API4000质谱仪培训教程课件

1、API 4000 培训教程LCMS原理和仪器硬件介绍液质系统的构成测试的样品通过LC和针泵导入MS中1. 样品导入离子源用来使样品带电；带电的粒子束通过接口进入到质量分析器-四级杆中2. 离子源四级杆通过所有的离子或者选择特定的母离子或者碎片离子；带电的离子束同时被四级杆聚焦后传输到另外一个四级杆中3. 质量分析器- 四级杆检测器记录到达离子的数量；数据分析软件可以通过这些信息获得相关的质谱图，并进行定性和定量处理 4. 离子检测和数据分析Q0Q1Q3DFCEMORSKEXIT Q2 (LINAC)质谱的性能指标质量准确度: 样品质量测量的准确度。高的质量准确度可以区分相近分子量的不同化合物。

2、分辨率: 是指分开两个峰的能力， 高的分辨率可以提高质量准确度、定性和定量性能。高的分辨率能够分离更复杂的物质。API 质谱系统通过半高峰宽(FWHM)来定义分辨率，用户可以选择Low，Unit，High三种分辨率。灵敏度: 物质能被测量的最低浓度，不同类型和分子量的物质灵敏度会有不同。质量范围: 决定所能测定的最低和最高m/z四级杆质谱仪的示意图Unstable Ion trajectoryStable Ion TrajectorySourceDetectorDC and RF voltages电喷雾离子化（ESI）- IonSpraytm雾化气使LC导入的液体样品气化喷雾针上的高压使液滴带

3、电 随着带电液滴中溶剂的挥发形成了离子ESI 离子蒸发液滴带有两种极性的离子，但其中的一种极性占支配地位随着溶剂的挥发，液滴表面某种极性的离子增多，电场增强当电场超过某个阈值后，离子互相排斥就从液滴的表面“飞溅”出去残留物通过废液系统排出与分析物分子反应电晕放电针(NC)带电的溶剂分子Orifice (DP)Mass AnalyzerX = Solvent MoleculeM = AnalyteCurtain Gas (CUR)真空大气压LC 流动相簇合物形成加热雾化(TEM)雾化气(GS1)APCI离子化过程分为3步进行：电晕放电针使离子源的 N2 或 O2 带电带电荷的N2 或 O2 传递

4、电荷给气化的溶剂分子带电荷的气化溶剂又将电荷转移给分析物大气压化学电离(APCI)四级杆理论四级杆上加载三种类型的电压:射频电压(RF) 固定频率的振荡电压，用来聚焦离子，形成共振离子轨迹.筛选电压(Filtering DC ，简称FDC) 加载在不同的四级杆上(随RF电压的变化而变化). 用来筛选所需要通过的离子帮助确定分辨率牵引电压(Rod Offset Voltage ，简称ROV) 用来确定离子轴向飞行能量（即离子通过四级杆的线性速度）的直流电压。仅有RF电压时(RF only)：在四级杆上没有加载FDC电压，只有RF与ROV电压此时四级杆通过所有的离子，不具有选择性RF电压如何聚焦离

5、子180 相移= 离子1. 离子被“B” 杆吸引.2. RF 电压反转后, 所有的离子被 A 杆吸引. 3. RF电压反转后, 所有的离子被另外一个 B 杆吸引4. RF 电压反转后, 所有的离子被另外一个 A 杆吸引. ，重复以上过程，离子就悬空在四级杆中BABARFRFRFRF180 相移180 相移End ViewBABAABBA仅有RF电压时 -A 杆 与 B 杆之间的相位相差180离子如何通过四级杆到达检测器ABBA*四级杆中的离子的飞行轨迹是否为螺旋形状或者其他更复杂的运动，目前还有争论到达检测器AABB仅有RF电压时 -A 杆 与 B 杆之间的相位相差180RF和ROV两种电压使

6、离子螺旋*飞出四级杆到达检测器5917561612541545BAAB906RF only 模式PPG 为例: RF only 模式时，所有的离子都能通过四级杆To DetectorQ0 & Q2 总为RF only 模式 当Q3选择时，Q1为 RF only 模式；当Q1选择时，Q3为 RF only模式 PPG 为例: RF + FDC电压让四级杆通过906离子.RF + FDC电压能过让所需的离子通过四级杆. 直接通过5917561612541545稳定的离子不稳定的离子碰撞上四级杆BAAB906RF + FDC到达检测器Q0 或者Q2上没有发生筛选，所有的离子都能通过.Q1 or Q3

7、Turbo V离子源介绍Turbo Vtm 离子源2个 750C 加热头TIS 或 APCI 探头液相导入垂直调节卡尺水平调节卡尺接地或三通分流接头离子源废气排放口喷雾出口电晕放电针 (APCI)Turbo VTM 离子源特点垂直和水平位置精确调节内化的气体管路和电路连接，方便使用90角垂直设计提供了高效的去溶剂化，提高仪器的耐受性对称的 750oC 加热头两种离子化探头: TIS & APCITurbo V 两种探头根据实际使用情况，调节喷雾针露出13mm如何安装和拆卸离子源拆卸：1. 完成正在进行的样品测试或者从Acquire menu中选择 Abort Sample command2.

8、Standby仪器停止LC流动相，然后Deactivate 仪器3. 松开样品导入连接管路的Peek 管接头，移开液相连接管路4. 往上旋转2个黑色的卡隼松开离子源.5. 水平往外拉Turbo V 离子源安装离子源1. 对准真空腔的接口把Turbo V 往里推到正确位置2. 往下转动2个黑色卡隼至水平方向，然后同时转动至卡紧为止（离子源是否接好以接口处的密封性评定）3. 连接液相管路到离子源相应的接头处离子源保存：长期不用的离子源建议防尘防潮保存API4000真空系统API 4000 真空系统Q0IQ1Q1Q3DFCEMSKEXIT Q2 (LINAC)OR真空接口四级杆质量分析器CAD ga

9、sISCUR760 torr8x10-3 torr1x10-5 torr机械泵分子泵2分子泵1TP1TP2接口不同处的真空度Q1 区域10 TorrQ0,入口电压(EP)6-8 mTorr大气压气帘气挡板Orifice孔气帘气取样锥孔(Skimmer)Orifice 挡板, 去簇电压 (DP)1-2 Torr真空差接口-API 4000接口部件-API 4000 系统耐用, 陶瓷材质具有化学惰性接口表面具有加热功能和气体连接口安装简便聚焦后的离子通过取样锥孔(Skimmer)进入到Q0区域四级杆内部构造图Q0Q1Q2Q3API4000正常真空度范围CAD=0时，真空度1.310-5torrCA

10、D=12时，真空度5.510-5torr具体的真空度值以装机时为准，当系统没有更换过与真空系统相关的零件时，真空度一般不会有大的变化。如果出现真空度太好或者太差的情况，在排除硬件的故障后，一般通过清洗接口可以解决。API4000气体管路连接a.高纯氮（Curtain Gas），输出压力0.4MPa（MAX60psi）-用于气帘气和碰撞气b.零级空气或以上（Gas1/Gas2），输出压力0.7MPa(MAX 105psi)为离子源提供雾化气c.无油空气或以上（Exhaust Gas），输出压力0.35MPa(MAX60psi)为废气排放系统提供负压API4000主机控制面板主机电源开关按钮RESET按钮及仪器状态指示灯电源接口液相同步信号接口主机通讯接口API 4000 开关机步骤开机顺序1.打开UPS电源，确认Curtain gas的输入压力为0.4MPa2.打开机械泵的电源开关3.机械泵工作至少15min5