项目九：食品常见有害有毒物质测定ppt课件

1、 工程九 食品常见有害有毒物质的检测内容简介 本章讲述了食品食品中常见有害有毒物质如有机氯农药、有机磷农药、黄曲霉毒素等的测定方法以及各种测定方法的本卷须知。工程九 食品常见有害有毒物质的检测学习目的与要求：1、掌握食品常见有害有毒物质如有机氯农药、有机磷农药残留及黄曲霉毒素等的测定操作方法2、熟练运用气相色谱和液相色谱仪工程九 食品常见有害有毒物质的检测重点：有机氯农药、有机磷苯农药残留及黄曲霉毒素等的测定操作方法、气相色谱和液相色谱仪的运用难点：气相色谱和液相色谱仪的运用第七章 食品常见有害有毒物质的检测第一节 有机氯农药残留的测定第二节 有机磷农药残留的测定第三节 黄曲霉毒素的测定本章目

2、录第七章 食品常见有害有毒物质的检测一、定性检验1、焰色法 1原理 此法是利用样品中的有机氯受热分解为氯化氢，它与铜勺外表的氧化铜作用，生成挥发性的氯化铜，在无色火焰中呈绿色。用以鉴别样品提取液中有机氯农药的存在。第一节 有机氯农药残留的测定第一节 有机氯农药残留的测定2操作步骤 取铜小勺在煤气灯或酒精灯上灼烧，直至铜勺外表覆盖一层黑色氧化铜为止。取少量疑心污染有机氯农药的食品，用乙醚浸渍振摇并过滤。将滤液逐滴加在铜勺外表蒸发，然后进展灼烧，呈绿色火焰者，阐明食品被有机氯农药(包括DDT及六六六)污染。假设样品中农药含量很低，可将乙醚提取液浓缩蒸干，用少量乙醇溶解残留物，然后按上法检验，本法最

3、低检出范围为1ug有机氯。第一节 有机氯农药残留的测定2、亚铁氨化银试纸法1原理 此法是根据有机氯农药与碳酸钠灼烧生成氯化钠。与硫酸作用生成氯化氢。氯化氢与亚铁氰化银试纸反响，在硫酸铁存在下产生蓝色，可鉴别有机氯的存在。第一节 有机氯农药残留的测定2操作步骤 a、亚铁氰化银试纸 称取硝酸银25g、亚铁氰化钾13g，分别溶于25mL水中。将硝酸银溶液缓慢加到亚铁氰化钾溶液中，离心分别，将沉淀物反复用水洗涤至不含银离子为止。在沉淀中加浓氨水25mL，摇匀后，将滤纸浸入悬浮氨溶液中5min，取出试纸用热风吹干，备用.第一节 有机氯农药残留的测定b、检测 取10Og左右待测磨碎样品，置于三角烧瓶中，参

4、与20mL乙醚，振摇后，分出乙醚层。置水浴上挥发至04ml，移入小试管中，参与一勺碳酸钠，在水浴上蒸干、冷却。 取亚铁氰化银试纸条，在1gL硫酸铁溶液中浸湿后，悬挂于橡皮塞下。向试管内残渣小心滴人浓硫酸23滴，迅速将挂有试纸的橡皮塞塞紧小试管，将试管移人水浴内加热smin，假设试纸变为蓝色，表示样品中有有机氯农药存在。实验中应防止无机氯的干扰。二、定量检验 采用气相色谱法1、农药提取2、净化3、测定1气相色谱参考条件色谱柱：内径34mm，长1.22m的玻璃柱，内装涂以OV-715g/L和QF-120g/L的混合固定液的80100目硅藻土。第一节 有机氯农药残留的测定2电子捕获检测器 汽化室温度

