寒R地方性斑疹伤寒鼠蚤、鼠虱鼠恙虫病东方体恙虫病恙螨野鼠免疫力持久持久持久三、检查与防治 1、外斐氏反应：2、分离鉴定：豚鼠（斑疹伤寒、Q热）、小鼠（恙虫病）。3、一般预防：灭鼠、杀灭传播媒介节肢动物；改善生活条件、讲究个人卫生，加强防护。4、特异预防：疫苗接种灭活疫苗5、治疗：氯霉素、四环素治疗；禁用磺胺。思考题立克次

16、体的共同特点有哪些?我国主要立克次体病的种类、致病特点、病原体及其传播媒介和储存宿主是什么？课外阅读资料目录 1贾文祥. 医学微生物学. 第2版，北京：人民卫生出版社，2010.2Brooks GF. Jawetz, Melnick & Adelbergs Medical Microbiology. 25th ed. McGraw-hill, 2011.3Murray PR, Rosenthal KS, Pfaller MA. Medical Microbiology. 6th ed. Louis: Mosby, 2008.4Bechah Y, Capo C, Mege J L, et al.

17、 Epidemic typhus. Lancet Infect Dis, 2008; 8: 4174265Badiaga. S and Brouqui. P. Human louse-transmitted infectious diseases. Clinical Microbiology and Infection, 2012,18: 332337第二十章 衣原体 (chlamydia) 重 点 与 难 点 重点： 1.生物学性状 原体、始体、包涵体的概念、原体与始体的比较 2.主要病原性衣原体 (1) 沙眼衣原体分型及其所致疾病 (2) 肺炎嗜衣原体与鹦鹉热嗜衣原体所致疾病难点： 1.人

18、类致病衣原体的致病性与致病机制 2.致病衣原体的微生物学检查衣原体 (chlamydia) 概念： 一类能通过细菌滤器 严格细胞内寄生 有独特发育周期的原核细胞型微生物衣原体科衣原体属(3个种)沙眼衣原体鼠衣原体猪衣原体嗜衣原体属 (6个种)肺炎嗜衣原体鹦鹉热嗜衣原体兽类嗜衣原体流产嗜衣原体猫嗜性衣原体豚鼠嗜性衣原体衣原体分类种类沙眼衣原体肺炎衣原体鹦鹉热衣原体致病衣原体沙眼生物亚种性病淋巴肉芽肿生物亚种鼠生物亚种四种衣原体的性状比较共 同 特 征1、形态：球形，G-，光镜可见2、含有DNA和RNA3、有细胞壁结构,但只含有微量的胞壁酸4、专性胞内寄生5、有独特发育周期6、对多种抗生素敏感 主

19、要生物学性状形态原体（elementary body，EB ）小而致密，位于胞外，为成熟典型衣原体，有感染性，无繁殖力始体（initial body,IB）（网状体,reticulte body,RB）大而疏松，位于胞内，为衣原体分裂阶段，无感染性，正在繁殖独特的发育周期 原体吸附侵入发育增大为始体始体二分裂增殖并成熟为原体释放衣原体的发育周期48h-72h原体和始体的比较性状原体始体大小（m） 0.20.4 0.51.0 细胞壁-代谢活性-胞外稳定性强弱感染性强无繁殖能力无强RNA:DNA比 1:13:1包涵体包涵体系指在易感细胞内含繁殖的始体和子代原体的空泡，有助于诊断。培养特性： 专性细

20、胞内寄生 绝大多数鸡胚卵黄囊接种培养（感染后36天，鸡胚死亡） 人及各种动物的原代或者传代细胞抵抗力： 对热敏感 对消毒剂敏感 耐低温：可冻干保存 抗生素:大环内酯类和四环素类敏感 衣原体发现 1956年汤飞凡等首次分离培养出沙眼衣原体，无可争辩地结束了半个多世纪关于沙眼病原的争论。他是世界上发现重要病原体的第一个中国人，也是迄今为止唯一的一个中国人 。1897-1958二、致病性 （一）沙眼衣原体 ：有两个生物变种（1）沙眼生物变种 -沙眼（2）性病淋巴肉芽肿亚种 -生殖系统炎症 1.沙眼 通过眼-手-眼或眼-物-眼途径直接或间接密切接触传播。由A、B、Ba和C血清型引起。 早期流泪，后期结

21、膜瘢痕、睑内翻、倒睫及角膜血管翳引起角膜损害，影响视力或致盲。 （解放初期，中国人口中有50患有沙眼，边远农村有“十眼九沙”之说，危害极大。) 2.包涵体结膜炎 （1）婴儿结膜炎，引起急性化脓性结膜炎（包涵体脓漏眼），不侵犯角膜，能自愈； （2）成人结膜炎可经两性接触、经手至眼或污染的游泳池水感染，引起滤泡性结膜炎，又称游泳池结膜炎，一般经数周或数月痊愈，无后遗症。 3.泌尿生殖道感染 沙眼生物型DK血清型引起，男性多表现为非淋菌性尿道炎，并可合并附睾炎、前列腺炎、直肠炎等；女性表现为尿道炎、宫颈炎、输卵管炎与盆腔炎等。 4.婴幼儿肺炎 经产道感染。 5.性病淋巴肉芽肿 侵犯男性腹股沟淋巴结，

22、引起化脓性淋巴结炎和慢性淋巴肉芽肿，常形成瘘管；亦可侵犯女性会阴、肛门、直肠，引起会阴-肛门-直肠组织狭窄。（二）肺炎衣原体、鹦鹉热衣原体： 肺炎，经呼吸道传播。引起肺炎、支气管炎、咽炎和鼻窦炎等。 起病缓慢，临床症状与肺炎支原体相似，表现为咽痛、咳嗽、咳痰、发热等，一般症状较轻。与冠心病、动脉粥样硬化等慢性病的发生密切相关，但其具体机制尚待深入研究。三、免疫力 不强，易造成持续及反复感染。四、检查与防治直接涂片镜检 采用Giemsa、碘液，检查上皮细胞内有无包涵体。分离培养 采用感染组织的刮取物或分泌物，接种鸡胚卵黄囊或传代细胞，用直接免疫荧光法或酶联免疫法检测。核酸检测 预防：注意个人卫生

23、，不使用公共毛巾及脸盆，避免接触。思考题衣原体与细菌和病毒有何异同点？简述致病性衣原体的种类及致病性？试比较原体和始体的性状？名词解释：衣原体（chlamydia ）、原体 （elementary body，EB）、网状体（reticulate body，RB）第二十二章 螺旋体 (spirochete) 重 点 与 难 点 主要致病性螺旋体种类及其相关疾病。 钩端螺旋体病传染源、流行特点及标本采集、实验室诊断。梅毒临床和病理特征及实验室诊断。莱姆病传播媒介、临床特征及实验室诊断。第二十二章 螺旋体 (spirochete) 一类细长、柔软、弯曲呈螺旋状，运动活泼的原核细胞型微生物。 致病性螺

24、旋体分为： 1、疏螺旋体属：螺旋稀疏，不规则呈波纹状。如回归热螺旋体。 2、密螺旋体属：螺旋细密规则，两端尖细，菌体硬直。如梅毒螺旋体。 3、钩端螺旋体属：螺旋细密规则，菌体一端或两端弯曲呈钩状，菌体呈C或S型。如钩端螺旋体。 回归热螺旋体：疏螺旋体属（血涂片，吉姆萨染色，放大1 000倍）苍白螺旋体：密螺旋体属（暗视野显微镜，放大1 000倍）犬钩端螺旋体：钩端螺旋体属（暗视野显微镜，放大1 000倍）第一节 钩端螺旋体 一、生物学性状：1、形态染色： 菌体纤细，长短不一，两端有钩，菌体呈C、S状，镀银染色呈棕褐色。 运动活泼。2、培养特性：营养要求较高，含10%兔血清的柯 氏培养基。液体培

25、养基中云雾状生长。3、生化：不活泼，不分解糖类和蛋白质，产过氧 化氢酶，有些产溶血素。4、抗原结构：群特异性抗原-LPS 型特异性抗原-糖蛋白复合物 （全球：25群，273型，我国：20群，80型）5、抵抗力：在中性的湿土或水中可存活数月；对 热、消毒剂、抗生素敏感。 1、致病物质： （1）细胞毒因子（CTF）： 注射小鼠，可导致肌肉痉挛和呼吸困难。 （2）溶血素： 类似磷脂酶，破坏红细胞膜而致溶血。 （3）内毒素样物质：引起炎症、坏死、发热。二、致病性与免疫性2、所致疾病：钩体病（人畜共患病）/打谷黄/ 稻田热 鼠、猪（储存宿主）传染源肾脏繁殖（隐性感染）尿排菌污染水源、土壤人感染途径（皮肤

26、、黏膜、眼结膜、垂直）传播方式：发病过程：1、早期中毒症状（败血症期） 寒热酸痛一身乏，眼红腿痛（腓肠肌痛）淋结大。2、中期的器官损伤（肝、肾、肺、神经系统等）3、后期的超敏反应损伤：眼葡萄膜炎、脑动脉炎等。症状：恶寒、发热、头痛、全身酸痛、结膜充血、 甚至器官损伤。临床常见：（1）流感伤寒型：（60%-80%）早期钩体败血症的症状，表现如流感，一般内脏损害较少。（2）黄疸出血型：发热、恶寒、头痛、出血、黄疸及肾脏损害。（3）肺出血型：胸闷、咳嗽、咯血、紫疳，病性凶险、常死于大咯血，死亡率高。3、免疫性： 免疫持久，以体液免疫为主，细胞免疫作用不大。三、检查防治： 1、检查钩体：发病一周取血，

27、二周取尿液，有脑膜炎症时取脑脊液，暗视野显微镜检查或镀银染色镜检，也可用柯氏培养基培养鉴定 。 2、动物实验：豚鼠或金地鼠3、血清学试验：取双份血清 显微镜凝集试验，目前常用的方法。4、防治原则：做好防鼠、灭鼠工作，保护水源。治 疗首选青霉素，也可用庆大、强力霉素。 第二节 梅毒螺旋体 一、形态染色1、形态纤细，两端尖直，运动活泼。 2、镀银染色呈棕褐色。 3、抵抗力极弱。二、致病性与免疫性： （1）传染源：病人。 （2）传播途径及所致疾病： 经胎盘，致先天性梅毒/胎传梅毒。 经性接触，致后天性梅毒/获得性梅毒。 期梅毒期梅毒期梅毒先天梅毒获得性梅毒：分三期期（初期）梅毒：感染性极强，破坏性小。 感染后3W左右局部出现无痛性硬下疳，多见于外生殖器，一般48W后，常自愈。渗出液中有大量苍白亚种螺旋体。期（初期）梅毒 一期梅毒（包皮硬下疳）一期梅毒（女阴硬下疳）一期梅毒（上唇硬下疳）期梅毒：反复复发，感染性强，破坏性小。 发生于硬下疳出现后28W。经血液或淋巴液全身扩散，全身皮肤、粘膜常有梅毒疹，全身淋巴结肿大，有时亦累及骨、关节、眼及其他脏器。一般3W3M消退。在