5、：215；色谱柱温度：195 ；检测器温度：225 ；载气氮气流速：90ml/min；3色谱图4计算第一节 有机氯农药残留的测定一、定性检验1、刚果红法 1原理 利用样液中的有机磷农药经溴氧化后，与刚果红作用，生成蓝色化合物，来鉴别样品能否存在有有机磷农药。第二节 有机磷农药残留的测定第二节 有机磷农药残留的测定2、操作步骤 取经粉碎的样品用苯浸泡、振摇，用滤纸过滤，取滤液于蒸发皿上，参与100gL甘油甲醇溶液1滴，沥干，加1mL水混匀。将样液滴于定性滤纸上，挥发干。将滤纸置于溴蒸气上熏5min，取出，在通气处将溴挥发尽。滴人5gL刚果红乙醇溶液，置于滤纸的点样处，假设滤纸显示出蓝紫色那么表示

6、样品中有有机磷存在。呈粉红色者那么为溴的色泽。第二节 有机磷农药残留的测定2、纸上斑点法1原理 样液中的硫代磷酸酯类有机磷与2，6一二溴苯醌氯酰亚胺，在溴蒸气作用下，构成各种有颜色的化合物，用以鉴定能否存在有机磷及是哪一种有机磷。第二节 有机磷农药残留的测定2操作步骤 a、2，6一二溴苯醌氯酰亚胺试纸 称取005g 2，6一二溴苯醌氯酰亚胺，溶于10mL95 %(体积分数)乙醇中，将定性滤纸浸湿，晾干备用。 b、检验 汲取按刚果红法制备的样液1滴，于2，6一二溴苯醌氯酰亚胺试纸上，稍干，置于溴蒸气上蒸熏片刻，呈现出不同颜色的斑点，根据所显示斑点的颜色鉴别属于哪种有机磷农药。实验时，为防止色素干

7、扰，试纸要暂时配制。有机磷农药呈色反响如表6-1所示。农药种类反应颜色反应时间3911鲜黄，周围较深 5s-3min1605淡黄紫红 30s-3min1059鲜黄暗黄30s-3min4049黄黄棕30s-5min乐果黄橙黄表6一l 有机磷农药的呈色反应20s-5minM-74淡土黄暗紫红30s-5min三硫磷土黄杏红15s-5min1240鲜黄暗黄30s-3min有机磷农药的呈色反响二、定量检测 采用气相色谱检测法 1、规范溶液的配制 2、试样制备 3、有机磷农药提取 4、有机磷农药净化5、测定第二节 有机磷农药残留的测定5、测定1气相色谱条件； 色谱柱：玻璃柱2.6m3mm id，填装涂有4

8、.5DC2002.5OV17的ChromosorbWAW DMCS80100目的担体。玻璃柱2.6m3mmid，填装涂有 1.5质量分数DCOE1的Chromosorb WAW DMCS6080目气体速度：氮气N250mLmin、氢气H2100ml/min、空气 50mLmin。温度：柱温240、汽化室260、检测器270 第二节 有机磷农药残留的测定2测定。汲取25L混合规范液及样品净化液，注入色谱仪中，以保管时间定性。以试样的峰高或峰面积与规范比较定量。6、结果计算第二节 有机磷农药残留的测定7、16种有机磷农药的色谱图 第二节 有机磷农药残留的测定黄曲霉毒素，是一组化学构造类似的化合物。

9、 已分别鉴定出12种，包括B1、B2、G1、G2、M1、M2、P1、Q、H1、GM、B2a和毒醇。第三节 黄曲霉毒素的测定黄曲霉毒素B1 黄曲霉毒素B2 黄曲霉毒素B3 黄曲霉毒素B4黄曲霉毒素B5黄曲霉毒素B6表1 中国对食品中黄曲霉毒素的最高允许含量 第三节 黄曲霉毒素的测定食 物 名 称最高允许含量/(ug/kg)玉米、花生、花生油、坚果和干果(核桃、杏仁)20(黄曲霉毒素B1)玉米、花生仁制品(按原料折算)20(黄曲霉毒素B1)大米、其他食用油(香油、菜籽油、大豆油、葵花油、胡麻油、茶油、麻油、玉米胚芽油、米糠油、棉籽油)10(黄曲霉毒素B1)其他粮食(麦类、面粉、薯干)、发酵食品(酱

10、油、食用醋、豆豉、腐乳制品)、淀粉类制品(糕点、饼干、面包、裱花蛋糕)5黄曲霉毒素B1)牛乳及其制品(消毒牛奶、新鲜生牛乳、全脂牛奶粉、淡炼乳、甜炼乳、奶油)、黄油、新鲜猪组织(肝、肾、血、瘦肉)0.5(黄曲霉毒素M1)一、薄层层析法 1、仪器 小型粉碎机、样筛、电动振荡器、玻璃浓缩器、玻璃板5cm20cm、薄层板涂布器、展开槽(25cm6cm4cm)、紫外光灯100125W、波长365nm滤光片、微量注射器。2、测定方法 (一)样品处置 (二)黄曲霉毒素提取 第三节 黄曲霉毒素的测定(三)测定 1单向展开法 (1)薄板制备：称取3g硅胶G，加23倍量的水，研磨12min呈糊状后，倒入涂布器推

11、成5cm20cm，厚度约0.25mm的薄层板3块。在空气中枯燥15min，在100活化2h，取出，放枯燥器中保管。普通可保管23d，假设放置时间较长，可再活化后使。 第三节 黄曲霉毒素的测定(2)点样在距薄层板下端3cm的基线上用微量注射器或血红素吸管滴加样液。第一点：10l AFTB,规范运用液(0.04gml)。 第二点：20l 样液。 第三节：20l 样液+10L0.04gml AFTB1规范运用液。 第四点：20l 样液+10L0.02gml AFTB1规范运用液。 第三节 黄曲霉毒素的测定 (3)展开与察看 在展开槽内加10mL无水乙醚，预展12cm，取出挥干。再于另一展开槽内加10

12、mL丙酮三氯甲烷(8+92)，展开1012cm，取出，在紫外光下察看结果. 方法如下： a由于样液上加滴了AFTB1规范，可使AFTB1规范点与样液中AFTB1，荧光点重叠。假设样液为阴性，薄板上第三点AFTB1为0.0004g，可用作检查样液中AFTB1最低检出量能否正常出现；假设样液为阳性；那么起定性作用。薄层板上第四点AFTB1规范为0.002g，主要起定位作用。 第三节 黄曲霉毒素的测定b假设第二点与AFTB1规范点的相应位置上无蓝色荧光点，那么表示样品中AFTB1含量5gkg；假设在相应位置上有蓝色荧光点，那么需进展确证实验。 (4)确证实验：为确认薄层样上样液荧光系由黄曲霉毒素B1

13、产生的，加滴三氟乙酸，产生AFTB1的衍生物，展开后此衍生物的比移值约在0.1左右。于薄层板左边依次滴加两个点。 第一点：10L 0.04gmL AFTB1规范运用液。 第二点：20L样液 第三节 黄曲霉毒素的测定 于以上两点各加一小滴三氟乙酸盖于其上，反响5min后，用吹风机吹热风2min(板上温度不高于40)，再于薄层板上滴加以下两点。 第三点：10L 0.04gmL AFTB1规范运用液。 第四点：20L样液。 按上法展开并察看，样液能否产生与AFTB1规范点一样的衍生物。未加三氟乙酸的三、四两点，可依次作为规范与规范的衍生物空白对照。第三节 黄曲霉毒素的测定5稀释定量：样液中的AFTB

14、1荧光点的荧光强度，如与AFTB1规范点最低检出量0.0004g的荧光强度一致，那么样品中AFTB1含量为即为5gkg。 假设样液中荧光强度比最低检出量强，那么根据强度估计，减少滴加微升数，或将样液稀释后再滴加不同微升数，直至样液的荧光强度与最低检出量的荧光强度一致为止。滴加式样如下： 第一点：10LAFTB1规范运用液0.04gmL。 第二点；根据情况滴加 10L样液。 第三点：根据情况滴加 15L样液。 第四点：根据情况滴加20L样液。第三节 黄曲霉毒素的测定6结果计算 第三节 黄曲霉毒素的测定式中 X样品中AFTB1的含量，y/kg； V1参与苯一乙睛混合液的体积，mL； V2出现最低荧

15、光时滴加样液的体积，mL； D样液的总稀释倍数； m1 参与苯一乙腈混合液溶解时相当样品的质量，g； 0.0004AFTB1的最低检出限量，g。 2双向展开法 (1) 点样：取薄层板三块，在距下端3cm基线上，在距左边缘0.8lcm处，各滴加10LAFTB1(0.04gmL)规范液，在距左边缘2.83cm处，各滴加20L样液。然后在第二块板的样液点上加滴10L AFTB1(0.04gmL)规范液，在第三块板的样液点上加滴10L AFTB1(0.02gmL)规范液。 第三节 黄曲霉毒素的测定(2) 展开a横向展开：在展开槽内的长边置一玻璃支架，加10mL无水乙醇，将上述点好的薄层板靠规范点的长边

16、，置于展开槽内展酗，展至板端后，取出挥干。根据情况，需求时，可再反复12次。b纵向展开：挥干的薄层板以丙酮三氯甲烷(8:92)展开至10l2cm为止。丙酮与氯甲烷的比例，根据不同条件自行调理。 第三节 黄曲霉毒素的测定 (3) 察看与评定结果:a在紫外光下察看第一、二块板，假设第二块板在AFTB1规范点的相应处出现最低检出量，而在第一板与第二板的一样位置上未出现荧光，那么样品中AFTB1含量5gkg。 b假设第一块板与第二块板的一样位置上出现荧光点，那么将第一块板与第三块板比较，着第三块板上第二点与第一块板上第二点的一样位置上的荧光点能否与AFTB1规范点重叠，假设重叠，再进展确证实验。在详细

17、测定中，三块板可以同时做，也可按顺序做。当第一块板出现阴性时，第三块板可以省略，如第一块板为阳性,那么第二块板可省略，直接做第三块。 第三节 黄曲霉毒素的测定(4)确认实验：另取薄层板二块，于第四、五两板距左边缘0.81cm处，各滴加10LAFTB1(0.04gmL)规范液及1小滴三氟乙酸；在距左边缘2.83cm 处，于第四板滴加20L样液及1小滴三氟乙酸；于第五板滴加20L样液、10LAFTB1规范液及1小滴三氟乙酸，反响5min后，用热风吹2min板上温度不高于 40。 再用双向展开法展开后，察看样液能否产生与AFTB1规范点重叠的衍生物。察看时，可将第一板作为样液的衍生物空白板。假设样液

18、AFTB1含量较高时，那么将样液稀释后，按单向展开法中4做确认实验。第三节 黄曲霉毒素的测定 (5) 稀释定量 假设样液中AFTB1含量较高，可按单向展开法中5稀释定量操作。假设AFTB1含量较低，稀释倍数小，在定量的纵向展开板上仍有杂质干扰，影响结果判别，可将样液再做双向展开法测定，以确定含量。6结果计算：同单向展开法。第三节 黄曲霉毒素的测定第四节 液相色谱法测定食品中苯并(a)芘食品中苯并(a)芘在的测定方法有薄层层析法、荧光分光光度法、气相色谱和液相色谱法，这里引见液相色谱法。一、 原理 本法主要是利用样品经过提取、皂化或者液一液分配以及柱层析净化，除去脂肪类物质、色素和多环芳烃以外的其他物质后，再经过液相色谱仪中的色谱柱，将苯并芘从多环芳烃物质中分别出来。求出样品中苯并芘的含量。第四节 液相色谱法测定食品中苯并(a)芘二、仪器 (1)液相色谱仪： 色谱柱：ODS柱，柱长 250